有害微生物的控制

第五节有害微生物的控制消毒（部分杀灭）杀菌溶菌灭菌（彻底杀灭）杀灭防腐（抑制霉腐微生物）化疗（抑制宿主体内病原菌）抑制除菌控制有害菌的措施一、几个基本概念灭菌（sterilization）采用强烈的礼花因素是任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。消毒（disinfection）采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，而对被处理物体基本无害的措施，称为消毒。防腐（antisepsis）利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生霉腐的措施，称为防腐。化疗（chemotherapy）即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该传染病的一种措施。二、物理灭菌的代表——高温火焰灼烧法烘箱热空气灭菌法干热灭菌法巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法高压蒸汽灭菌法湿热灭菌（消毒）法高温灭菌（消毒）法1、高温灭菌（消毒）法——是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。★干热灭菌法（dryheatsterilization）干燥热空气灭菌法(hot-airoven)：将物品放入烘箱内，然后升温至150℃～170℃，维持1～2小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌，不适合液体样品，及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死，所以温度高、时间长。灼烧法（incineration）：将被灭菌物品在火焰中灼烧，使所有的生物质碳化。适用于不怕烧的实验器具，如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。★湿热法(moistheatsterilization)：特点：温度低、时间短、灭菌效果高原因：1)菌体内含水量越高，则凝固温度越低；2)蒸汽冷凝会放出潜热；3)饱和水蒸汽穿透力强；4)易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，如氢键结构。高压蒸汽灭菌法利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100℃以上高温灭菌的方法。方法：121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持15~20min。112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20~30min。115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20~30min。应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121℃。含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112℃。适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。高压蒸汽灭菌锅注意事项：•排净冷空气；•灭菌终了，缓慢降压；•灭菌结束，趁热取出物品。煮沸消毒法将水加热至100℃，煮沸15min~30min，可杀死所有营养细胞和部分芽孢，达到消毒物的目的。巴斯德消毒法（Pasteurization）：用较低的温度来杀死其中的病源微生物，这样既保持食品的营养风味，又进行了消毒。该法一般是将待消毒的液体食品置于62℃处理30min，然后迅速冷却。即可达到消毒目的。低温长时法：62.9℃30min处理牛奶；高温瞬时法：71.6℃15s处理牛奶；超高温巴斯德灭菌法：让液体食品停留在140℃左右3-4s，急剧冷却至75℃，经匀质化后冷却至20℃。间歇灭菌法：将待灭菌物品在80-100℃蒸煮15～60min，冷却后搁置室温（28～37℃）下过夜，并重复以上过程三遍以上。其蒸煮过程可杀死微生物的营养体，但不能杀死芽胞，室温过夜促使残留的芽孢萌发成营养体，再经蒸煮过程可杀死新的营养体；循环三次以上可保证彻底灭菌的目的。适用于不耐高温的物品灭菌，如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。缺点是麻烦、费时。高温对培养基的影响及其防止措施高温对培养基的不利影响：▲产生混浊或形成不溶性沉淀▲破坏营养（PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用）；▲色泽加深（褐变如产生氨基糖等）；▲改变培养基的pH值（通常下降0.2）；▲形成有害物质，抑制微生物生长；消除有害影响的措施采用特殊的加热灭菌法过滤除菌法其他方法三、消毒剂、防腐剂和治疗剂（一）消毒剂和防腐剂消毒剂:可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂.—主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和环境中的微生物。防腐剂:可以抑制或阻止微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学药剂.——用于机体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。☆但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格.消毒防腐剂的作用机理一般有下列三种方式:①使微生物蛋白质凝固变性,发生沉淀.如酒精等.②破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢.如过氧化氢等.③降低微生物表面张力,增加细胞膜的通透性,使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质.常用的消毒防腐剂及其应用类型名称及使用方法作用原理应用范围醇类70%—75%乙醇脱水、蛋白质变性皮肤、器皿醛类0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）蛋白质变性房间、物品消毒（不适合食品厂）酚类3%—5%石炭酸2%来苏儿3%—5%来苏儿破坏细胞膜、蛋白质变性地面、器具皮肤地面、器具氧化剂0.1%高锰酸钾3%过氧化氢0.2%—0.5%过氧乙酸氧化蛋白质活性基团，酶失活皮肤、水果、蔬菜皮肤、物品表面水果、蔬菜、塑料等类型名称及使用方法作用原理应用范围重金属盐类0.05%—0.1%升汞2%红汞0.1%—1%硝酸银0.1%—0.5%硫酸铜蛋白质变性、酶失活变性、沉淀蛋白蛋白质变性、酶失活非金属器皿皮肤、粘膜、伤口皮肤、新生儿眼睛防治植物病害表面活性剂0.05%—0.1%新洁尔灭0.05%—0.1%杜灭芬蛋白变性、破坏细胞膜皮肤、粘膜、器械皮肤、金属、棉织品、塑料类型名称及使用方法作用原理应用范围卤素及其化合物0.2—0.5mg/L氯气10%—20%漂白粉0.5%—1%漂白粉2.5%碘酒破坏细胞膜、蛋白质饮水、游泳池水地面水、空气等皮肤染料2%—4%龙胆紫与蛋白质的羧基结合皮肤、伤口酸类0.1%苯甲酸0.1%山梨酸食品防腐食品防腐效应评价指标：最低抑制浓度（MinimumInhibitoryConcentration,MIC）半致死剂量（50％lethaldose,LD50）最低致死剂量（Minimumlethaldose,MLD）石碳酸系数（phenolcoefficient）（二）化学治疗剂概念：化学治疗剂是指那些能够特异性地作用于某些微生物并具有选择毒性的化学药剂，它们与非特异的化学药剂相比对人体几乎没有什么毒性或毒性很小，可用作治疗微生物引起的疾病。既可涂抹肌体表面，也可以通过口服或注射吸收到体内。种类：１.抗代谢药物——人工合成２.抗生素——微生物产生1、抗代谢类药物（生长因子类似物）:概念：有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相似，以致于可以和特定的酶结合，从而阻碍酶的功能，干扰代谢的正常进行，这些物质叫抗代谢物，用于疾病治疗，称抗代谢类药物，如：磺胺类药物。机理：作为细菌细胞基本生长因子的竞争性抑制剂（与相应酶竞争性结合）而阻止微生物对生长因子的利用，因而可以抑制微生物的生长。只有当正常代谢产物的量少或不存在时，抗代谢物才有用。种类：磺胺药——对氨基苯甲酸；6-巯基嘌呤——嘌呤；5-甲基色氨酸——氨基酸；异烟肼——吡哆醇。磺胺药作用机理：细菌需要利用对氨基苯甲酸(PABA)合成生长所需的叶酸(THFA)：二氢蝶啶+对氨基苯甲酸二氢蝶酸二氢叶酸四氢叶酸磺胺药核酸合成辅酶F二氢蝶酸合成酶二氢叶酸还原酶二氢叶酸合成酶2、抗生素：概念：抗生素：微生物在其生命过程中所产生的一类低分子量代谢产物，在很低浓度下就能抑制或杀死其它微生物的生长。抗菌谱：抗生素的作用对象有一定范围，这种作用范围称该抗生素的抗菌谱。广谱～：对多种微生物有作用（如：土霉素、四环素）；窄谱～：仅对某一类微生物有作用（如：多粘菌素）作用机制：抑制细胞壁的合成；（如：青霉素）破坏细胞膜功能；（如：多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解）抑制蛋白质合成；（如：氯霉素，四环素、链霉素等）干扰核酸代谢；（如：利福霉素、新生霉素、丝裂霉素、灰黄霉素）