总氮的测定实验作业指导书

作业指导书页码：第1页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日总氮的测定1、方法依据水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法HJ636-20122、适用范围本标准规定了测定水中的碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法。本标准适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。当样品量为10mL时，本方法的检出限为0.05mg/L，测定范围0.20~7.00mg/L。3、测定原理3.1总氮的测定在120~124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220和A275，按公式（1）计算校正吸光度A，总氮（以N计）含量与校正吸光度A成正比。A=A220-2A2754、干扰和消除作业指导书页码：第2页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日当碘离子含量相对于总氮含量的2.2倍以上，溴离子含量相对于总氮含量的3.4倍以上时，对测定产生干扰。水样中的六价铬离子和三价铁离子对测定产生干扰，可加入5%盐酸羟胺溶液1~2mL消除。5、试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无氨水。5.1硝酸钾标准贮备液：称取0.7218g硝酸钾溶于适量水，移至1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，加入1~2mL三氯甲烷作为保护剂，在0~10℃暗处保存，可稳定6个月。也可直接接购买市售有证标准溶液。5.2硝酸钾标准使用液：p（N）=10.0mg/L量取10.00mL硝酸钾标准贮备液至100mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，临用现配。5.3碱性过硫酸钾溶液称取40.0g过硫酸钾溶于600mL水中（可置于50℃水域中加热至全部溶解）；另称取15.0g氢氧化钠溶于300mL水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合另种溶液定容至1000mL，存放于聚乙作业指导书页码：第3页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日烯瓶中，可保存一周。5.4盐酸溶液：1+96、仪器和设备6.1紫外分光光度计：具10mm石英比色皿。6.2高压蒸汽灭菌器：最高工作压力不低于1.1~1.4kg/cm2；最高工作温度不低于120~124℃。6.3一般实验室常用仪器设备。6.4具塞磨口玻璃比色管：25mL7、样品7.1样品采集将采集好的样品贮存在聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶中，用浓硫酸调节PH值至1~2。7.2样品保存常温下可保存7d贮存在聚乙烯瓶中，-20℃冷冻，可保存一个月。8、分析步骤8.1校准曲线的绘制分别量取0.00、0.20、0.50、1.00、3.00和7.00mL硝酸钾标准使用液于25mL具塞磨口比色管中，具对应的总氮（以N计）含量别作业指导书页码：第4页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日为0.00、2.00、5.00、10.0、30.0和70.0ug。加水稀释至10.00mL，再加入5.00碱性过硫酸钾溶液，塞进管塞，用纱布和线绳扎紧管塞，以防弹出。将比色管置于高压蒸汽灭菌器中，加热至顶压阀吹气，关阀，继续加热至120℃开始计时，保存温度在120~124℃之间30min。自然冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀2~3次。注1：若比色管在消解过程中出现管口或管塞破裂，应重新取样分析。每个比色管分别加入1.0mL盐酸溶液，用水稀释至25mL，盖塞混匀。8.2总氮测定使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水作参比，分别于波长220nm和275nm处测定吸光度。零浓度的校正吸光度Ab、其他标准系列的校正吸光度As及其差值Ar按公式（2）、（3）、（4）进行计算。以总氮（以N计）含量（ug）为横坐标，对应的Ar值为纵坐标，绘制校准曲线。8.3空白试验用10.00mL水代替试样，按照测定步骤进行测定。作业指导书页码：第5页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日9、结果计算9.1总氮的计算计算式样校正吸光度和空白试验校正吸光度差值Ar样品中总氮的质量浓度ρ（mg/L）按公式进行计算。Ab=Ab220-2Ab275As=As220-2A275Ar=As-Ab式中：Ab—零浓度（空白）溶液的校正吸光度；Ab220—零浓度（空白）溶液于波长220nm处的吸光度；A275—零浓度（空白）溶液于波长275nm处的吸光度；As—标准溶液的校正吸光度；As220—标准溶液于波长220nm处的吸光度；As275—标准溶液于波长275nm处的吸光度；Ar—标准溶液校正吸光度于零浓度（空白）溶液校正吸光度的差。P=（Ar-a）×f÷bV式中：p—样品中总氮（以N计）的质量浓度，mg/LAr—试样的校正吸光度与空白试验校正吸光度的差值；作业指导书页码：第6页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日a—校准曲线的截距；b—校正曲线的斜率；V—试样体积，ml；f—稀释倍数。10、质量保证和质量控制10.1校准曲线的相关系数r应大于等于0.999。10.2每批样品应至少做一个空白试验，空白试验的校正吸光度Ab应小于0.030.超过该值时应检查实验用水、试剂（主要是氢氧化钠和过硫酸钾）纯度、器皿和高压蒸汽灭菌器的污染状况。10.3每批样品应至少测定10%的平行双样，样品数量少于10时，应至少测定一个平行双样。当样品总氮含量≤5%。测定结果一平行双样的平均值报出。10.4每批样品应至少测定一个校准曲线中间点浓度的标准溶液，其测定结果与校准曲线该点浓度的相对误差应≤10%。否则，需重新绘制校准曲线。10.5每批样品应至少测定10%的加标样品，样品数量少于10时，应至少测定一个加标样品，加标回收率应在90~110%之间。11、注意事项作业指导书页码：第7页，共7页文件编号：JLQX-03-022版次：2016版，第0次修订文件名称：总氮的测定发布日期：2016年1月1日11.1某些含氮有机物在本标准规定的测定条件下不能完全转化为硝酸盐。11.2测定应在无氨的实验环境中进行，避免环境交叉污染对测定结果产生影响。11.3实验所用的器皿和高压蒸汽灭尽其等均应无氨污染。实验中所用的玻璃器皿应用盐酸溶液或硫酸溶液浸泡，用自来水冲洗后再用无氨水冲洗数次，洗净后立即使用。高压蒸汽灭菌器应每周清洗。11.4在碱性过硫酸钾溶液配置过程中，温度过高会导致过硫酸钾分解失效，因此要控制水浴温度在60℃以下，而且应待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，再将其与过硫酸钾溶液混合、定容。11.5使用高压蒸汽灭菌器时，应定期检定压力表，并检查橡胶密封圈密封情况，避免因漏气而减压。