淡水样提取DNA方法

水样：1.取样品1L，于50ml离心管，4℃13000g离心10min，弃上清，重复收集以富集菌体。2.加裂解液5ml，斡旋振荡器震荡3min以混匀；3.液氮–65℃水浴循环冻融3次，每次2min；4.加入纤维素酶、蜗牛酶、溶菌酶（终浓度分别为6mg/ml、3mg/ml、1mg/ml）,37℃水浴90min，每15min轻轻颠倒混匀一次；5.加入0.5ml20%SDS和50ul30mg/mL蛋白酶K，55℃水浴30min，每隔10min轻轻颠倒混匀；6.4℃6000g离心10min，收集上清，转移到无菌2ml离心管；7.加入等体积酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），轻柔混匀，4℃14000g离心10min，转移上层水相到2ml无菌离心管中；8.加入等体积氯仿：异戊醇（24：1），轻柔混匀，4℃12000g离心15min，转移上层水相到1.5ml无菌离心管中；9.加入0.6倍体积的异丙醇（或1倍体积的20%PEG6000–2.5MNaCl）室温沉淀90min，4℃16000g离心15min，弃上清；10.沉淀用冰预冷的70%乙醇洗涤一次，离心、风干，重悬于适量ul无菌水中。11.电泳检测DNA，并测定其浓度。