光合细菌配合面包酵母与藻粉培养轮虫的实验

光合细菌配合面包酵母与藻粉培养转曳的实脸摘要---以面包醉母与一定量螺旋藻粉培养褶皱臂尾轮虫的过程中,添加光合细菌液进行实验。结果表明:光合细菌作为辅助性饵料,对轮虫的生长具有明显特殊的促进作用。4组实验显示:投喂适宜量光合细菌轮虫增殖明显加快,但与光合细菌添加量的增加不完全呈正比关系;投喂光合细菌新鲜培养液与老培养液轮虫增殖效果相近;投喂光合细菌只能作为辅助性饵料。当配合酵母、藻粉培育轮虫时,3者在饵料上起到了良好的互补作用,培养效果最佳。关键词轮虫培养光合细菌面包酵母藻粉轮虫是鱼、虾、蟹类人工育苗幼体阶段重要的活饵料之一,培养轮虫无疑是育苗技术中的重要环节。轮虫在工厂化培养中可利用高密度单胞藻获得高产,但目前该技术仍有占地多、耗用人力多的问题。近年来用面包酵母单独投喂轮虫,也可获得高产。因酵母来源广,贮运方便,此法已广为利用。但发现轮虫培养过程中易出现延迟期,且培养出的轮虫个体小,饵料价值有待提高。近年来国内外开展的光合细菌(PSB)在水产养殖的应用研究,各方面效果很好。在PSB培养轮虫方面,就PSB单独投喂、PSB与藻液、PSB与面包酵母混合投喂轮虫分别进行实验,取得很好的效果。本实验以PSB混合面包酵母与螺旋藻粉投喂轮虫,并对其培养效果进行比较详细的观察,旨在为工厂化培养轮虫从饵料方面提供一些数据和补充。1材料与方法1.!材料2.1.1光合细菌(photos押thetieBaete‘a,以下简称PSB)由海南大学水产系微生物实验室从当地海泥中分离、培养,属红假单胞菌属,密度为50亿celllml。实验用接种7一14天的新鲜培养液,老培养液为接种4个月。1.12面包酵母(Saeeharo卿eeseerevisia)市售中法合资生产。收稿日期:2003一01一201.1‘3螺旋藻粉海南晨光生物有限公司生产,以下简称藻粉。1.14轮虫(肠动角us夕Iica石方习无病、健康、活力好的褶皱臂尾轮虫。11.5海水盐度26,砂滤海水,水温28℃。!.2方法1.2.1培养方法用漂白粉消毒砂滤海水,曝气2天,用硫代硫酸钠中和余氯,装人40L白桶中,大量充气,放入轮虫初密度在30一100个/耐,进行实验。每日早换水90%,换水后加水至4oL,取样进行计数,镜检。根据轮虫总数量,计算投饵量,每日投6次,每个实验组平行2次。1.2.2日投喂量酵母按69/百万轮虫,藻粉按酵母量的115(即129/百万轮虫),2者混合后用300目筛绢搓,分6次投喂。光合细菌按酵母:PSB二19:1ml比例的日添加量一次性投人水中。如果按100个轮虫/ml计算,40L水体日投饵量为酵母249:藻粉4.89:PsB24ml。1.2.3带卵率计算和观察用培养皿取10而左右的样品,滴加碘液杀死轮虫,放在显微镜下观察轮虫的带卵情况。带卵率计算公式如下:带卵率=视野中带卵的轮虫个体总数/视野中轮虫个体总数x100%;带一卵率二视野中带一卵的轮虫个体总数/视野中带卵的轮虫个体总数x100%;并依次计算出带二卵率、带三卵率等。1.2.4日增殖倍数和日增殖率计算日增殖倍数二末轮虫卉斗降业2003年第20卷第6期ShandongFisheries2003,20(6)密度/初始轮虫密度(以24小时为单位计算)。日增殖率2.1投喂PsB(新鲜与老培养液)与不投喂PsB组培养轮(r)二InN洲0’Nt:1天后的轮虫密度,N0:初始密度。虫的情况2结果见表1。衰1投喂Ps日与不投喂PsB组培养轮虫实验记录最初24小时后48小时后组别轮虫密度带卵率一卵率二卵串(个/nil)(%)轮虫密度(个/nil)OJ-月耳”b01‘J”bQU,J门月才产(.A)一。55555(0A一9595外外仍95808080808080l,‘”UR‘J斑一‘IJIJ4飞”IJ内」不投PSB(对照组)老PSB液组新鲜PsB组日增殖倍数带卵率一卵率二卵率(r)(%)(%)(%)雨{O{丽2丫一809641.91(0.647)829552.1(0.742)9360402.0(0.690)95564420协.69伪9858422.16(0.771)986347轮虫密度(个/血)109110187179166174日增殖倍数带卵率一卵率二卵率(r)(%)(%)(%)丽6扣万21)8190101.81(0.593)859282.23(0.802)946535236(0.858)965842237(0.862)9853462,45(0.896)996()40由以上结果分析可知,无论是新鲜还是老PsB培养物添加到面包酵母和藻粉中培养轮虫,都能明显提高轮虫增殖速度,差异极显著。但是这种增殖效果有个过程,在24小时内主要是轮虫抱卵积累的过程,从镜检看在第12小时轮虫抱卵率已经开始增加,24小时后抱卵情况明显好转,第48小时后,轮虫增殖效果差异变得极显著,意味着PsB的持续添加,将带来持续稳定的促长效果。另外新鲜和老PsB培养物对轮虫的增殖效果的方差分析结果不显著。2.2在酵毋和藻粉中添加不同比例PsB培养枪虫的实验见表2。裹2添加不同比例pSB培养轮虫的实验。酵母:PSB(91111)l:01:0.11:03751:0.751:151:2轮虫初密度313540363838(个/ml)士07士1.4士26土1.8土2.1士2.124小时后轮虫607075788083密度(个/ml)土14土0.8土2.2土2.4士2.1士2248小时后轮虫110128158181199209密度(个/ml)10.7士4.8士6.2土5.8土7土8.848小时/24小时l,8351832,112.322.489252轮虫的增殖倍数士003土0.05士0,06土0.06士007土0.08‘藻粉的添加量仍按醉母(幼:藻粉(幻二1:1。2.3以面包酵毋为主依次添加藻粉、光合细菌培养轮虫实验见表3。从表3可见,当酵母中逐次添加藻粉和PSB时,轮虫增殖结果三合一组二合一组单独投酵母组。2.4降低酵母与藻粉投喂量后投喂高浓度psB实验见表4口表3以面包醉母为主添加旅粉、光合细菌培养轮虫实验记录组别最初轮虫密度(个/ml)24小时后轮虫密度(个/ml)48小时后轮虫密度(个/ml)48小时/24小时轮虫增殖倍数(r)Q户,‘41,‘”O41486063898400八110nn”面包酵73母组76面包酵母69+藻粉组73面包酵母十藻70粉+玲B组661681.521861.62内j八书,‘气一O八O八砚‘一J件.…,.上1,工,白14473040,乙,‘月J门」0‘以.了.OJ,‘O沪111,乙4飞」..且,月月五.L1.1...11.1表4阳氏酵母与旅粉投喂t后投喂高浓度pss实验结果*组最初轮带卵率12小时后带卵率24小时后带卵率日增殖别虫密度轮虫密度轮虫密度倍数(个/而)(%)(个/而)(%)(个/Inl)(%)(r)降低组1139618060190151.05(0.054)士1.42士3·5士5·2士2.8士7.2士0.8士0.05(0002)原量组1109518090419902.322(0.778)土1.96士4.3士6.3士3.2士8.6士4.6士004(0002),降低组为把酵母与藻粉量降低至原投喂最的30%,但每日照常添加PSB;原量组仍按酵母与藻粉的原量投喂,添加PsB。从表4可见,当面包酵母和藻粉的投喂量严重不足时,即使PSB仍按600x10一‘添加,1天后轮虫的带卵率也会明显下降,轮虫的增殖倍数比原量组小,轮虫的带卵率仅为巧%。3讨论3.1光合细菌的适量添加可明显提高使用面包酵母和藻粉培养轮虫的效果,其原因可能是3者在饵料营养上的互补作用。表1一3三组实验发现,在一定的轮虫密度下,无论是新、老PSB培养液均在适宜浓度下能明显提高使用面包酵母和藻粉的培养效果。实验过程中发现,PSB投32卉斗违业2003年第20卷第6期ShandongFisheries2003,20(6)喂24小时后,轮虫的带卵情况明显变化,不仅带卵率增至95%一100%,而且带2卵的较多,带2卵率能达到40%一60%,带3卵、4卵、5卵的均有。这是没投喂PsB组所没有的。同时还发现,投PSB组比不投PSB组所繁殖的后代个体肥大,胃肠摄食饱满,卵巢色泽浓。另外,每8小时就有一批轮虫卵生成;不投喂PSB组每12小时才少量生成一批新轮虫卵。其原因,笔者认为可能是光合细菌中含有的特殊活性物质与酵母、藻粉的饵料价值的互补作用,这与坂本久川、王鉴【21观点一致。光合细菌富含蛋白质,尤其富含对动物生长发育起促进作用的特殊生理活性物质(如辅酶Q和相当完全的B族维生素),特别是酵母中所缺乏的维生素B.2、叶酸、生物素含量丰富。如光合细菌中富含的维生素B,2,对面包酵母培养轮虫就有独特的互补作用。据报告,面包酵母由于添加维生素B12,其饵料价值得以改善,轮虫卵由很多不孵化转为全部孵化。但光合细菌所含的其它重要活性物质对轮虫的独特的促长作用,其机制未作进一步的研究。可推测,PSB的某些营养成份可提高轮虫对酵母的利用率,促进卵生成的速度和数量,而高的带卵率和数量往往带来下一代轮虫的增殖高峰。3、2投喂新鲜PSB比老PsB培养液培养轮虫效果略好,但差别不大。从表1的结果我们看到2种PsB培养液的增殖效果接近,由此可推测,PSB对轮虫的增殖促进主要是营养方面,而改善水质方面可能属于次要作用。3.3随着PSB液添加量的不断增加,轮虫增殖速度在增加,但不完全成正比。首先PSB添加量要达到适宜量,促进轮虫增殖的效果才明显。从表2中可见,按酵母:PsB二19:0.lml时,促长效果并不明显,当2者比例达到1:0.375时,添加组轮虫比对照组增长明显加快但2者并不成正比,当2者比例达到1:2后,增殖率基本稳定,轮虫带2卵率也不超过60%,也不再出现更多的3卵、4卵,说明PsB对轮虫的增殖效果是一定的,有限的。3.4光合细菌促长轮虫的效果可靠,但同时如果水中有原生动物时,同样也可促进原生动物的繁殖,所以务必使水中轮虫为优势种。3.5光合细菌虽能促长轮虫,但其单独作为饵料,价值甚小,从表4可看到,当酵母量减少时,即使有PSB的添加,仍不能满足轮虫正常繁殖的需要。这点和坂本久[’]的观点一致。所以在用酵母培养轮虫的过程中,酵母的量一定要给足,否则即使添加光合细菌也达不到预期的很明显效果。36虽光合细菌能有效促进酵母培养轮虫的效果,但酵母在水中的存活时间及污染水质仍是不容忽视的问题,如果有高浓度的藻液同时添加PSB应为培养轮虫最好的办法。据王鉴[2]报道此时添加350xl仓‘较合适。参考文献坂本久等.光合成细菌、桃红英硫菌对臂尾轮虫的饵料价值.国外水产,1984,(4):44一心s王鉴,祝国芹.不同浓度的光合细菌对轮虫繁殖的影响水产科学,1994,13(5):23一25许兵等.光合成细菌对褶皱臂尾轮虫的饵料价值.海洋湖沼通报,1992,(2):17一22王金秋等.面包醉母添加PSB和Vc后培养轮虫的效果.水产科技情报,1999,(l):25一31王育锋等.用光合细菌液池塘培育淡水鱼种的试验,水产学报,1990,14(4):347一350《齐鲁渔业》2002年精装合订本开始发售应广大读者要求,2002年(齐奢渔业》推出精装合仃本,并于即日起向广大读者发售。合仃本装帧考究,古朴典推,不但阅读方便,且有收藏价值。合仃本数童有限,每本定价了。元(含邮寄费),有意者请与山东烟台四马路63号齐鲁渔业杂志社李雪梅、王治宇联系.邮编:264001.电话:0535一62170796217078。SHANDONGFISHERIESVol20NO,62003ABSTRACTSANDKEYWORDSExPerimentonthePondCultureofPenaeuschinen压众intheSalinizationArea.Sunyu比ongetal(l)AbstraetInordertochangetheactUalitythatfishwasthemaineulturesPeeiesandmadelowProfit,asw