环境微生物学第四章微生物的生理

第四章微生物的生理第一节微生物的酶第二节微生物营养第三节微生物的产能代谢1.新陈代谢怎样进行？第一节微生物的酶新陈代谢都是在酶的催化下完成的。什么是酶？酶是由细胞产生的、能在体内或体外起催化作用的一类具有活性中心和特殊构像的生物大分子。酶的应用：酶在工业、农业、医药等领域都得到了广泛的应用，在污水处理中，微生物对污水中污染物的分解转化过程实质上都是在酶的催化下进行的一系列反应。一、酶的组成酶的组成有两类为单成分酶和全酶单成分酶＝酶蛋白全酶＝酶蛋白＋辅因子酶的组成用下式表示：组成实例单成分酶=酶蛋白如水解酶类全酶=酶蛋白+有机物如各种脱氢酶类全酶=酶蛋白+有机物+金属离子如丙酮酸脱氢酶全酶=酶蛋白+金属离子(Fe2+)如细胞色素氧化酶2.生物有哪些重要的酶？酶的辅因子（辅酶或辅基）起传递电子、原子和化学集团的作用，几种重要的辅因子如下：1.NAD（辅酶Ⅰ）和NADP（辅酶Ⅱ）2.FAD和FMN3.辅酶Q（又称泛醌）转移氢（H＋）的辅酶4.含铁卟啉的细胞色素类5.金属离子6.辅酶F420——产甲烷菌特有转移电子（e－）的辅酶7.辅酶A8.生物素9.辅酶M10.F420因子10.F430因子11.磷酸腺苷及其它核苷酸类…………转移基团的辅酶3.作为生物分子，酶具有什么样的结构？二、酶蛋白的结构酶蛋白是由20种氨基酸组成的。组成酶蛋白的氨基酸按一定的排列顺序由肽键(-CO-NH-)连接成多肽链，两条肽链之间或一条多肽链之间卷曲后相邻的基团之间以氢键、盐键、脂键、疏水键、范德华力及金属键等相连接而成。酶蛋白的结构分一级、二级和三级结构，少数酶具有四级结构。显微镜下的血红蛋白：例：如血红蛋白的结构一级结构二级结构三级结构四级结构4.酶分子中哪部分起到催化作用？三、酶的活性中心酶的活性中心是指酶蛋白中与底物结合，并起催化作用的小部分氨基酸微区。构成活性中心的微区或处在同一条肽链的不同部位，或处在不同肽链上；在多肽链盘曲成一定空间构型时，它们按一定位置靠近在一起，形成特定的酶活性中心。溶菌酶的活性中心5.酶如何分类和命名？国际酶学委员会根据催化反应的性质将酶分为6大类，分别用1、2、3、4、5、6表示，在每一大类中又可分为若干亚类和亚亚类。因此每个酶都有一个四位数字的号码，每个酶用4个用圆点隔开的数字编号，编号前冠以EC（EnzymeCommission）。四、酶的分类与命名(一）酶的分类1.国际系统分类法及酶的编号例如：乳酸脱氢酶的编号：EC1.1.1.27——其中第一位数代表大类；第二、三位数分别代表亚类和亚亚类，由前三位数就可确定反应的性质；第四位数则是酶在该亚亚类中的顺序。2.六大类酶的分类与命名按催化反应的类型分，酶可分为六大类：1.氧化还原酶类：这类酶的作用通式为：A—H2+BA+B—H2脱氢酶还原酶(1)氧化酶类：AH2+O2A+H2O2AH2+O2A+H2O12(2)脱氢酶类：CH3CH2OH+NADCH2CHO+NADH25.异构酶类：分子内变化，生成同分异构体，通式为：AA’4.裂解酶类：作用通式为：AB+C6.合成酶类：作用通式为：A+B+ATPAB+ADP+Pi3.水解酶类：这类酶的作用通式为：R’—R+H2OROH+R’H2.转移酶类，作用通式为：AR+BA+BR1961年以前使用的酶的名称一般都是习惯沿用的，称为习惯名。主要依据两个原则(一）酶的命名1.习惯命名法(1)按酶的作用底物的不同命名如：淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶……(2)根据酶的催化反应的性质及类型命名如：水解酶、转移酶、氧化酶……用：将两种底物分开，再表明酶的底物及催化反应的性质（如果底物之一是水，则将水省略）2.国际系统命名法例：编号习惯名系统名反应1.1.1.1醇脱氢酶醇：NAD＋氧化还原酶醇＋NAD＋→醛或酮＋NADH＋H因此，每个酶都有一个编号，一个习惯名，一个系统名。6.酶和一般的催化剂性质是否相同？五、酶的催化特性1.酶具有一般催化剂的共性。酶与其他催化剂一样，能够加快反应速率，缩短反应到达平衡所需要的时间，但是不改变平衡点。酶在反应前后，本身不发生性质和数量的改变。一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，催化一定的化学反应并生成一定的产物。2.酶的催化作用具有高度的专一性。7.为何酶具有如此高度的专一性？①锁－钥假说——酶与底物结构上互补（3）关于酶专一性的假说②诱导契合假说——酶受到底物的诱导而变形3.酶的催化作用条件温和。只需在常温常压和近中性的水溶液中就可以催化反应的进行。4.酶对环境条件极为敏感。高温、强酸、强碱都能使酶丧失活性。效率5.酶的催化效率极高。是生物催化剂，它可加速反应速度，缩短反应达到平衡的时间，但不改变反应的平衡点，其催化效率比无机催化剂的催化效率高几千倍甚至百亿倍。8.为何酶具有如此高的催化效率？作用机理：酶催化效率极高的原因是酶能降低反应的能阈，从而降低反应物所需的活化能。使反应能够沿着活化能阈低的途径迅速进行。能阈：一个反应能够顺利进行，所需的活化能必需超过一定范围，这个范围就是能阈。第二节微生物的营养一、微生物的化学组成二、微生物的营养物及营养类型三、碳氮磷比四、微生物的培养基及种类五、营养物质进入微生物细胞的方式新陈代谢新陈代谢异化作用同化作用物质分解反应——将营养物质和细胞物质分解的过程放出能量物质合成反应——将营养物质转变为机体组分的过程吸收能量一、微生物的化学组成（一）水分(70%~90%)注：芽孢含水很低（40g/100g）。（二）干物质(10%~30%)微生物蛋白质碳水化合物(糖类)脂肪灰分细菌50.00~93.7012.00~28.000.40~35.601.34~13.86酵母菌31.20~82.5035.00~60.001.72~5.006.50~10.17霉菌13.70~43.608.00~40.002.50~23.005.95~12.20微生物的有机物组成占干重的百分比/%二、微生物的营养物及营养类型微生物需要的营养物质有水、碳素营养源、氮素营养源、无机盐及生长因子。（一）水（二）碳源（carbonsource）凡能供给微生物碳素营养的物质，称为碳源。碳源的主要作用：是构成微生物细胞的含碳（碳架）物质和供给微生物生长所需要的能量。同其它营养相比，微生物对碳源的需求是最大的。根据微生物对碳素营养物的需求不同，可把微生物分成无机营养微生物和有机营养微生物。碳源无机营养（自养型）有机营养（异养型）光能无机型化能无机型光能有机型化能有机型以光为能源以化学物质为能源以化学物质为能源以光为能源微生物的营养类型:1.无机营养微生物无机营养（无机自养）微生物：具有完全的酶系统，合成有机物的能力强，以CO2、CO和CO32-中的碳素为唯一碳源，利用光能或化学能在细胞内合成复杂的有机物以构成自身的细胞成分，而不需要外界供给现成的有机化合物，无机营养（自养型）光能自养型化能自养型依靠体内的光合色素，以阳光（或灯光）作为能源，以H2O等作为供氢体，以CO2为碳源合成有机物。无光合色素，不能进行光合作用，通过氧化无机物获得能量，以CO2为唯一碳源合成有机物。2.有机营养微生物有机营养（异养）微生物：酶系统不完备，只能作为有机化合物为碳素营养和能量来源。有机营养（异养型）光能异养型化能异养型以阳光（或灯光）作为能源，以有机物作为供氢体，还原CO2合成有机物。依靠氧化有机物产生能量，碳源也是能源。绝大多数的微生物属于这一类型。3.混合营养微生物碳素营养既可以是有机碳也可以是无机碳。试分析下列微生物属于什么营养类型：微生物碳源获得能量方式营养类型硝化细菌CO2氧化无机物紫色硫细菌CO2太阳能沼泽红假单胞菌有机酸等太阳能大肠杆菌葡萄糖等氧化有机物氢细菌CO2、葡萄糖等氧化有机物或无机物化能无机光能无机光能有机化能有机混合营养（三）氮源（nitrogensource）凡是能够供给微生物氮素营养的物质称为氮源。氮是组成核酸和蛋白质的重要元素。从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能被不同的微生物所利用，而不同类型的微生物能利用的氮源差异较大。氮源的作用：提供微生物合成蛋白质的原料。根据对氮源要求的不同，微生物可分为4类：固氮微生物:这类微生物能利用空气中的氮（N2)分子合成自身的氨基酸和蛋白质；利用无机氮作为氮源的微生物：能利用氨(NH3)、铵盐(NH4+)、亚硝酸盐(NO2-)、硝酸盐(NO3-)的微生物；需要某种氨基酸作为氮源的微生物；从分解蛋白质中取得铵盐或氨基酸的微生物。（四）无机盐（五）生长因子（growthfactor）生长因子：是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。广义的生长因子包括维生素、碱基、嘌呤、嘧啶、生物素、烟酸、氨基酸等；狭义的生长因子一般仅指维生素。9.废水处理中如何调配营养？三、碳氮磷比由于不同微生物细胞的元素组成比例不同，对各营养元素的比例要求也不同，污水生物处理中好氧微生物群体要求对碳氮磷比的要求BOD5:N:P=100:5:1。城市生活污水能满足活性污泥的营养要求，不存在营养不足的问题。但有些工业废水缺某种营养，当营养不足时，应供给或补充。某些工业废水（如酒精废水）缺氮；洗涤剂废水磷过剩，也缺氮。对此可用粪便污水或尿素补充氮。若废水缺磷，则可用磷酸氢二钾补充。注意：如果工业废水不缺营养，则切勿添加上述营养物质，否则会适得其反，影响处理效果。10.实验室微生物在哪种物质中生长？四、微生物的培养基及种类培养基（culturemedium）：根据各种微生物对营养的需求，包括对水、碳源、能源、氮源、无机盐及生长因子等按一定比例配制而成的，用以培养微生物的基质。广义上说，凡是支持微生物生长和繁殖的介质或材料均可作为微生物的培养基。微生物的培养基配方犹如菜谱，种类繁多，且层出不穷。(二）培养基的种类：因考虑的角度不同，可将培养基分成以下一些类型：根据对培养基组成物的性质天然培养基合成培养基半合成培养基根据培养基物理性状液体培养基固体培养基半固体培养基根据培养基的特殊用途选择培养基鉴别培养基加富培养基11.培养特定类微生物用什么培养基？1.选择培养基（selectivemedium）：根据微生物的特殊营养要求或对各种化学物质敏感程度的差异而设计、配制的培养基。可在培养基中加入某些化学物质，用以抑制非目标微生物的生长，并使所要分离的微生物生长繁殖。例：在培养基中加入胆汁酸盐，可以抑制革兰氏阳性菌，有利于革兰氏阴性菌的生长。12.在特殊培养基上鉴别细菌可能吗？2.鉴别培养基（differetialmedium）：几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同，其菌落通过指示剂显示出不同的颜色而被区分开，这种起鉴别和区分不同细菌作用的培养基。例：在EMB培养基上，大肠埃希氏菌菌落呈紫黑色，克雷伯氏菌菌落呈绿色或淡绿色，柠檬酸盐杆菌中心呈深蓝色，产气肠杆菌菌落呈紫红色，这样几种细菌就被鉴别区分开。13.某些细菌只有增加某营养物质才能培养，用什么样的培养基？3.加富培养基（enrichedmedium）：由于样品中的细菌数量很少，或是对营养要求比较苛刻不易培养出来，故用特别的物质或成分促使微生物快速生长，这种用特别物质或成分配制而成的培养基。例：血琼脂——促进链球菌生长14.微生物如何摄取营养？五、营养物质进入微生物细胞的方式物质的进出主要与细胞膜有关。也就是说，细胞膜是物质进出细胞的主要屏障。细胞膜由磷脂双分子层构成，镶嵌有膜蛋白，磷脂碳氢链“尾巴”构成的非极性区对极性分子具有高度的不渗透性。选择性的通透作用是细胞膜最重要的生理特征之一，其中重要的机制有：1.单纯扩散；2.促进扩散；3.主动运输；4.基团转位。需要注意的是：一种物质往往可以通过不止一种机制被运输。蛋白质磷脂分子亲水基团疏水基团（一）简单扩散简单扩散是一种最简单的物质跨膜运输的方式，为纯粹的物理学过程，在扩散中不消耗能量，其动力来自于参与扩散的物质在膜内外的浓度差，单纯扩散的结果是使某种化合物在细胞内的浓度和细胞外的浓度趋于相等，这种扩散是非特异性的，速度较慢。细胞膜的