17-药物安全性评价和GLP实验室

第17章药物安全性评价和GLP实验室广州中医药大学药学院药理学教研室[e-mail]张晓君年份药物（用途）毒性反应受害地区受害人数1889~1950甘汞（驱虫、牙粉、通便）汞中毒欧、美、亚死亡儿童585人1900~1949蛋白银（抗炎、消毒）银质沉着症欧、美100人1930~1960醋酸铊（头癣）铊中毒各国死亡10000人1922~1970氨基比林（解热镇痛）粒细胞缺乏各国死亡2082人1940硫代硫酸钠金（风湿、哮喘）肝、肾、骨髓损害各国约1/3用药者1935~1937二硝基酚（减肥）白内障欧、美万人失明，1人死亡1937磺胺酏，二甘醇作溶剂（抗菌消炎）肝肾损害美国358人中毒，107人死亡1953非那西丁（解热镇痛）肾损害、溶血欧、美、加死亡500人，肾病2000人以上1954二磺二乙基锡（治疥疮、粉刺耳）神经毒性、脑炎、失明法国死亡110人，中毒270人1956三苯乙醇（治高脂血症）白内障、阳痿、脱发美国1000人1959~1961反应停（治妊娠反应）海豹样畸形儿欧、美、日10000人，死亡5000人1960异丙肾上腺素气雾剂（平喘）严重心律失常、心衰英、美、澳死亡3500人1963~1972氯碘喹啉（治肠炎）骨髓病变、失明日本中毒7856人，死亡率5%1933~1972已烯雌酚（治先兆流产）阴道腺癌（女）美国300人1968~1979普拉洛尔（抗心律失常）角膜、心包、腹膜损害美国2257万人70年代至世纪末四咪唑(TMS)驱虫药迟发性脑病各国60年代到世纪末氨基糖苷类抗生素（抗感染）耳聋各国我国100万人耳聋2004关节炎镇痛药“万络”心肌梗塞和心脏猝死各国6万人20-21世纪重大药害事件简表药物非临床安全性评价产生的背景•国际经济合作与发展组织（OECD）–提出了新化学物上市前的最低限度的安全性评价项目–制定了一系列的毒性实验准则–凡按此实验准则进行的毒理学实验，成员国间相互承认和接受3第1节药物非临床安全性评价•药物非临床安全性评价–指在人临床实验之前的毒理学实验研究，即按照规定的毒理学程序和方法评价药物对机体产生的有害反应，并外推到通常条件下应用药物对人体和人群的健康是否安全。–研究内容：评价药物的毒性反应•判断剂量和时间与毒性的关系：最小中毒量、最小致死量、毒性反应的起始和持续时间•确定药物毒性的靶器官、中毒机制、毒性反应的性质与可逆性、毒性剂量与安全范围4药物非临床安全性评价的目的•1.提供药物安全性的实验数据，支持I期临床研究。•2.确定临床实验的安全性起始剂量，以及可接受的安全剂量范围。•3.通过广泛检测，发现任何潜在和未知的毒性。•4.在药物开发中获得最大的利益/风险性比率。5药物非临床安全性评价的局限性•1.人与动物的种属差异，反应的敏感性不同，甚至有质的差异→假阳性、假阴性；如，沙利度胺。•2.毒理学实验给药剂量较大，存在高浓度向低浓度外推的不确定性。•3.实验动物数量有限，对发生率较低的毒性难于发现→小数量动物向大规模人群外推的不确定性。•4.实验动物遗传背景、身体状况一致，而临床用药的人群个体差异较大。6----------------------------------------------------------致癌性遗传毒性生殖毒性局部耐受性、过敏、依赖性、免疫毒性光敏和其它试验等了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等，为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护措施、保证受试者用药安全局部用药毒性全身用药毒性急性毒性长期毒性特殊毒性目的药物毒理学第2节药物安全性评价GLP实验室•非临床安全性研究质量管理规范（goodlaboratorypracticefornonclinicallaboratorystudies,GLP）•GLP法规的颁布–1999年10月，SDA颁布了《药物非临床研究质量管理规范（试行）》。–2003年6月，SFDA局长2号令《药物非临床研究质量管理规范》8GLP的适用范围•各国的GLP适用的范围不尽相同•美国FDA——色素和食品添加剂、饲料添加剂、人用药品、兽用药品、生物制品、人用医疗器具、电子产品等•经济合作与发展组织OECD——化学制品如工业化学品、人用药品、兽用药品、化妆品、食品添加剂及农药等•中国SFDA——药品•GLP已成为国际上药物安全性试验研究共同遵循的规范•世界各国的GLP虽然各有特点，但是基本原则是一致的1.提高药品非临床研究的质量2.确保试验数据的真实性、完整性和可靠性3.最大限度地避免人为因素产生的错误和误差，尽可能在试验早期发现并修正4.保证临床用药安全实施GLP的目的GLP的基本精神GLP的基本精神在于：“怎样减少人为的误差，以得到可信性高的实验数据”。降低系统误差避免偶然误差杜绝过失误差实验条件实验系统实验人员实验操作实验资料标准化规范化实验数据和结果的质量药物GLP认证试验项目•单次和多次给药毒性试验(啮齿类)•单次和多次给药毒性试验(非啮齿类)•生殖毒性试验(I段、II段、III段)•遗传毒性试验(Ames、微核、染色体畸变、小鼠淋巴瘤试验)•致癌试验•局部毒性试验•免疫原性试验•安全性药理•依赖性试验•毒代动力学试验药物GLP认证检查主要内容•组织机构和人员•实验设施与管理•仪器设备和实验材料•标准操作规程•研究工作的实施•资料档案•其它(实验技术现场考核、计算机系统)•申请试验项目二、组织机构的设置与职责三、机构人员构成情况、人员基本情况以及参加培训情况14一、机构概要机构发展概况组织机构框架图实验设施平面图GLP实验室申请的资料审查内容GLP实验室申请的资料审查内容（续）15四、机构主要人员情况机构负责人质量保证部门负责人专题负责人动物饲养管理负责人组织病理学检查部门负责人资料保管负责人供试品管理负责人其他负责人五、动物饲养区域及动物试验区域情况动物设施面积和动物收容能力情况各动物饲养区的平面图动物饲养区人流、动物流、物品流、污物流、空气流等流向图环境条件饲料、饮水、垫料等动物用品的来源与检测功能实验室、化学及生物污染特殊区域的环境控制状况清洁剂、消毒剂、杀虫剂使用情况实验动物的来源、质量合格证明和检疫情况16GLP实验室申请的资料审查内容（续）资料审查的内容（续）六、仪器、仪表、量具、衡器等七、机构主要仪器设备八、SOP（制订、修改及废弃）九、计算机系统运行和管理情况十、药物安全性评价研究实施情况17GLP实验流程•制定实验方案。–由项目负责人根据药物特点、药物安全性实验指导原则和GLP实施规定制定•将实验方案递呈质量保证部门审查，同时检查以往的SOP是否适应于该项实验。•实验进行中各业务部门实验工作记录、执行实验方案和SOP实施情况。18GLP实验流程（续）•总结报告：收集实验记录、对资料和数据进行处理，计算统计学及生物学意义；归纳药物毒性的主要靶器官，及临床上可能出现的毒性反应。•资料存档：将实验方案、各个环节的原始记录、各种标本及总结报告保存于档案部门。19软件要求•1.建立完善的组织管理体系•2.高素质的工作人员队伍•3.对各项工作必须采用的标准操作规程（SOP）•4.对实验的全过程要求详细的进行记录•5.对数据管理与统计分析要求•6.组织严密的实验全过程的监督、检查和审查20硬件要求•1.对实验环境中各种设施的构造、宽广度、配置等有严格要求•2.对实验数据的收集、测定或分析等使用的仪器设备以及控制设备内环境有严格要求21GLP的基本内容和要求(一).研究课题的组织与管理(二).对实验设施和仪器设备的规定与要求(三).标准操作程序(SOP)的制定和执行(四).实验设计方案(Protocol)及其主要内容(五).研究资料的收集、整理和报告WHOGLPTainingCourseCopyrightofNextCentury200222（一）研究课题的组织和管理1．业务／行政主管及其职责•任命,指定和更换课题组长•确保质量保证单位履行职能•提供人力，物力，财力等方面的保证•确认各种错误或过失得以纠正•对研究人员和质保单位之间的争议作出裁决WHOGLPTainingCourseCopyrightofNextCentury2002232．课题组长及其职责-设计签署实验方案及其它正式文件并且注明日期。-保证所有实验资料，包括意料之外的试验反应，都被准确地记录并核实。-当实验过程中某些可能影响研究质量和结果一致性性的未预料到的情况发生时，及时采取措施（行动）补救，并且立即如实记录。-确保GLP的各项规定都遵守执行。保证所有的原始资料、文件、实验设计、标本及正式实验报告按档案材料保存和管理。签署正式研究报告，按照国家法规规定签署遵守声明（ComplianceStatement）。243．质量保证单位及其职责•保存实验机构的MasterSchedule，Protocols和SOPs（各1份）。•研究进行期间对研究课题多次监察，以确保研究的一致性。记录和签署每次监察的结•重要问题和发现立即口头知会课题长或提交书面报告，陈述所发现的问题以及采取的相应措施•审定无未经批准或记录的偏离Protocol和SOP的情况发生或出现•审校正式实验报告，确保报告中对研究方法SOP的描述准确无误，实验结果确实是原始资料整理分析的结果•拟写和签署附在正式报告的质量保证声明25（二）实验设施和仪器设备的规定要求1.实验设施•实验机构具备足够的实验动物房间或者其他试验系统区域，以使（1）不同种属的动物或试验系统分别饲育（2）不同的课题分离饲育（3）Quarantine动物（4）建立常规或特别的动物饲育系统。•实验机构应有足够的动物房间或其他试验系统区域，以分别隔离那些用已知有生物危害的试验系统、受试物、对照物或参照物，包括易挥发物质、气溶胶、放射活性材料以及感染性（传染性）微生物。•隔离的房间或区域应有诊断、处理和控制试验系统／动物疾病的装置。应有效地隔离有疾病、疑有疾病、或疾病携带的试验系统／动物的房间或区域。261.实验设施（续)•实验设施应有和排放污染的水、土壤或其它材料的能力。如存养动物,则应有收集和处理所有动物废物和排泄物的能力，或者具有安全消毒的装置。•实验设施应按实验设计方案要求，具备调控环境条件如温度、温度、光线等能力。WHOGLPTainingCourseCopyrightofNextCentury2002272.仪器设备•关键仪器设备(criticalequipment)•常规仪器设备•安全设施与设备•仪器设备的认证。计量审计及日常维修保养28（三）SOP的制定和执行1.种类和制定过程标准操作程序（StandardOperatingProcedure,SOP）凡是实验设计方案中没有详细说明的常规方法和操作程序，都应该制SOP。GLP明确规定，至少需要就以下具体方法和操作步骤制定标准操作程序:1.试验系统／动物的准备2.试验系统／动物的饲养管理3.受试物、对照物和参照物的接收、鉴别、贮放、配制，以及采样方法；4.对试验系统的观察;5.（试）验和测试（定）方法291.种类和制定过程(续)6.垂（频）死中死亡试验系统／动物处理；7.试验系统的尸检或者尸解；8.标本的收集采取与标记；9.组织病理学检查；10.文件资料的处理、存放和检索；11.仪器设备的校正（准）和保养；12.试验系统的转移（运）、取（替）代和鉴别方法。302.SOP的格式和内容－每一种标准操作程序都必须有各自的编号（码），并且署明部门、版本和副本数目；－标准操作程序的名称（题目）和生效日期；－审批者和共（会）签者包括质量保证部门负责人的签字及签署日期；－该标准操作程序的目的，涵盖范围,以及文中所用术语的定义；－材料，操作程序和过程;－转换和计算方法；－报告要求，并将文中“材料”部分和报告的格式（常用表格式）作为标准操作程序之附件；－分发和保存的规定与要求；312.SOP的格式和内容(续)－负责此标准操作程序的有效性，并且监督其遵守执行的人员；－该标准操作程序的