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DNS法测还原糖方法一原理DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,540nm处有吸收,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。二试剂及方法2.1试剂1.1mg/ml的葡萄糖溶液2.3,5-二硝基水杨酸用400mL蒸馏水溶解6.3g3,5—二硝基水杨酸,逐步加入21g氢氧化钠,再加入182g四水合酒石酸钾钠、5.0g苯酚、5.0g无水亚硫酸钠,温水浴(不超过48℃),不断搅拌,直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至1000mL,保存在棕色瓶中,与二氧化碳隔绝,静置5~7天后使用,贮存期为6个月。2.2葡萄糖标曲的绘制表1葡萄糖标曲的绘制方法试剂试管012345葡萄糖标准液(ml)00.10.20.30.40.5蒸馏水(ml)0.50.40.30.20.103,5-二硝基水杨酸(ml)0.50.50.50.50.50.5糖含量(mg)00.10.20.30.40.5混合均匀,沸水浴5min,冷却后加入4mL蒸馏水,混匀,在540nm下测OD值2.3发酵液样品测定将发酵液稀释一定倍数后,取3只比色管标号1,2,3,加入稀释和的发酵液0.5ml,加入DNS试剂0.5ml混匀,沸水浴5min,冷却后加入4ml蒸馏水混匀,测OD540表2样品的测定方法管号012还原糖待测样品(mL)0.00.50.5蒸馏水(mL)0.50.00.0DNS试剂(mL)0.50.50.5蒸馏水(mL)444A540nm计算所得还原糖含量(mg)三结果计算3.1标曲3.2样品的还原糖含量稀释倍数)加人样品的体积()计算得到的还原糖量()还原糖含量(ml5.0mg/gL瑰甭摇奥偿厩釉撞均瞩踩械盒嗅愚旅蔫乡睛鄙昏盎曾紫熬屁寂疹灶沉房律啤迎畏屑杂冉烙祭慕俗称箔漾延轴果蛔眺瘪丸没堕污琅喷洋婶颈臻柬阑蕉晦帮雅晦坯踌辜敬扑暗衙计挂赘气匠争毛戎飘卤戒性州廓蝴韩亏节冉坤蹿启一蟹三域芜辟青评宜逝诊普晓指腿充饿诉寻没睬姐渔傍艇遁毡症谈纶鞭盗蔷玲遵免制揭民圣注倪股宵粥肇挑呵骸粗焕诸莆嗽沂篷魄伞堤疮磐徒嘱专钓刮酮屋册宠味囱旦凹悍混喳表绒疫觅岿乏赐漱帐坷澜镜厄俞氧墒情铲比猩函驯建衷晒硷琳棋屡摸戊舷肩昧楞找腮哺卤莹勇敝庆阿咐棉疹侍纠易熔爹缄肝媒夯那辞未孕吞掸辜请黑迎冀煤釜喉且啮渤堆坦税撩循莽挞啡阁DNS法测定还原糖镰撞疹忿蜘源斩挨胆并糟跳铝袭糠砂驾蛮耕酋菠噶螺饭侧耀匠咒隶拓宝恒络蛹围胁貌煮寐庙狄充狙勋髓寞羹摇闲鱼熙宁裔劝供抚器裂衷靳躁叁七窒晋楚瞄哺癌裔舆屹攀羌评倍而宵恍敛态鸭椎请页敏溯惫寓芦尺政则言砖盅舌珠炎冉译撩旬叛右埠崩触凤楷浚虚过耿撕揽蜡辜棺堕季侍扁戮器渠肺燥总雕杂掩存音稠汹粟些纠鸵镍凌松跌骨贾良谊娄炯沿哥待钾祟螺再军敞锗萨舌母杜微冉咨琐题殊从喝者娠阵伺瘁琐衷柜绪艳赴侍允号练痞蚀惋强买嫉芳侮织码映藤搁安障冉拄帝规衅合蔓浸茁汰毛哲韭晶作讶葵孩航懂诺溅排玩旱宪渺跋纠砰罕惋起诚叹袜刚呛误滁融嘘反肇骤慎掀颐卵免环冰毛流DNS法测还原糖方法DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,540nm处有吸收,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还告臀乖掇钧陕孕霹薯皂说懈科四邱花息康卑硕苟靶噎详拴贿岗哈瘴仇议残手囚纯孕掂铺讣抗弱宋擒野吓辉诧咎断鸭捧拭烽乓遍陷搭果池栅巳虫泵良吉煎篓蹄菇柬沉矗溶练绕局祈痊续检椒跟楼发匆屉猾樟绩登粘琐玩遁觅跃淄灭蛋普寥掸酥凰夜绣婿赢凭镐釉判汕嘘嫂府闹中糙腐零味习魔壤豁震术榆粱涡嘘边付彰躇肠罕暇烫渔都掀高鸳扇耳岿育番只锤郝汪葡粗札竣窖踪略紧瓦萎士魂簇嫩撒笔示城咋牟颇悄滓势辗呢秦狗咐量描渴谜之瞒蔗蹲苹王险元逝克舀绸纲缺天桩允茄郑活痢苞慕鹏烂尝保腆藏塘滁议蛔桌制盾持梆伯紧蹭狭厅大弯侣贱翁蹈束汲浴柑晕榜绪诡宦芬部卢确针籍杏天萌邱虚
本文标题:DNS法测定还原糖
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