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2013.09实验诊断学概论-2013朱丽青温州医科大学检验医学院温医附一院实验诊断中心实验诊断学概论2013.09实验诊断学概论-2013主要内容1.实验诊断学的基本概念2.实验诊断学的主要内容及应用范围3.实验诊断学的现状及发展趋势4.学习实验诊断学的方法和要求5.实验诊断的影响因素6.实验诊断的临床应用与评价2013.09实验诊断学概论-2013实验诊断学(LaboratoryDiagnostics)的基本概念:实验诊断(LaboratoryDiagnosis)是指医生的医嘱通过临床实验室分析所得到的信息为疾病的预防、诊断、治疗和预后评价所应用的医学临床活动。※实验室前:合理选择实验项目,检验申请,患者准备,样本采集,样本传送…※实验室:用化学、生物学等的实验技术和方法,对取自人体的检验样本如血液、体液等进行检测分析…※实验室后:结果审核、解释、报告,样本储存…2013.09实验诊断学概论-2013检验医学(LaboratoryMedicine)--与实验诊断学概念相关,但其研究与教学的目的有所侧重不同实验诊断学是以检验结果的临床应用为目的,而检验医学则以方法的研究和改进为目的。2013.09实验诊断学概论-2013实验诊断学的任务是将检验的结果,结合病史/家族史、症状/体征以及影象检查/病理检查等,进行逻辑的分析和科学的思维,对病人作出正确的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断。检验医学的任务是使用仪器、试剂、方法对标本/样品进行检测,并做好质量控制,为临床提供准确的检验结果。2013.09实验诊断学概论-2013二、实验诊断学的主要内容及应用范围实验诊断学的主要内容○临床检验(LaboratoryTechnology)○临床血液学检验(ClinicalHematology)○临床生物化学检验(ClinicalBiochemistry)○临床病原学检验(ClinicalMicrobiology)○临床免疫学检验(ClinicalImmunology)2013.09实验诊断学概论-2013尿液的化学试验分析与尿沉渣检验浆膜腔积液检验脑脊液及其它体液分析各种分泌物及脱落细胞(1)临床检验(体液学检验):2013.09实验诊断学概论-2013内容:血液细胞的计数和分类、血细胞形态、骨髓细胞形态、细胞化学染色。用途:血液病及各种贫血、凝血及止血功能、出血性疾病的实验室诊断。(2)临床血液学检验:2013.09实验诊断学概论-2013(3)临床生物化学检验:测定:人体血液和体液中的生化物质和治疗药物浓度如各类代谢物、酶类、水盐、血气、内分泌激素、治疗药物浓度、微量元素等。方法:分光光度法、电泳法、离心分离法、色谱法、电极法、原子吸收分光光度法等方法2013.09实验诊断学概论-2013(4)临床病原学检验:方法:细菌培养与药物敏感试验、血清学反应等。检测:感染性病原体、医院感染的微生物检测等。2013.09实验诊断学概论-2013(5)临床免疫学检验:细胞免疫、体液免疫方法:抗原抗体反应或各免疫标记技术检测:血液和体液中的各类传染病抗原抗体、肿瘤标记物、细胞因子、免疫成分及功能、自身免疫病、器官移植等。2013.09实验诊断学概论-2013温附一医学检验中心临床基础检验室临床急诊检验室临床微生物检验室临床血液检验室临床基因诊断和遗传学检验室临床生化检验室临床免疫检验室2013.09实验诊断学概论-2013实验诊断学的应用范围:临床医疗○疾病的诊断和鉴别诊断○疗效观察和预后判断疾病预防社会普查健康咨询科学研究2013.09实验诊断学概论-2013实验诊断学的应用范围:临床医疗○疾病的诊断和鉴别诊断○疗效观察和预后判断疾病预防社会普查健康咨询科学研究2013.09实验诊断学概论-2013三、实验诊断学的现状和发展趋势(一)仪器的自动化从手工操作自动化仪器1、常用仪器血液/尿液检验生化学检验微生物检验免疫学检验分子生物学检验血液分析自动生化分析自动血培养酶免疫PCR扩增血液凝固干化学分析微生物鉴定免疫荧光DNA测序尿液分析血气分析药敏分析流式细胞生物图象分析染色体分析电泳分析厌氧菌培养免疫电泳生物芯片分析1.仪器的自动化从手工操作自动化仪器现状:2013.09实验诊断学概论-20132.标本微量化、方法标准化、检测自动快速、报告电脑化、高新技术不断涌现。3.检验人员水平和层次不断提高4.管理逐步完善---使测定结果的准确性和可重复性不断提高。2013.09实验诊断学概论-2013实验室管理的完善和进一步提升:CAP、ISO15189的医学实验室认可…实验监测下的个体化诊断和个体化治疗方法和仪器的不断改善:如床旁检测(POCT,pointofcaretest)发展趋势:2013.09实验诊断学概论-2013掌握:检验项目的选择,常用检验的临床意义学会:临床思维,进行实验的评价及结果分析熟悉:标本的采集和处理以及实验的影响因素了解:检验项目的方法、原理注意:全面分析、动态观察四、学习实验诊断学的方法和要求:2013.09实验诊断学概论-2013分析前、中、后各种因素均可能影响到检验结果,因此需建立完善的质量保证体系(室内质量控制、室间质量评价)来提高检验结果的准确性和精密度。五、实验诊断的影响因素2013.09实验诊断学概论-20131.选择正确的标本种类血液标本的种类全血:血细胞成分检验血清:大部分生化、免疫项目检验血浆:部分临床生化检验及凝血功能游离Hb2013.09实验诊断学概论-20132.选择合适的采血方式:采集方式:毛细血管采血静脉采血:最常见动脉采血:常用于血气分析2013.09实验诊断学概论-20133.选择合适的采血时间A.空腹采血(禁食8h后)有些生化物质消化吸收快,受进餐影响大。如血葡萄糖、甘油三酯,只有空腹才反映真正水平;有些餐后的高脂血症血浆混浊,干扰生化反应,因此这些项目尽可能用空腹血。2013.09实验诊断学概论-2013B.特定时间采血糖耐量试验,餐后2小时的血糖;血药浓度的峰值与谷值等。2013.09实验诊断学概论-20134.选择正确的抗凝剂许多血液分析需用抗凝血,不同检验项目抗凝剂不同。如血液常规要用EDTA-K2血沉与血凝试验要用枸橼酸钠血气分析用1000U/ml的肝素……,否则就会影响结果。2013.09实验诊断学概论-20135.其他的一些重要的临床常见影响因素:•溶血标本对K+测定的影响(细胞内浓度是血浆中的35-40倍)•采血不畅(部分凝固)时对血小板与凝血因子测定的影响•输液污染对K+、葡萄糖浓度的影响•标本放置时间过长对结果的影响,如红细胞对葡萄糖的糖酵解•RBC代谢对血气的影响,K+浓度等2013.09实验诊断学概论-2013标本收集前应考虑的因素包括病人的饮食、药物与采集时间等有些化学组成容易受到饮食成分的干扰,有时还可受到近期食谱的影响许多药物可干扰测定结果,应加以注明,并尽可能在试验前停药有些药物可能对某一种测定方法发生干扰,而对另一种方法却无影响,因此医生和检验人员之间的密切联系更显得必要某些血浆组成的浓度可有昼夜节律性变化(如皮质醇等),则应规定恰当的标本收集时间综上:标本采集应注意2013.09实验诊断学概论-2013标本收集时应考虑的因素最常见的是病人的体位、皮肤消毒剂的选择;采血部位;有无瘀血与溶血、抗凝剂的成分和用量等例如有资料表明,人体从平卧状态转为直立状态15分钟内,静脉血中血浆蛋白及某些与血浆蛋白结合的成分的浓度可增高10%-13%,这是由于细胞外液的重新分布所致当患者处于静脉输液时,不应在输液部位静脉采取标本2013.09实验诊断学概论-2013标本收集后应考虑的因素一般应即时送实验室有些检查必须立即进行,必要时可冰箱保存,或分离血浆(血清)后保存2013.09实验诊断学概论-2013六、实验诊断的临床应用与评价明确选择实验的目的根据实验的特性选择适合的实验前提:正确选择实验室检查项目2013.09实验诊断学概论-2013实验诊断的临床应用因此不同的指标有不同的诊断价值,在项目选择上遵循循证医学或循证检验医学的原则和观点。2.也有些只能作辅助诊断:如白细胞计数与分类对炎症的判断转氨酶高低对肝损坏的判断1.有些称黄金指标可以直接依此做出结论,得到确定诊断如HCG水平诊断妊娠,骨髓检查对血液病的诊断,细菌培养对感染的诊断等。2013.09实验诊断学概论-2013灵敏度=×100%=×100%假阴性真阳性真阳性caa有病TP(a)FP(b)FN(c)TN(d)(1)诊断灵敏度(sensitivity,Se)又称敏感度、敏感性,指某检验项目对某种疾病具有鉴别、确认的能力,即所有病人中真阳性结果的百分数。反映诊断试验正确识别患病者的能力,该值愈大愈好。实验诊断的评价------常见评价指标:灵敏度高的诊断试验,比较容易误诊。2013.09实验诊断学概论-2013(2)诊断特异性(specificity,Sp)又称特异度,指某检验项目确认无某种疾病的能力,即所有非病人中真阴性结果的百分数。反映正确鉴别非患者的能力,该值愈大愈好。特异度=×100%=×100%真阴性假阳性真阴性dbd无病TP(a)FP(b)FN(c)TN(d)特异度高的诊断试验,比较容易漏诊。2013.09实验诊断学概论-2013(3)诊断准确度(accuracy,AC)是指所有试验个体中,诊断准确结果的百分数,即诊断试验能准确划分患者和非患病者的百分比。反映诊断试验正确诊断患者与非患者的能力。诊断准确度=×100%=×100%假阴性真阴性假阳性真阳性真阴性真阳性dcbadaTP(a)FP(b)FN(c)TN(d)2013.09实验诊断学概论-2013特异性高的试验,得到阳性试验结果可以肯定有病,但阴性结果不能排除有病的可能。灵敏度高的试验,得到阳性试验结果不能肯定有病的诊断,但阴性结果可以排除有病的诊断。应用:诊断目的的实验选择:为了排除某种疾病的诊断选灵敏度高的实验。为了确诊某种疾病的诊断选特异性高的实验。筛选目的的实验选择:以发现某种疾病的病例为目的—灵敏度高的实验。不希望出现假阳性结果为目的—特异性高的实验。2013.09实验诊断学概论-2013(1)参考值:是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值;所有抽样组的值的平均值加减2个标准差即为参考范围。是批量的健康人调查,标本量大与年龄、性别、职业、地区分布、嗜好等相关具有代表性的平均值范围,供病人结果对照参考它可以来自有关文献最好各实验室有自己的参考值(三)参考值(参考范围)与医学决定水平2013.09实验诊断学概论-2013(2)医学决定水平所谓医学决定水平就是指该项结果如高于或低于某个值,有着直接的临床意义,如可在疾病诊断中起排除或确认的作用、用于疾病分级或分类、进行预后估计等,针对这个值,医生应采取一定的临床措施。2013.09实验诊断学概论-2013医学决定水平有不同的限值,这个限值可由医生根据理论与经验确定例:如AFP(甲胎蛋白)的正常参考范围是25ng/ml,40ng/ml即有肝损害,600ng/ml即有肝癌的诊断价值。后二者即是不同的医学决定水平限值。2013.09实验诊断学概论-2013(3)危急值是指某些检验结果出现异常超过一定界值时,可能危及患者生命,医生必须紧急处理。2013.09实验诊断学概论-20131)定性结果:用阴性或阳性表示,而阳性表示时又可以写成(+)~(++++)反映阳性的强度。(四)检验结果的报告方式与结果分析2013.09实验诊断学概论-20132)定量结果与计量单位(国际计量单位—SI制)(1)计数量:例如血细胞用6×109/L表示。(2)浓度单位:凡是分子量明确的用mmol/L或umol/L表示;分子量不明确或混合物(血清蛋白)用g/L、mg/L、μg/L、ng/L、pg/L……表示。2013.09实验诊断学概论-2013一般定量检验结果的报告方式2013.09实验诊断学概论-2013名称
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