免疫层析快速诊断技术

Lateral-FlowDiagnosticTechnology免疫层析快速诊断技术------TomBacon(PM-BIODOT),GENE(SHOffice)TomBacon,GeneCo.,LTD.2Tel:[phone]胶体金技术起源及现状起源:1971年,Faulk和Taytor引入现状:1.层析法(Lateral-Flow)2.渗滤法(Through)3.免疫金电镜胶体金的作用:指示剂TomBacon,GeneCo.,LTD.3Tel:[phone]层析法技术优势:简单\现场\快速1.打开包装取出试纸条2.直接插入待测样品中3.目测读出结果（3-10分钟内）TomBacon,GeneCo.,LTD.4Tel:[phone]与常规诊断方法相比：优点缺点快速：全部检测过程仅需3-10分钟。简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专业人员，携带方便，可随时随地进行。廉价：单个测试条成本极低可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立刻拿到结果，不必等待。稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液，因而适合各种检查定量问题灵敏度问题TomBacon,GeneCo.,LTD.5Tel:[phone]技术应用类别应用领域检测的物质人类医学各级医院,血站,CDC,防疫站,诊断中心；家庭自检；商检系统；边检口岸；公安系统.传染病（乙肝五项,HIV,SARS等）标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等）女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）农牧业畜牧兽医站,商检系统,边检口岸,农牧类院系和研究所传染病（禽流感,兽瘟疫等）病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）环境环保监测部门,研究机构有害物质超标食品安全食品安全检测中心,各监管部门农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素TomBacon,GeneCo.,LTD.6Tel:[phone]Elements原理TomBacon,GeneCo.,LTD.7Tel:[phone]试纸条组成结构测试线（T线）控制线（C线）胶体金垫吸水滤纸样品垫NC膜（硝酸纤维素膜）层析方向PVC底板TomBacon,GeneCo.,LTD.8Tel:[phone]检测原理视频演示TomBacon,GeneCo.,LTD.9Tel:[phone]免疫层析法检测原理分类介绍（双抗体夹心）（以HCG检测为例）TomBacon,GeneCo.,LTD.10Tel:[phone]免疫层析法检测原理分类介绍（竞争反应）（以吗啡检测为例）TomBacon,GeneCo.,LTD.11Tel:[phone]免疫层析法检测原理分类介绍（应用proteinA金标）（以HIV检测为例）TomBacon,GeneCo.,LTD.12Tel:[phone]TECHNOLOGY技术TomBacon,GeneCo.,LTD.13Tel:[phone]技术分项抗原抗体生物原料标记技术NC膜与溶液喷点胶体金垫与溶液喷点样品垫吸水纸粘性底板干燥方法溶液体系分析装配\切条\包装TomBacon,GeneCo.,LTD.14Tel:[phone]抗体Antibody来源差异:鼠抗,兔抗和羊抗种类差异:单抗,多抗腹水的处理:饱和硫酸铵沉淀法特异性:亲和层析柱浓度:浓缩溶解液:不含盐,例如PB抗原抗体生物原料抗原Antigen偶联抗原物质:BSA,OVA等毒品检测来源:合成抗原TomBacon,GeneCo.,LTD.15Tel:[phone]标记技术Conjugate容器硅化处理金颗粒制备(负电)颜色与颗粒的关系.最佳标记颗粒大小40nm.蛋白质最适用量测定:盐析法TomBacon,GeneCo.,LTD.16Tel:[phone]NC膜与溶液喷点---NC膜NC膜的性能NC膜的选择爬速(???秒/4cm)对灵敏度的影响底衬的作用不同膜厂家的产品差异(Whatman/S&S,Millipore,Sartorius)TomBacon,GeneCo.,LTD.17Tel:[phone]NC膜与溶液喷点---喷点溶液Dispensing(喷点演示:BIODOTXYZ系列喷点仪器)C\T线溶液前处理:1.过滤,0.2um孔径滤膜2.离心1万转10分钟喷点过程头尾去除,喷点中的报废标志C\T线喷点工艺(BJQ3000喷头)与接触划点(FL1000XY喷头)工艺比较TomBacon,GeneCo.,LTD.18Tel:[phone]TomBacon,GeneCo.,LTD.19Tel:[phone]胶体金垫与溶液喷点胶体金垫1.材料选择2.糖的作用3.缓冲溶液的作用喷点法与浸泡法的比较(AJQ3000喷头)TomBacon,GeneCo.,LTD.20Tel:[phone]样品垫材料选择各成分的作用1.缓冲溶液的作用(PH)2.盐的作用3.大分子蛋白BSA\PVP4.表面活性剂Tween-20,TritonX-100TomBacon,GeneCo.,LTD.21Tel:[phone]吸水纸吸水效率进口与国产纸的差异TomBacon,GeneCo.,LTD.22Tel:[phone]粘性底板原理作用供应商的选择TomBacon,GeneCo.,LTD.23Tel:[phone]干燥方法Dry干燥方法的比较1.冷冻干燥法2.烘箱3.烘房温湿度的控制1.温度对蛋白的影响2.湿度的控制办法TomBacon,GeneCo.,LTD.24Tel:[phone]溶液体系分析各环节缓冲溶液的选择与统一盐的作用表面活性剂的作用糖的作用大分子蛋白的作用其他作用物质TomBacon,GeneCo.,LTD.25Tel:[phone]装配\切条\包装Lamination装配切条(演示:BIODOTCM4000切条机)刀的维护与清洁底板选择(胶的影响)包装TomBacon,GeneCo.,LTD.26Tel:[phone]常见技术问题解决方案TroubleshootingTomBacon,GeneCo.,LTD.27Tel:[phone]解决问题的办法批号记录替换分析TomBacon,GeneCo.,LTD.28Tel:[phone]原料效价降低保存办法反复复融的影响细胞株的退化TomBacon,GeneCo.,LTD.29Tel:[phone]标记问题兔抗标记标抗原盐标记沉淀—保护剂\金颗粒TomBacon,GeneCo.,LTD.30Tel:[phone]层析问题标记复合物的颗粒沉积活性剂糖的作用TomBacon,GeneCo.,LTD.31Tel:[phone]灵敏度问题源头:抗原抗体免疫反应材料问题—NC膜附加物质的解决办法假阳性的解决批内\批间差TomBacon,GeneCo.,LTD.32Tel:[phone]长期保存试纸失活加速稳定实验的设计与操作TomBacon,GeneCo.,LTD.33Tel:[phone]实验研究的时间安排上游抗原抗体的制备中游材料选择比较(包括上游产品和其他原料)下游成品调试工作接口的设计Deadline的制定关键步骤:原料效价\标记\选膜\点样\调试TomBacon,GeneCo.,LTD.34Tel:[phone]学术论文的构成一般情况综述抗体制备实验材料的选择化学物质的组合调试与其他方法检测结果比较建议对标记技术的探索结果检测方式的探索TomBacon,GeneCo.,LTD.35Tel:[phone]Manufacture生产TomBacon,GeneCo.,LTD.36Tel:[phone]研发到生产的连接问题实验室工艺到生产的转化要点TomBacon,GeneCo.,LTD.37Tel:[phone]生产流程表TomBacon,GeneCo.,LTD.38Tel:[phone]人生产瓶颈:装条\包装技术人员架构TomBacon,GeneCo.,LTD.39Tel:[phone]机—仪器设备层析柱离心机,磁力搅拌器,移液枪,加热仪器BIODOT喷点\切条仪器(生产设计)封口\大包TomBacon,GeneCo.,LTD.40Tel:[phone]料来源\批检半成品库的设计TomBacon,GeneCo.,LTD.41Tel:[phone]SOP操作批号制度TomBacon,GeneCo.,LTD.42Tel:[phone]工作环境生产区的建设人流,物流半成品库流转的重要性功能房间的构成与设计配液\喷点\干燥\贴膜\切条\包装清洁度,湿度温度控制TomBacon,GeneCo.,LTD.43Tel:[phone]QA设计QC控制点的设计检测手段问题TomBacon,GeneCo.,LTD.44Tel:[phone]Developing发展方向TomBacon,GeneCo.,LTD.45Tel:[phone]标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记免疫反应信号转化为电子信号模式TomBacon,GeneCo.,LTD.46Tel:[phone]新的层析模式TomBacon,GeneCo.,LTD.47Tel:[phone]Thanks!Contactwithme:TomBacon(杨斌)Tel:[phone]Fax:[phone]Mobile:[phone]Email:[e-mail]