好氧反硝化细菌LKX1的分离鉴定及初步应用研究刘立立

2016481176～80ShandongAgriculturalSciencesDOI10．14083/j．issn．1001－4942．2016．11．0182016－08－122015－109K1501008－311990－。[e-mail]*[e-mail]－1、*410128。、16SrDNAPseudomonasmonteilii0．03%、0．00015%、120r/min48h91．55%96．33%。S154．3A1001－4942201611－0076－05IsolationIdentificationofAAerobicDenitrifierLKX－1andItsPreliminaryApplicationＲesearchLiuLiliLanShileYangYoucai*CollegeofBioscienceandBiotechnologyHunanAgriculturalUniversityChangsha410128ChinaAbstractAhighefficientaerobicdenitrifierwasisolatedfromricefieldtodisposetheruraldomesticsewagethenthestrainwasidentifiedanditsnitrogenremovaleffectwasanalyzed．TheresultsshowedthatthestrainwasidentifiedasPseudomonasmonteiliithroughanalyzingthecellmorphologycolonymorphologyphysiologicalandbiochemicalcharacteristicscombinedwith16SrDNAsequence．Thepreliminarystudyonni-trogenremovalconditionsofruraldomesticsewageshowedthatwiththeglucoseadditiveamountof0．03%inoculationamountof0．00015%rotationspeedof120r/minandculturaltimeof48hourstheremovalrateofTNandNO－2－Nreached91．55%and96．33%respectively．KeywordsAerobicdenitrifierIsolationＲuraldomesticsewageNitrogenremovalrateCOD、TN。80～901。、、、、、。2、3、456。、、。。。。11．11．1．1。。1．1．2、7。。3%1%0．5%NH4NO30．5%KH2PO40．2%Mg-SO4·7H2O0．1%pH7．0～7．5。g/L7。2%1%KH2PO40．2%MgSO4·7H2O0．1%pH7．0～7．5。121℃25min。1．1．3Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、NH4Cl、MgSO4·7H2O、HCl、KNO3、、AＲNaNO2AＲ。SS－325TOMY．KOGYO．CO．LTD、、、752、、。1．21．2．11g100mL250mL30℃、180r/min48h。100．1mL30℃。。1．2．230℃、180r/min24h。2%V/V100mL250mL30℃、180r/min48h8NO－2－N。%=－/×1001．2．3①。2～3《》8。②16SrDNA。EzupDNA16SrDNA27F5'－AGTTTGATCCT-GGCTCAG－3'1492Ｒ5'－GGTTACCTTGT-TACGACTT－3'PCＲ。PCＲhttp//．ncbi．nih．nlm．govBLASTGenBank16SrDNAMEGA6．06Neighbor－Joining1000Bootstraps。1．2．4①。250mL150mL0、0．01%、0．02%、0．03%、0．04%0．05%0．0002%V/V30℃、100r/min48h。3。②。0．00005%、0．00010%、0．00015%、0．00020%0．00025%V/V。③。7711LKX－1、60、80、100、120r/min140r/min、。④。24h12h72h。22．128LKX－1～LKX－28。2．228131、2。LKX－166．22%98．36%。LKX－1。12NO－2－N2．3LKX－12．3．1LKX－10．1～0．3mmV－P、。LKX－1。2．3．2LKX－116SrDNALKX－1Pseudo-monasmonteilii99%。、、16SrDNAPseud-omonasmonteilii3。2．4LKX－12．4．14。。0．03%86．74%87480．02%0．02%。0．03%。316SrDNA42．4．25。0．00015%92．73%0．00010%。0．00015%V/V。52．4．3。。6。120r/min95．42%120r/min120～140r/min。120r/min。62．4．4748h91．55%96．33%48h。73。Paracoccuspantotropha、Pseudomonasspp．、Alcali-genesfaecalis、Aquaspirillum、Thauera、Hyphomicrobium9－11。12NO629711LKX－1、13D14D319．86mg/L·h。、16SrDNAPseudomonasmonteilii。0．03%、0．00015%、120r/min48h91．55%96．33%。1．J．20094892289－2291．2WangHAppanAGulliverJS．Modelingofphosphorusdy-namicsinaquaticsedimentsI－modeldevelopmentJ．WaterＲesearch200337163928－3938．3．J．200322249－55．4．J．20012162－65．5．J．20133151－4．6．J．20151587－88．7．WIT－1J．2011331114－16．8《》．M．2002211－281．9．D．2007．10ThomsenTＲKongYNielsenPH．Ecophysiologyofabun-dantdenitrifyingbacteriainactivatedsludgeJ．FEMSMicro-biologyEcology2007603370－382．11ＲehfussMUrbanJ．Alcaligenesfaecalissubsp．phenolicussub-sp．nov．aphenol－degradingdenitrifyingbacteriumisolatedfromagraywaterbioprocessorJ．SystematicandAppliedMi-crobiology2005285421－429．12．Pseudomonasaerugi-nosaNO62J．201181240－243．13．J．2008274406－409．14．J．201481366－370．0848