妇产科诊疗常规

导读：（二）把常规制备的染色体新鲜片子放入5%氢氧化钡溶液中处理30秒，（四）开始抽出羊水2ml只能作测AFP用，不能送培养，因其可能混有母血。（五）穿刺抽吸次数不能大于3次，避免引起流产及胎儿损伤。（六）如羊水混有母血，应加入肝素防凝血，抽吸出的羊水应立即送实验室接种。四、术后注意事项（一）穿刺结束后孕妇卧床休息一小时（二）有宫缩、流血、流水随诊。（三）免重体力劳动二周。（四）适当使用抗菌素及安胎（四）开始抽出羊水2ml只能作测AFP用，不能送培养，因其可能混有母血。（五）穿刺抽吸次数不能大于3次，避免引起流产及胎儿损伤。（六）如羊水混有母血，应加入肝素防凝血，抽吸出的羊水应立即送实验室接种。四、术后注意事项（一）穿刺结束后孕妇卧床休息一小时（二）有宫缩、流血、流水随诊。（三）免重体力劳动二周。（四）适当使用抗菌素及安胎药。（五）预约二周后复诊。经皮脐静脉穿刺取血术一、适应症：有以下适应症的孕18周以上的孕妇。（一）35岁以上的高龄孕妇；（二）胎儿染色体核型分析；（三）某些遗传代谢缺陷、基因异常的产前诊断；（四）诊断胎儿血液疾病：血红蛋白病、血友病、溶血性疾病及自身免疫性异种免疫性血小板减少；（五）用于胎儿宫内治疗：如输血或药物治疗；（六）孕期有害物质接触史，如药物、化学物质、射线、病毒感染等。二、禁忌症：（一）先兆流产。（二）妊娠合并有严重心肺功能不全，重度贫血，凝血机制障碍者。（三）单纯社会问题要求预测胎儿性别。三、注意事项（一）术前与家人交代可能出现的并发症。（二）B超确定胎盘及脐带位置、纵、横切较能清楚显示脐蒂处为穿刺点。（三）如脐蒂显示不清，可穿刺脐带的游离段。（四）术中抽到血后，要鉴定确为胎儿血。（五）一般抽血2—8ml，不宜过多，注射器及穿刺针应先抽吸肝素以抗凝。（六）穿刺次数不能多于2次，穿刺后观察脐带渗血情况。四、术后注意事项（一）拔除穿刺针后压迫穿刺点3—5分钟。（二）B超继续观察脐带、胎盘穿刺处有无出血及胎心胎动情况。（三）术后需留院观察4—6小时，B超复查后方离院。（四）免重体力劳动二周。（五）预约二周后复查。（六）术后适当使用抗菌素及安胎药。血淋巴细胞培养染色体检查一、适应症：（一）习惯性流产、原发不孕及分娩过染色体异常儿的夫妇。（二）原发闭经、月经稀发、卵巢早衰等月经病患者。（三）外生殖器畸形、性别不明确的男女。（四）原因不明的先天性智力低下患者。（五）各类畸形新生儿或父母染色体异常的新生儿。二、培养前准备（一）所用器皿须经肥皂水、清水、蒸馏水冲洗，过酸清洁烤干消毒备用，消毒时间超过二周要重新消毒。（二）术前紫外线照射无菌室每周用苍术熏烟1次。（三）无菌条件下抽取外周血1—2ml，肝素抗凝。（四）洗手，戴上口包、帽后，换鞋进入无菌室。三、培养（一）用pH为7.2~7.4的1640培养液4ml，加入肝牛血清1ml，PHA0.2ml及血液0.5ml。（二）37℃培养箱中培养68~72小时，加入秋水仙素终止分裂。（三）加入秋水仙素后继续培养3~6小时。（四）每天观察培养箱温度及培养物情况，看有无溶血及污染，培养箱温度控制在37±0.5℃为宜。四、收获（一）收集细胞：培养物倒入尖底离心管、以800~1000转/分速度离心5分钟去上清液。（二）低渗：加入预温为0.075M氯化钾8至10ml，37℃水溶中低渗30分钟。（三）预固定：以3：1甲醇冰醋酸0.5ml固定30分至1小时2次，必要时4℃冰箱过夜。（四）冰片滴片，火焰上过数次。五、G带的制备（一）将玻片放于70℃烤箱7~10小时或放于37℃温箱中72小时。（二）胰酶消化：用Difico胰酶液（浓度为2.5%）0.5ml溶于60ml生理盐水中，再用3%Tris液及0.4%酚红调节pH值7.2~7.4，37℃水溶箱中预温。（三）染缸内溶液温度达到37℃时放入玻片每次要摸索消化时间，一般为60~80秒。（四）用pH6.8的磷酸缓冲液配制的20：1吉姆氏染色15~20分钟。六、C带的制备（一）把5%氢氧化钡和2XSSC溶液各50ml分装两染缸中，置于60℃水溶箱中。（二）把常规制备的染色体新鲜片子放入5%氢氧化钡溶液中处理30秒。（三）取出清水冲洗干净后再放入2XSSC液中1~1.5小时。（四）取出清水冲洗干净后以20：1的吉姆氏染色5分钟。七、镜检（一）每例镜下计数30个分裂相，画图分析3个分裂相，嵌合体则计数50个分裂相，各系细胞分析3个分裂相。（二）画图分析有异常或可疑的，摄片3至5个分裂相，剪贴分析。（三）培养基pH值严格控制在7.2~7.4之间，以利细胞生长。（四）所用固定液必须新鲜配制。（五）配成水的培养基存放时间不应超过三个月。羊水细胞培养染色体制备一、适应症：有产前诊断适应症的孕18~22周的孕妇。二、培养前准备（一）实验器皿及无菌室准备同外周血培养。（二）把抽取的羊水放水尖底离心管中，以每分1500转速度离心8分钟备用。三、培养（一）把F102ml加胎牛血清1ml及羊水离心沉淀物0.5ml加入灭菌的25ml方瓶中，反口瓶塞塞紧，37℃温箱中静置培养5~7天。（二）换液：5~7天后在显微镜下观察细胞生产情况，并在无菌条件下，将原培养液倒出加入等量的新鲜培养基及胎牛血清，继续37℃培养箱中培养。（三）继续培养1~2天，每天观察细胞生长情况，一般9~13天可收获细胞，收获加秋水仙素阻断细胞分裂，继续培养6小时收获。四、收获细胞（一）细胞的收集：将培养液倒出，用竹片或吸管将贴壁细胞轻刮下，并以生理盐水冲洗2次，把细胞放入尖底离心管中，离心、去上清液。（二）低渗：用已预温的0.4%氯化钾及0.4%枸橼酸钠1：1液2ml，37℃低渗30分钟。（三）离心、预固定、固定、制片及镜检分析同外周血培养。五、注意事项（一）所用培养瓶必须认真擦洗、消毒、培养前5天要严格静置，否则细胞不贴壁。（二）羊水必须是新鲜抽取的，一般离体后不超过一小时。（三）换液后每天要观察细胞生长情况，掌握好细胞收获时间，否则收不到中期分裂相。（四）操作要轻、稳，避免染色体丢失，低渗时间要掌握好，避免染色体不分散或过分分散而影响分析。绒毛直接制备染色体一、材料（一）有产前诊断适应症的孕7~10周经阴道抽取的绒毛5~10mg。（二）自然流产出的对难免流产刮宫出的胚胎绒毛组织。