实验六尿生成影响因素

实验安排实验一：熟悉使用仪器（BL-420记录系统）坐骨神经-腓肠神经标本制备实验二：神经干动作电位阈强度测定神经干动作电位传导速度测定实验三：蛙心起搏点的确定期前收缩与代偿间歇实验四：兔呼吸运动的调节实验五：动脉血压的调节实验六：影响尿生成的因素实验六尿生成的影响因素（Factorsaffectingurineformation）朱文博中山医学院实验目的(Objectives)1.掌握输尿管插管技术，学习尿量的记录和测量方法；2.观察神经体液因素对尿生成的影响。泌尿系统※排出代谢废物及过剩物质和异物※调节水电解质平衡※调节酸碱平衡※调节体液渗透压和体液量肾的功能解剖近端小管远端小管髓袢你知道尿生成学说吗?※尿生成的三个环节（1）肾小球滤过-有效滤过压：肾小球毛细血管血压、肾小囊胶体渗透压肾小囊静水压、肾小球毛细血管胶体渗透压（2）肾小管和集合管重吸收：选择性、有限性（3）肾小管和集合管分泌Na+、Cl-、H2O、G、aaH+、K+、NH3有效滤过压＝毛细血管压－胶体渗透压－囊内压。尿生成的原理：终尿生成＝滤过液（原尿）－重吸收量＋分泌（比较少，可不考虑）凡能影响上述过程的因素都可影响尿的生成，从而引起尿量的改变。-自身调节：渗透性利尿；球管平衡-神经调节:肾交感神经-体液调节：肾素-血管紧张素-醛固酮;抗利尿激素(ADH)材料与方法(materialsandmethods):实验对象：体重2～3kg家兔(rabbit)，雌雄不拘。实验器材和药品：20%乌来糖（乌拉坦）、生理盐水、20％葡萄糖、0.1g/L去甲肾上腺素、10g/L速尿、1000U/L垂体后叶素（含有抗利尿激素）实验设备：BL-420F生物信号采集处理系统、压力换能器步骤（procedure）(1)家兔常规称重、麻醉（耳缘静脉注射给药，20%乌拉坦5ml/kg）、固定(2)颈部手术：-右侧迷走神经，穿线备用-左侧颈静脉插管，建立静脉通道，给予连续输液，以保证实验时维持尿量，同时方便静脉给药！！(3)腹部手术：输尿管插管－耻骨联合向上沿正中线作4cm皮肤切口－辨认膀胱三角及输尿管，穿线备用－输尿管插管（预先充满生理盐水，注意插向肾脏）注意事项：用湿生理盐水的纱布衬垫后，将膀胱翻至体外（勿使肠段外露，以免血压下降）。勿过度牵拉，防止输尿管挛缩勿莫损伤伴行血管勿插入粘膜层及防止出血避免插管扭曲观察项目：1.记录正常尿量曲线；2.快速注射37℃生理盐水20ml；3.刺激右侧迷走神经。用保护电极以中等强度和频率的连续脉冲（用强度5V、频率20Hz、波宽2ms的连续电脉冲刺激）刺激迷走神经，使血压下降，维持5～10秒，观察尿量变化；4.取尿液进行尿糖定性试验，然后快速静脉注射20％葡萄糖5ml，观察尿量变化。待尿量变化明显后，再取尿液作尿糖定性试验；5.静脉注射1：10000去甲肾上腺素0.3~0.4ml；6.静脉注射呋塞米（速尿）1ml；7.静脉注射垂体后叶素（含抗利尿激素ADH）2单位。•尿糖定性实验：班氏试剂1ml+2d尿液观察颜色变化（－）：无糖（+）：绿色，尿糖0.3-0.5g%（＋＋）：黄绿色，尿糖0.5-1.0g%（＋＋＋）：橘黄色,尿糖1.0-2.0g%（＋＋＋＋）：砖红色，尿糖2.0g%以上一次快速注射20ml生理盐水，使血容量增加了15%，会引起下列情况：（1）血液被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，肾小球有效滤过率增加，尿量增加。（2）血容量增加，肾小球血浆流量增加，使尿液滤过增多，也促使尿液增加。（3）血容量增加，刺激左心房及胸腔大静脉容量感受器，冲动沿迷走神经上传到下丘脑的视上核和室旁核，使抗利尿激素（ADH）的分泌与释放减少，远曲小管，集合管对水的重吸收减少，尿液增多。实验结果预测：刺激迷走神经，尿量大大减少，甚至可出现暂时无尿。（1）其末梢释放乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体向结合，改变离子通道的通透性和心肌动作电位，使心脏活动受抑制，出现负性变时，变力，变传导效应，使心输出量减少，血压下降，肾小球毛细血管压降低，有效滤过压减少，尿液滤过减少，尿生成减少。当毛细血管压接近或等于血浆胶体渗透压与囊内压之和时，可使有效滤过压为0，暂时无尿。（2）血压下降还可以反射性地引起交感神经兴奋，导致入球小动脉收缩，使尿量进一步减少。•葡萄糖3ml注入后，可见尿量立即大量增加，因为加入后肾中滤过的葡萄糖超过了肾的肾糖阈，经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收，致使小管液中出现较多的葡萄糖，使肾小管液中的渗透压增加，防碍水的重吸收，于是水随葡萄糖一起排出，尿量增加。此称为渗透性利尿。此时尿液作生化实验，可检测出尿糖。静注大剂量去甲肾上腺素后，血压上升（使与外周小动脉平滑肌中的α受体相结合，使之收缩），尿量减少机制：①肾小球毛细血管血压高低既受全身动脉血压的影响，又受肾小球入球小动脉和出球小动脉的口径比例（也就是血管平滑肌舒缩程度）的影响，而后一种因素比前一种因素更为重要。去甲肾上腺素可使入球小动脉收缩甚于出球小动脉，使肾小球毛细血管中血流量降低，GFR减少，尿量减少。②近球细胞β1受体→肾素释放↑→肾素-血管紧张素-醛固酮系统↑→肾小管/集合管对水和钠重吸收↑→尿量↓因此在临床上抢救休克病人，使用大剂量的去甲肾上腺素时一定要注意患者尿量的变化。速尿作用机理：它与髓袢升支粗段管腔膜载体上的Cl的结合位点发生竞争性的结合，阻碍Cl与载体结合，从而控制NaCl的重吸收，使肾髓质高渗梯度降低，而肾小管液中渗透压增高，使得尿液浓缩作用减弱，肾小管对水的重吸收大大减少，利尿。生化检验尿中的NaCl含量明显增多。ADH与远曲后段，集合管上皮上的受体结合后，可以使其对水的通透性增高，也就是“水通道开放”，使得重吸收水增多，尿量减少。结果（Result）：1正常家兔尿量为滴，快速静脉注射20ml生理盐水后家兔尿量为滴；2……表不同因素对家兔尿液生成的影响实验项目尿量（滴/分钟）处理前处理后生理盐水刺激迷走神经葡萄糖去甲肾上腺素速尿垂体后叶素注意：1、小量注射某种药物后，应紧接着注射1～2ml生理盐水，使药物及时进入血液循环;2、输尿管插管操作轻柔，避免损伤性闭尿；避免插入输尿管壁内;3、警惕动物麻醉过度.※结果解释（1）IV生理盐水20ml：①血浆稀释→血浆胶体渗透压↓→GFR↑→尿量↑②血量增加→肾血流量↓→尿量↑③血量增加→刺激心肺感受器→ADH释放↓→尿量↑（2）电刺激迷走神经外周端①对心脏的负性肌力、负性传导和负性变时作用→BP↓→肾小球毛细血管压↓→GFR↓→尿量↓②BP↓→压力感受器上传冲动↓→交感活性↑，ADH释放↑→尿量↓（3）IV20％葡萄糖5ml：渗透性利尿（4）去甲肾上腺素：①肾血管平滑肌α受体→肾血管收缩→肾血流量/毛细血管血压↓→GFR↓→尿量↓②近球细胞β受体→肾素释放↑→肾素-血管紧张素-醛固酮系统↑→肾小管/集合管对水和钠重吸收↑→尿量↓（5）速尿：抑制髓袢升支粗段Na+-K+-2Cl－同向转运→降低外髓肾小管内外渗透压梯度→水重吸收减少。（6）ADH：远曲小管和集合管上皮的V2型受体结合→增加管腔膜水通道数目→水重吸收增加