口蹄疫诊断和防控技术

口蹄疫诊断和防控技术钟映梅黑龙江省动物卫生监督所二O一O年六月口蹄疫概况口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疫病。侵染对象是猪、牛、羊等主要畜种及其它家养和野生偶蹄动物，易感动物多达70余种。国际动物卫生组织(OIE)将FMD列在15个A类动物疫病名单之首。我国将FMD排在14个一类动物传染病的第一位。当前疫情形势国际：韩国连续发生多起口蹄疫疫情，涉及奶牛、羊、猪。日本宫崎县牛场发生口蹄疫疫情。越南、台湾、香港、缅甸均有疫情发生。国内：全国多个省区发生口蹄疫疫情（18起为缅甸98谱系O型口蹄疫）。疫情发生的基本原因1、对猪的致病力强，传播速度快，群体发病率较高。2、检疫监管不到位，使疫情扩大。3、防控工作存在薄弱环节。4、环境条件差，消毒不到位。口蹄疫病毒粒子三维结构口蹄疫病毒X—射线晶体衍射结构图临床症状主要是口、鼻、蹄、乳头等部位出现水泡。发泡初期，牛有流涎症状，猪、羊表现跛行。羊羊的潜伏期为2—8天。症状轻微，不易被察觉。口腔粘膜、舌上时有水泡，但较小，有米粒至豆粒大小。蹄部病变和牛相似，发生水泡时表现跛行。口蹄疫病料采集运送检验样品：水泡皮（液）、O/P液、血液样品水泡皮采集：选采新鲜、成熟、未破裂或刚破不久的水泡皮，陈旧、结痂或腐败变质的残破水泡皮不好用，甚至不能用。牛样应采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破溃或刚破溃时，牛的口中少量流涎或不流涎，这是采集病料的最佳时机。猪样应采取蹄叉部、蹄冠部或鼻镜部的水泡皮，不要采取蹄踵部角质化表皮。羊的水泡材料较难采集，水泡通常小而分散，需要仔细寻找。采取水泡皮时应尽量保持无菌，用消毒剪子剪下水泡皮后，置入无菌小瓶中，加入由等量甘油和0.04mol／L磷酸盐缓冲液(PH7.2～7.6)配制成的运输液中，可加入适量抗生素。加盖及用胶带封口，帖上标签，-20℃下保存。水泡皮样品每份至少1-2g。水泡液采集：用消毒过的注射器从未破溃水泡中吸出水泡液，水泡液应清亮透明，装入灭菌瓶中，(可加入适量的抗生素，如青霉素1000IU／ml，链霉素1mg／m1)，加盖后用胶带封口，贴上标签，冷藏保存。O/P液的采集O/P液是动物食道/咽部刮取的粘膜样品。用于查明牛、羊等反刍动物感染FMD及持续带毒状况。注意事项1.采样前禁食12小时（可饮水）。2.食道探杯使用前用2%NaOH溶液浸泡消毒3-5分钟，再用清水冲洗后使用。3.采到的样品应立即冷冻保存。•样品保存液在0.04mol/LPBS缓冲液中按每升加1%酚红2ml样品保存液PH值一定要在7.2—7.6之间。•采集过程•O/P液与样品保存液混合后变色血清样品无菌采取动物血液10-15ml，分离血清(每头动物不少于2m1)，分装入两个灭菌的离心管里。加盖、封口并贴上标签，编号，置于4℃保存或冻结保存，但不能反复冻融，否则抗体效价下降。包装：与水泡皮／水泡液样品的方法相同。诊断方法及免疫监测口蹄疫的实验室诊断主要是病原学诊断和抗体检测两个方面。病原学检测方法包括：1、补体结合试验2、RT-PCR试验3、反向间接血凝试验4、间接夹心ELISA抗体检测方法包括：1、病毒中和试验2、正向间接血凝试验3、酶联免疫吸附试验(ELISA)(1)液相阻断LB-ELISA：用于检测动物血清的抗体(2)非结构蛋白抗体间接ELISA：鉴别诊断感染动物与注苗动物4、VIA抗原琼脂扩散试验5、免疫胶体金试验应急响应临时处置在疑似疫情报告同时，对发病场（户）实施隔离、监控，禁止家畜及畜产品、饲料及有关物品移动，进行严格消毒。对可能存在的传染源，以及在疫情潜伏期和发病期间售出的动物及其产品、对被污染或可疑污染物(包括粪便、垫料、饲料)，立即开展追踪调查，并按规定进行彻底消毒等无害化处理。必要时采取封锁、扑杀等措施。由疫区边缘向外延伸10公里疫区受威胁区疫点向外延伸3公里应考虑：天然屏障（如河流、山脉等）、人工屏障（道路、围栏等）、野生动物栖息地存在情况，以及疫情溯源及跟踪调查结果。欧盟：疫区3公里、受威胁区≥10公里危险接触场1.扑杀并销毁所有染疫动物，无害化处理；2.对排泄物、被污染或可能污染饲料和垫料、污水等按规定进行无害化处理；3.被污染的物品、交通工具、用具、圈舍、场地进行严格彻底消毒。出入人员、车辆和相关设施要按规定进行消毒。4.禁止易感动物及其产品出入。疫点内应采取的措施疫区内应采取的措施1.在疫区周围设立警示标志，在出入疫区的交通路口设置临时动物检疫消毒站，执行监督检查任务，对出入的人员和车辆进行消毒。2.扑杀疫区内所有易感动物，并按国家规定标准进行无害化处理。采取措施禁止易感动物及其产品出入。3.关闭动物交易市场。4.对圈舍、用具及场地消毒。受威胁区应采取的措施1.加强检疫监管，禁止易感动物出入，相关制品调运必须进行严格检疫。2.加强对养殖场、屠宰场、交易市场的监测，及时掌握疫情动态。3.及时接种疫苗：牛羊注射口蹄疫O型-亚I型双价疫苗，奶牛还需注射口蹄疫A型疫苗，猪注射猪乙型（Ｏ型）口蹄疫疫苗。口蹄疫防控措施和策略5种措施：①免疫接种；②疫情监测报告；③应急处置④流通环节的检疫监管；⑤严格和强化动物卫生措施3个策略：扑灭根除策略；免疫控制策略；预防策略。