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血细胞直方图和散点图的临床意义一、什么是直方图?•直方图是通过血细胞计数仪测量而提供的血细胞体积分布图形,这些图形可以表示出细胞群体分布情况。检测区域红细胞红细胞通过小孔库尔特原理Oscilloscope示波镜检测区域白细胞白细胞通过小孔库尔特原理示波镜ABCChannelNo.No.ofCellsAvgVol(fL)TotalVol(fL)1025.50.02126.526.53227.555.04328.585.55429.5118.06530.5152.57631.5189.08532.5162.59433.5134.010234.569.01113535.5Total3351027.5TABLE23242526272829303132333435363738FemtolitersRelativeNumberChannel11Channel1Howwegetfrompulsestohistograms:直方图原理LymphocyteMonocyteGranulocyte淋巴细胞大单个核细胞群粒细胞淋巴嗜碱单核嗜酸中性粒细胞高频度分析-直方图直方图-X轴:体积(fL)-Y轴:相对数量通道划分RBC直方图:36-360fL,256个通道PLT直方图:2-20fL,64个通道….WBC直方图:35-450fL,256个通道二、什么是散点图?•散点图是白细胞分类的平面图。正常散点图什么是VCS技术?VCS技术是库尔特五分类血球仪对白细胞分类的专利技术,即分类时不需传统的染色方法,仅用三个物理量,VOLUME(体积)、CONDUCTIVITY(传导性)、SCATTER(激光)将五种白细胞分开的技术。Volume—电阻法—针对细胞体积的测量体积(Volume)—运用库尔特原理检测细胞体积揭示VCS技术的威力所在Conductivity—传导性—针对细胞内部结构的测量方法7-10(复杂性)传导性(Conductivity)—利用高频电磁波对细胞传导性的特点,检测:细胞核大小细胞核密度细胞核结构核浆比—异淋和淋巴揭示VCS技术的威力所在激光散射(Scatter)全角度:10°-70°的全角度激光散射量与流式细胞仪相同的激光光源保证结果准确保证成本低廉它是准确区分嗜酸性细胞和中性粒细胞的一个重要参数。LaserScatter—激光散射—针对细胞颗粒特性的测量方法揭示VCS技术的威力所在体积检测(V)V是以库尔特原理检测细胞的体积获得的是完全的细胞体积VCS-DC细胞内部结构检测(C)C运用高频探针检测细胞的内部结构获得细胞核复杂程度的信息区分分叶核和非分叶核细胞VCS-RFVCS-LaserS是运用一个宽角度的散射范围(10-70)来测量细胞的颗粒特性更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞细胞颗粒特性检测(S)VCS检测八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受VCS三重检测,得到各自的三维座标值V:检测细胞体积C:检测细胞内部核结构S:检测细胞内部颗粒特征VCS检测八千多个白细胞逐个、直接、同时地接受VCS三重检测,得到各自的三维座标值VCS正常散点图正常散点图正常散点图三、散点图的临床意义急性粒细胞白血病WBC4.7Neut%1Blast%72PLT8FlagsImmGrans/Bands2Blasts急性粒细胞性白血病结果特征•中性粒细胞区域上方出现大量细胞,可能为原始粒细胞•血小板数量低,分布异常,曲线不拟合,出现R报警•手工涂片分类结果为:中性粒细胞1%淋巴细胞27%原始粒细胞72%M1急性粒细胞性白血病WBC74.6Neut%6Myelocyte%1Blast%86PLT105FlagsImmGrans/Bands2BlastsM3急性早幼粒细胞性白血病WBC2.9Neut%10Band%1Promyelocyte%53PLT7FlagsImmGrans/Bands2BlastsM4粒单细胞性白血病WBC67.8Neut%42Mono%34ImmGrans%7Blast%4PLT55FlagsImmGrans/Bands2BlastsM5单核细胞性白血病Mono%47ImmGran%8Blast%34PLT50FlagsBlasts慢性粒细胞性白血病WBC54.6ImmGran%1Blast%75PLT145FlagsImmGrans/Bands2Blasts慢性粒细胞性白血病结果特征•白细胞计数增高,分类散点图上细胞基本集中在粒细胞区域•手工涂片分类结果:中性粒细胞16%淋巴细胞3%嗜酸细胞1%嗜碱细胞5%中幼莉细胞1%原始粒细胞75%慢性粒单细胞性白血病WBC6.6Neut%32Mono%30ImmGran%5Blast%3PLT343FlagsBlasts嗜酸性细胞增多症WBC4.5Eos%14.6PLT171FlagsNone嗜酸细胞增多症结果特征•白细胞分类散点图上分类良好,各细胞亚群清晰•嗜酸细胞亚群细胞增多传染性单核细胞增多症WBC29.2Lymph%77.0Lymph#22.518%AtypicalLymphsFlagsVariantLymphs慢性淋巴细胞性白血病WBC263.4Lymph%71.8Lymph#189.1FlagsVariantLymphsBlasts慢性淋巴细胞性白血病WBC12.5Lymph%53.7Lymph#6.7FlagsVariantLymphsBlasts慢性淋巴细胞性白血病结果特征•白细胞数量高,超出仪器操作范围,以旗标+++++代替•白细胞分类散点图上绝大多数细胞为淋巴细胞•由于淋巴细胞数量巨大,影响红细胞,导致其参数后出现R•手工涂片分类结果:中性粒细胞5%淋巴细胞91%单核细胞2%嗜酸细胞1%嗜碱细胞1%四、红细胞三个平均值的临床意义(一)平均红细胞体积(MCV)1、计算方法:MCV=Hct/RBC×1015fl2、参考值:血液分析仪法:80~100fl•3、意义:全血中每个红细胞的平均体积。(二)平均红细胞血红蛋白含量(MCH)•1、计算方法:MCH=Hb(g/L)×1012pg/RBC(L)2、参考值:血液分析仪法:27~34pg3、意义:全血中每个红细胞平均血红蛋白含量。(三)平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)1、计算方法:MCHC=Hb(g/L)/Hct2、参考值:320~360g/L3、意义:单位体积红细胞平均血红蛋白含量。诊断中的应用1、正细胞性贫血(1)特点:MCV、MCH、MCHC均正常。(2)常见疾病:急性失血性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、白血病等。2、大细胞性贫血(1)特点:MCV>正常、MCH>正常、MCHC正常。(2)常见疾病:巨幼细胞贫血。3、单纯小细胞性贫血(1)特点:MCV<正常、MCH<正常、MCHC正常。(2)常见疾病:亚急性或慢性炎症疾患、尿毒症。4、小细胞低色素性贫血(1)特点:MCV<正常、MCH<正常、MCHC<正常。(2)常见疾病:缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铅中毒、慢性失血性贫血等。(五)红细胞体积分布宽度(RDW)•RDW是反映周围血红细胞间体积差异的参数,通过变异系数定量地表示红细胞体积分布的离散程度。1、正常参考值:14-16%。2、临床意义(1)小细胞均一性贫血•特点:MCV<正常、RDW正常。•常见疾病:轻型珠蛋白生成障碍性贫血、慢性疾病。(2)小细胞不均一性贫血•特点:MCV<正常、RDW增高。•常见疾病:缺铁性贫血、血红蛋白S病、β-珠蛋白生成障碍性贫血、红细胞破碎综合症等。(3)正细胞均一性贫血•特点:MCV、RDW均正常。•常见疾病:再障、白血病、化疗后、急性失血性贫血等。(4)正细胞不均一性贫血•特点:MCV正常、RDW增高。•常见疾病:缺叶酸或维生素B12双相性贫血、铁粒幼细胞贫血、骨髓纤维化等。(5)大细胞均一性贫血•特点:MCV>正常、RDW正常。•常见疾病:多数再障、部分肝病性贫血、某些肾性贫血。(6)大细胞不均一性贫血•特点:MCV、RDW均增高。•常见疾病:巨幼细胞贫血、免疫性溶血性贫血等。HmX五分类血液分析仪旗标和代码常见的旗标和代码•旗标(数值后):•R结果需复核•*R计数受干扰•H结果高于参考范围上限•L结果低于参考范围下限•代码(替代数值):•-----三次计数比统一•…..不完全计算•+++++结果超出操作范围•:::::流式通道堵塞•?????数据无效白细胞计数值后出现*R的临床意义•说明白细胞在35fl处的检测受到干扰.•在白细胞计数孔有35fl大小的颗粒通过并被当作白细胞计数,且超过一定数量,触发报警•在白细胞直方图上看,曲线在35fl处上抬导致*R出现的可能原因•红细胞未完全溶解•样本存在有核红细胞•由于存在大血小板、血小板聚集干扰到白细胞结果•溶血剂问题*R出现的处理方法•1.查看出现的概率,如概率高则先考虑溶血剂的质和量有无问题,是否应更换溶血剂•2.如只是局限的样本出现,考虑样本原因,如需确认结果,可采用手工镜检*R出现的处理方法•1.查看出现的概率,如概率高则先考虑溶血剂的质和量有无问题,是否应更换溶血剂•2.如只是局限的样本出现,考虑样本原因,如需确认结果,可采用手工镜检PLT结果后出现R旗标的临床意义•仪器进行血小板计数时,计数2fl~20fl的血小板数量,再拟合出一条0fl~70fl的曲线,目的是为了排除计数干扰.但条件不满足时仪器不能给出拟合曲线,这时候血小板数值后出现R.•血小板曲线不拟合的条件:•血小板计数20,000;血小板曲线不呈正态分布;大多数血小板分布在3fl或15fl区域内;PDW20%.导致血小板后出现R的原因•样本血小板异常:出现异常形态的血小板、血小板发生聚集;•存在细胞碎片,如红细胞碎片;•血小板大小不一(输血后);•电磁波或噪音干扰小孔计数.处理方法•请手工镜检+++++出现的临床意义•+++++(代码):结果超出仪器的操作范围•对白细胞而言计数值大于99.9×109/L;•对红细胞而言计数值大于7.00×1012/L;•对血小板而言计数值大于999×109/L.•处理方法:•用ISOTONIII液稀释标本至线性范围内再测•注:1.先做一空白循环以防止携带污染•2.不能报告白细胞分类结果•检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障代码-----出现的临床意义•-----出现代表三次计数不统一•可能导致的原因:•小孔部分堵塞;•标本有凝块;•出现细胞凝集;•出现血小板凝集;•标本稀释后未充分混匀.…..主要表示吸样错误•…..出现主要表示吸样错误,当发生吸样错误时,所有参数的结果后都会带有…..,同时报警PARTASP•导致的可能原因有:•样本有凝块,堵塞吸样针系统,影响血样探测器;•样本量不够;•样本的血红蛋白浓度过低(严重贫血),血样探测器检测失败;发生吸样错误的处理方法•1.查看样本有无凝块,如果有重取标本,没有则重新检测,再出现如上问题则涂片镜检有无凝块或细胞聚集;•2.检测标本量是否够;•3.对于严重贫血病人样本采用手动进样方式.•4.检测仪器吸样系统,如发生堵塞则清洗.代码:::::出现的临床意义•在白细胞五项分类及网织红细胞计数中,当流式通道堵塞产生:::::代码.•在散点分布图上可有三种堵塞报警:•-FC,流式通道完全堵塞(无检测);•-PC1,流式通道检测时间延长;•-PC2,流式通道检测时间缩短.导致PC/:::::的原因•-FC:完全堵塞;•-PC1:流式通道或标本通道部分堵塞导致分类时间延长;•-PC2:红细胞未完全溶解导致分类时间缩短,或鞘液系统问题.临床上高胆固醇和高甘油三酯血症、血红蛋白病、药物治疗后、进行性肝病等都可导致PC2.HmX怀疑性旗标白细胞怀疑性旗标•1.Blasts(原始细胞)•2.ImmGrans/Bands(未成熟杆状细胞)•3.VariantLymphs(异型淋巴细胞)•4.ReviewSlide(涂片复检)白细胞限定性旗标(I)•1.Leukopenia(白细胞减少):白细胞计数低于设定的下限•2.Leukocytosis(白细
本文标题:BECKMEN系统血细胞直方图散点图的临床意义
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