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Copyright2004-2009版权所有盗版必究│细胞中的核酸、糖类和脂质Copyright2004-2009版权所有盗版必究│考点整合考点整合Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究要点探究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究√Copyright2004-2009版权所有盗版必究►探究点二实验检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理某些化学试剂能够使生物组织中相关的有机化合物产生特定的颜色反应。糖类中的还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。淀粉遇碘变蓝色。脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。因此,可以根据化合物与某些化学试剂所产生的颜色反应,检验生物组织中糖类、脂肪和蛋白质是否存在。Copyright2004-2009版权所有盗版必究2.实验材料苹果或梨匀浆;花生种子或花生种子匀浆;豆浆、鲜肝提取液。【注意】(1)用于鉴定糖类的生物组织,最好选含糖较高,而且组织颜色较浅或近于白色的,如苹果、梨等。(2)用于脂肪检测的实验材料最好选富含脂肪的种子,如花生种子。供实验的花生种子,实验前最好浸泡3~4h。(3)用于蛋白质检测的材料除豆浆、鲜肝提取液外,还可以用蛋清与水按照1∶10稀释制成的蛋清组织样液。3.实验试剂斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、碘液等。Copyright2004-2009版权所有盗版必究【注意】(1)斐林试剂由氢氧化钠的质量浓度为0.1g/mL的溶液和硫酸铜的质量浓度为0.05g/mL的溶液配制而成,两者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色Cu2O沉淀,而葡萄糖本身氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原性糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。(2)用苏丹Ⅳ染液时,染色时间1min即可,因为苏丹Ⅳ和脂肪的亲和力比苏丹Ⅲ强。花生子叶切片要切得薄(最薄处最好是一层细胞),因为如果切片较厚就会导致细胞重叠,观察时看不清脂肪颗粒。Copyright2004-2009版权所有盗版必究(3)双缩脲试剂由A液0.1g/mL的NaOH和B液0.01g/mL的CuSO4组成,使用时:先使用0.1g/mLNaOH溶液创造碱性环境,在操作上,加入A液之后要振荡摇匀,目的就是创造碱性环境,然后再使用0.01g/mL的CuSO4溶液。双缩脲试剂中起实质作用的是碱性环境中Cu2+与蛋白质(里面的肽键)结合形成紫色的络合物。因而必须先使用双缩脲试剂A后再使用双缩脲试剂B,两者不能同时加入或提前混合。注意滴加CuSO4时,溶液不能过量,否则CuSO4的蓝色将遮蔽显色反应中产生的紫色。4.检测的方法步骤(1)还原糖的检测和观察Copyright2004-2009版权所有盗版必究(2)脂肪的检测和观察方法一:组织样液→滴加3滴苏丹Ⅲ染液→观察现象。方法二:徒手切片→选切片放在载玻片中央→2~3滴苏丹Ⅲ染色3min→1~2滴体积分数为50%的酒精洗去浮色→用吸水纸吸去周围的酒精→滴l滴清水→盖上玻片→观察(先低倍镜观察,再用高倍镜观察)。Copyright2004-2009版权所有盗版必究(3)蛋白质的检测和观察(4)淀粉的检测和观察Copyright2004-2009版权所有盗版必究例22009·广东卷对下表中所列待测物质的检测,所选用的试剂及预期结果都正确的是()待测物质检测试剂预期显色结果①DNA甲基绿红色②脂肪苏丹Ⅲ橘黄色③淀粉斐林试剂蓝色④蛋白质双缩脲试剂紫色A.①③B.②③C.①④D.②④【答案】D【解析】DNA遇甲基绿呈现绿色,斐林试剂是鉴定还原糖的,淀粉不属于还原糖,而且斐林试剂遇还原糖水浴加热后呈现砖红色沉淀。所以选D项。Copyright2004-2009版权所有盗版必究【点评】所选用的试剂所发生的显色反应要求记忆。还原性糖可以用斐林试剂鉴定,生成砖红色沉淀;脂肪可被苏丹Ⅳ染液染成红色;蛋白质可以被双缩脲试剂染成紫色。当然也要注意知识的延伸,台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。健那绿染液常用作线粒体专一性活体染色剂,使之呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。DNA(脱氧核糖核酸)与甲基绿作用呈现绿色,与二苯胺发生作用呈现蓝色。下列变式题考查不同的物质在不同的试剂作用下,呈现不同的显色反应,也是考查实验的显色结果。Copyright2004-2009版权所有盗版必究变式题2009·江苏卷变式下列有关实验及显色结果的叙述,正确的有()A.水浴加热条件下,蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀B.沸水浴条件下,脱氧核苷酸与二苯胺发生作用呈现蓝色C.常温条件下,蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈现紫色D.常温条件下,核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色【答案】C【解析】本题考查说明要求的基本实验现象。A选项,能与斐林试剂水浴加热发生作用生成砖红色沉淀的糖是还原性糖,有果糖、麦芽糖、葡萄糖,蔗糖不是;B选项沸水浴条件下,DNA与二苯胺发生作用呈现蓝色;D选项常温条件下,DNA(脱氧核糖核酸)与甲基绿作用呈现绿色。
本文标题:第4讲 细胞中的核酸、糖类和脂质(人教版)
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