兽医临床诊断学实验教学大纲

《兽医临床诊断学》实验教学大纲1.课程属性：必修2.实验属性：非独立设课3.学时：总学时40，理论学时20，实验学时20。4.实验应开学期：第6学期5.先修课程：家畜解剖与组织胚胎学、家畜生理学、家畜病理学、动物生物化学等一、课程的性质与任务兽医临床诊断学实验课是在学习临床诊断理论课的基础上进行的一个实践性环节，本课程的教学任务是让学生运用已学过的理论知识进行验证性的实验，加深对临床诊断理论课程中基本理论知识的理解，实地训练学生理论知识的运用能力、实验操作技能、诊断仪器的使用能力、实验资料或数据的处理和分析能力。二、实验目的与基本要求本实验课配合理论教学，通过实验从实践中进一步学习，掌握和运用学过的临床检查方法及症状鉴别诊断知识，初步具备对畜禽的群发病和多发病进行诊断、采取综合措施的能力。学生必须完成的基本要求：实验准备；能利用各种检查方法熟练对动物各系统进行检查；能熟练对血、粪及尿进行常规检查；能利用各种治疗方法对动物进行治疗；整理及分析实验资料或数据；写出实验报告。三、实验考核方式及方法考核方式：考查；实验成绩评分办法或标准：出勤、课堂纪律、动手能力和实验报告等。四、实验项目一览表兽医临床诊断学实验项目一览表序号实验项目名称实验类型实验要求适用专业学时１２３４５６７８９１０临床常见的几种诊疗器械超声诊断（一）超声诊断（二）粪便的检验（一）粪便的检验（二）血液检查（一）血液检查（二）血液检查（三）尿液的检验（一）尿液的检验（二）验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性验证性必做必做必做必做必做必做必做必做必做必做动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学动物医学２２２２２２２２２２五、实验项目的具体内容实习一临床常见的几种诊疗器械１、本次实验的目的和要求认识几种诊疗器械并了解其在临床上的用途；掌握操作中的注意事项；２、实验内容或原理乳导管、穿刺针、三棱针、三用套管针、听诊器、叩诊器、阴道扩张器及电池式照明器、胃导管及漏斗、灌药瓶、耳夹子、金属注射器（拆卸、消毒与安装）、连续注射器、血球分类记数仪３、需用的仪器和试剂无４、实验步骤无５、教学方式讲授及示范为主６、考核要求以出勤、听课表现、动手能力、实验报告等为主要考核内容。７、实验报告要求写实验报告。（一）１、本次实验的目的和要求了解B型超声诊断仪的简单结构、检查原理、动物体的声学特性、操作要领及探测扫描方法、注意事项。２、实验内容或原理简要结构：仪器主体及各功能按钮、探头、附属装置。超声检查的原理：当探头的声源晶片振动发生超声波时，声波在介质中以直线的方式传播，如遇到声阻抗不同的界面时就出现反射，反射的回声可被接受返回探头而在示波屏显示。动物体的声学特性：液性暗区，如液体组织；全反射（强回声），如含气组织、骨骼、结石；实质性暗区，如实质性脏器、肿瘤。３、实验动物、器材及试剂实验动物：犬实验器材：B型超声诊断仪，毛剪、医用耦合剂。４、实验步骤：连接电源→连接探头→检查各功能旋钮→动物准备→涂耦合剂→探测扫描５、教学方式教师讲授并示范，然后学生自己实践。６、考核要求以出勤、动手能力、实验报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、操作步骤、检查器官的回声图象及分析、注意事项等。实验三（二）１、本次实验的目的和要求了解超声波多普勒胎音仪的简单结构、检查原理、操作要领、用途及注意事项。２、实验内容或原理简要结构：仪器面板及各功能按钮、探头。超声检查的原理：多普勒效应原理用途：探测胎心音、孕畜母体子宫血音。５、实验动物、器材及试剂实验动物：犬实验器材：超声多普勒胎音仪、毛剪、医用耦合剂。６、实验步骤：接通电源→用手指轻轻摩擦探头，扬声器即发出沙沙声，表示仪器正常，同时调节音量大小→动物准备→涂耦合剂→探测扫描５、教学方式教师讲授并示范，然后学生自己实践。６、考核要求以出勤、动手能力、实验报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、操作步骤、检查器官的回声图象及分析、注意事项等。实习四粪便检验（一）1、本次实验的目的和要求：掌握粪便中食物残渣检查的方法、临床诊断意义。2、实验内容及原理：正常粪便中的食物残渣呈无定形细小颗粒，消化不良时可见食物残渣。且易被染液着色而容易辨认。3、实验仪器及试剂稀碘液、70%的乙醇饱和苏丹Ⅲ染液、10%乙酸、载玻片等4、实验步骤淀粉颗粒的检查：用竹镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂片，滴1-2滴稀碘液，加盖玻片后镜检。脂肪滴的检查：用竹镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂片，滴1-2滴70%的乙醇饱和苏丹Ⅲ染液，加盖玻片后镜检。肌肉纤维的检查：用竹镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂片，滴1-2滴10%乙酸，加盖玻片后镜检。５、教学方式学生为主，教师辅助６、考核要求以出勤、动手能力、实验数据及分析报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、步骤、测定结果与分析、注意事项等。实习五粪便检验（二）1、本次实验的目的和要求：掌握粪便潜血、粪胆素原检查的方法、临床诊断意义。2、实验内容及原理（1）粪便潜血检验：粪便中的血红蛋白或红细胞被酸破坏所产生的血红蛋白，有过氧化氢酶的作用（但并非为酶，因为被煮沸后仍有触媒作用），它可以分解过氧化氢而产生新生态氧，使联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝。（2）粪胆素原的检查：粪便中的粪胆素原与汞发生化学反应，形成红色化合物。3、实验仪器及试剂（1）粪便潜血检验：联苯胺冰醋酸液、30%过氧化氢溶液、载玻片、镊子、酒精灯等（2）粪胆素的检查：饱和氯化高汞溶液、白瓷皿、电炉等4、实验步骤（1）粪便潜血检验：用竹镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂片；将玻片在酒精灯上缓缓通过数次，以破坏粪中的过氧化氢酶；冷后，滴加联苯胺冰醋酸液10～20滴及新鲜30％过氧化氢溶液10～20滴，用火柴棒搅动混合，将玻片置于白色背景上观察；根据颜色深浅及出现的时间用“±”或1～3个“十”符号表示结果。（2）粪胆素原的检查：取白瓷皿用竹签挑取一块黄豆大小的粪便。加饱和氯化高汞溶液4ml放人白瓷皿中，与粪便调匀。煮沸3min，立即观察颜色反应，若试验结果为红色，即表明粪便中有粪胆素。５、教学方式学生为主，教师辅助６、考核要求以出勤、动手能力、实验数据及分析报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、步骤、测定结果与分析、注意事项等。实验六血液检验（一）１、本次实验的目的和要求：要求基本掌握血清中总钙的测定方法、步骤及其临床意义；掌握micro-300半自动生化仪的使用方法。２、实验内容或原理乙二胺四乙酸二钠滴定法：血清钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合，成为可溶性的复合物，使溶液呈淡红色。乙二胺四乙酸二钠(EDTANa2)对钙离子有更大的亲和力，能与复合物中的钙离子络合，使钙红指示剂重新游离至碱性溶液中，使溶液变成兰色。从EDTANa2滴定用量可以计算出血清钙的含量。邻甲酚酞络合酮比色法：在碱性条件下，样品中钙离子与邻甲酚酞络合酮生成红色络合物。３、实验器材及试剂乙二胺四乙酸二钠滴定法：滴定管及滴定架；钙标准液(2.5mmol／L)；钙红指示剂；0.25mol／L氢氧化钾溶；EDTANa2溶液。邻甲酚酞络合酮比色法：micro-300半自动生化仪，恒温水浴锅，小塑料试管，可调微量移液器及嘴头；钙试剂盒。4、实验步骤乙二胺四乙酸二钠滴定法：（1）取试管2支，写明测定管和标准管，于测定管中加入血清0.2ml，标准管中加钙标准液0.2ml。（2）各管加入0.25mol／L氢氧化钾溶液2ml，钙红指示剂2滴，混匀，溶液呈淡红色（3）迅速以EDTANa2滴定至溶液呈淡蓝色为终点，记录各管EDTANa2用量。（4）计算血清钙（mmol／L）﹦测定管EDTANa2消耗量（ml）÷标准管EDTANa2消耗量（ml）×2.5血清钙(mg／d1)﹦血清钙(mmol／L)÷0.25邻甲酚酞络合酮比色法：（1）配制工作液，并保温至测试温度。（2）按下表进行操作空白管标准管样品管工作液1.0ml1.0ml1.0ml蒸馏水0.02ml标准0.02ml样品0.02ml（3）分别混合均匀，在测定温度保温5min，用micro-300半自动生化仪分别测定并读数。５、教学方式学生为主，教师辅助６、考核要求以出勤、动手能力、实验数据及分析报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、步骤、测定结果与分析、注意事项等。实验七血液检验（二）1、本次实验的目的和要求：初步掌握血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定的实验条件、方法和步骤；了解本次所测定血清酶的临床意义；掌握micro-300半自动生化仪的使用方法。２、实验内容或原理ALT：L—丙氨酸＋a—酮戊二酸ALT丙酮酸＋L—谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H+LDHL—乳酸＋NAD+＋H２OAST：L—天门冬氨酸＋a—酮戊二酸AST草酰乙酸＋L—谷氨酸草酰乙酸＋NADH＋H+MDHL—苹果酸＋NAD+＋H２O３、实验器材和试剂动力法或速率法：micro-300半自动生化仪，小塑料试管，可调微量移液器及嘴头，丙氨酸氨基转移酶试剂盒，天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒；。４、实验步骤：（１）配制工作液，并预先保温至测试温度。（２）按下表操作空白管样品管工作液１.00ml1.00ml蒸馏水0.10ml样品0.10ml混合均匀，分别测定并读数。５、教学方式学生为主，教师辅助６、考核要求以出勤、动手能力、实验数据及分析报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、步骤、测定结果与分析、注意事项等。实习八血液常规检验（三）１、本次实验的目的要求掌握血涂片的制作方法、染色技术、白细胞分类计数法。要求能制出合格的血涂片并能够认识各类白细胞。２、实验内容或原理白细胞分类记数法是将血液制成分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色，根据各类白细胞着色特征予以分类记数，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。３、实验动物、仪器及试剂实验动物：马、牛、猪、羊，犬（任选用一种）实验器材：采血针、酒精棉、载玻片、染色盆及支架、染色缸、洗瓶、显微镜、镜油、实验试剂：４、实验步骤采血，涂片，染色，分类计数。５、教学方式学生为主，教师辅助６、考核要求以出勤、动手能力、实验报告等为主要考核内容。７、实验报告要求划出各种白细胞的形态特征，记数各种白细胞的百分比，并结合该动物的正常值对所得实验数据进行分析讨论。实验九尿液检验（一）1、本次实验的目的和要求掌握尿液中葡萄糖检验的方法及其临床诊断意义。2、实验内容或原理尿中葡萄糖的检验：葡萄糖含有醛基，在热碱性溶液中，能将硫酸铜还原成黄色的氧化铜或黄红色的氧化亚铜。3、实验仪器及试剂班（Benedict）氏试剂（先将173.0g枸橼酸钠及100.0g无水碳酸钠溶解于700ml蒸馏水中，可加热促其溶解。另将17.3g硫酸铜溶解于100ml蒸馏水中，然后将硫酸铜液慢慢倾入已冷却的上液内，并加蒸馏水至1000ml，过滤保存于棕色瓶内备用）。4、实验步骤取班氏试剂5ml置于试管中，加尿液0.5ml（约10滴）充分混合，加热煮沸1～2min，静置5min后观察结果。判断：管底出现黄色或黄红色沉淀者为阳性反应。黄色或黄红色的沉淀愈多，表示尿中葡萄糖含量愈高。５、教学方式学生为主，教师辅助６、考核要求以出勤、动手能力、实验数据及分析报告等为主要考核内容。７、实验报告要求应包括：实验原理、步骤、实验结果与分析、注意事项等。实验十尿液检验（二）1、本次实验的目的和要求掌握尿液中酮体检验的方法及其临床诊断意义。2、实验内容或原理尿中酮体的检验：酮体在碱性溶液中与亚硝基铁氰化钠作用可产生紫红色的亚铁五氰化铁，这种产物在醋酸溶液内不但不褪色，反而颜色会加深。3、实验仪器及试剂5％亚硝基铁氰化钠溶液（此液应新配制，贮于棕色瓶中可保存一周）；10％氢氧化钠溶液；204、实验步骤取中试管