药物分析归纳-知识点

第1页药物分析归纳作者：张倩炎（福医大药学3班）第一章绪论及药典概况1、5P标准GLP——《药物非临床研究质量管理标准》GCP——《药物临床试验质量管理标准》GMP——《药品生产质量管理规范》GSP——《药品经营质量管理规范》GAP——《中药材生产质量管理规范》2、ChP组成药品=中药+化学药品+生物制品药典=凡例+索引+正文+附录3、溶解度等级（溶质1g在溶剂中的溶解度）1ml1~10ml10~30ml30~100ml100~1000ml1000~10000ml10000ml极易溶易溶溶解略溶微溶极微溶不溶4、贮藏条件遮光：容器不透光密闭：容器密闭，防止尘土进入密封：容器密封防止风化、吸潮、挥发熔封：防止空气和水分进入阴凉处：不超过20℃凉暗处：避光并不超过20℃冷出：2~10℃常温：10~30℃5、温度冷却至室温约0℃2~10℃10~30℃40~50℃70~80℃98~100℃放冷冰浴冷水室温温水热水水浴温度6、精确度精密称定：重量准确至千分之一称定：重量准确至百分之一精密量取：符合移液管的精度要求量取：符合量筒的量取要求“约”若干：不得超过规定量的10%7、比旋度的计算☆☆☆（见P33）[α]为比旋度；D为钠光谱的D线；l为测定管的长度，dm；α为测得的旋光度；d为液体的相对密度。第二章药物的鉴别试验1、性状鉴定性状：外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、吸光度）2、一般鉴别试验第2页有机氟化物：氧瓶燃烧法，加茜素氟蓝试液，显蓝紫色。水杨酸盐：加三氯化铁试液，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。酒石酸盐：加氨制硝酸银试液，水浴加热，试管壁成银镜。芳香第一胺：加稀盐酸和碱性β-萘酚试液，生成由橙黄至猩红色沉淀。托烷生物碱类：加发烟硝酸，水浴蒸干得黄色残渣，放冷加乙醇和氢氧化钠，显深紫色。金属盐：焰色反应，钠黄钾紫钙砖红。铵盐：加过量氢氧化钠，加热分解产生氨气，遇润水的红色石蕊试纸变蓝。氯化物：滴加硝酸银试液，生成白色沉淀，加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化，沉淀又生成。硫酸盐：加氯化钡试液，生成白色沉淀。硝酸盐：加等量的硫酸混合，冷却后加硫酸亚铁试液，溶液分层，界面层显棕色。3、化学鉴别法呈色反应、沉淀反应、荧光反应、气体生成反应、试剂褪色鉴别、测定生成物的熔点等等。4、光谱鉴别法紫外光谱：采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸收波长。红外光谱：适用于组分单一，结构明确的原料药，ChP采用标准图谱对照法，USP采用对照品法。原子吸收光谱：适用于金属元素。核磁共振：用于各种分子物理和化学结构的研究。质谱：广泛应用于药物的定性鉴别和定量测定。5、色谱鉴别法薄层色谱TLC鉴别法、高效液相色谱和气相色谱HPLC-MC鉴别法。6、其他鉴别法显微鉴别、生物学法、指纹图谱法。第三章药物的杂质检查1、杂质的来源生产过程：原料或辅料不纯、反应中间体、副产物；贮藏过程：在外界条件影响下发生水解、氧化、分解、异构、聚合、潮解、发霉等。2、杂质的分类一般杂质：自然界分布广泛，在药物生产贮藏过程中易引入的杂质。特殊杂质：特定药物生产贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。杂质限量L的计算☆☆☆（见P100）C为杂质标准液的浓度；V为体积；S为供试品杂质最大允许量。3、杂质的检查方法化学方法：显色法、沉淀法、生成气体法、滴定法。色谱方法：薄层色谱法（杂质对照品法、供试液自身稀释对照法、两者并用、对照药物法）第3页高效液相色谱法（外标法或对照品法、自身对照法、面积归一化法）气相色谱法（标准溶液加入法）、毛细管电泳法光谱方法：紫外分光光度法、红外分光光度法其他方法：热分析法、酸碱度检查法、物理性状检查法4、一般杂质的检查氯化物：在酸性条件下与硝酸银反应，生成白色沉淀。（注：加硝酸可避免弱酸银盐沉淀的干扰；供试品液如带颜色，可采用内消色法解决。）硫酸盐：在酸性条件下与氯化钡反应，生成白色沉淀。铁盐：在酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性配合物。（注：加过硫酸铵的目的是使Fe2+转换成Fe3+，酸性条件下反应可以防止Fe3+的水解。）重金属盐：硫代乙酰胺在酸性条件下水解产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的混悬液。或者在碱性溶液中以硫化钠为显色剂，与铅溶液生成硫化铅沉淀（如磺胺类、巴比妥类药物）。（注：该比色法用到3支比色管，分别为对照管、供试管、监控管。）砷盐：采用古蔡法或二乙基二硫代氨基甲酸银法检查。金属锌与酸作用生成氢气，与药物中的砷离子生成易挥发的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的深斑。后者的方法可产生红色胶态银。a.加入Zn的作用是产生H2；b.SnCl2与KI的作用是将As5+还原为As3+，I-与Zn2+的配位作用，还可抑制锑化氢的生成；c.醋酸铅棉花的作用是吸收H2S气体，起到过滤的作用。（注：Sb100ug时用古蔡法。）5、干燥湿重测定法作用：主要检查水分及其他挥发性物质。方法：常压恒温干燥法、减压干燥法与恒温减压干燥法、干燥剂干燥法。6、水分测定法方法：费休氏法（原理：碘氧化二氧化硫时消耗水）、甲苯法。7、炽灼残渣检查法作用：检测有机药物经碳化后无机盐和金属氧化物。8、易碳化物检查法方法：目视比色法。（加入硫酸使之呈色。）9、残留溶剂测定法按有机溶剂毒性的程度分为四类：第一类（避免使用）：苯、CCl4等第二类（限制使用）：CHCl3、环己烷等第三类（控制使用）：乙醇、乙醚、乙酸乙酯等第四类（无限制）：三氯乙酸、石油醚等方法：GC法。（毛细管柱顶空进样等温法/程序升温法、溶液直接进样法）10、溶液澄清度检查法方法：比浊法。*扩展酸碱滴定法、沉淀滴定法、吸附法滴定方法被滴定样品滴定液介质/条件指示剂显色第4页直接碘量法维生素C、二巯丙醇碘液水/不限淀粉或碘无色→蓝色剩余碘量法葡萄糖、咖啡因碘、硫代硫酸钠水/酸性淀粉（近终）蓝色→无色铈量法硫酸亚铁片硫酸铈水/酸性邻二氮菲深红→淡蓝亚硝酸钠法芳伯胺类亚硝酸钠水/酸性永停或KI-淀粉—非水碱量法弱碱高氯酸/冰醋酸—结晶紫蓝色/蓝绿色非水酸量法弱酸甲醇钠乙二胺或DMF溴麝香草酚蓝—铬酸钾指示剂法氯化物或溴化物硝酸银水/中性铬酸钾砖红色沉淀银量法Ag+离子硫氰胺水/酸性硫酸铁铵红色吸附剂指示法卤素硝酸银水/酸性荧光黄-Cl-、曙红-Br-第四章药物的含量测定方法与验证1、前提方法要求：操作简便、结果准确、重现性好。验证内容：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、耐用性等。2、定量分析法分类：容量分析法（滴定法）、光谱分析法、色谱分析法。1）容量分析法特点：简便易行、耐用性高、结果准确、专属性差。分类：直接滴定法、间接滴定法（生成物滴定法和剩余量滴定法）。滴定度的计算☆☆☆（见P145）T为滴定度，mg/ml；m为滴定液的摩尔浓度；a/b为被测药物/滴定剂的摩尔数；M为被测药物的摩尔质量。含量的计算☆☆☆（见P146）V为滴定体积；T为滴定度；F为校正因子；W为供试品的称取量。2）光谱分析法朗伯比尔定律：A=Ecl（E为百分吸收系数，即每100ml待测药物的吸光度值，c的单位g/100ml）测定方法：对照品比较法、吸收系数法、分光光度法、比色法。标示量的计算☆☆☆（见P149）Cx为供试品溶液的浓度；D为稀释体积；W为平均片重/装量；W为供试品取样量；B为标示量。3）色谱分析法测定法：外标法（标准曲线法）、内标法（标准加入法）。系统适用性实验指标：理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子。气相色谱测定：外标法、内标法、标准溶液加入法。3、样品的前处理酸水解法：用于水难溶的含金属有机药物。碱水解法：用于含卤素的有机药物。还原法：用于含碘的有机药物。凯氏定氮法：将含N药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物结构被氧化分解成CO2和H2O，有机N变为无机氨，第5页并于过量的硫酸结合，经氢氧化钠碱化后释放出NH3，经硼酸溶液吸收后，用酸碱滴定。第五章略第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析1、性质用途：抑制前列腺素合成，抗炎抗风湿、止痛退热和抗凝血等作用。结构特征：苯环、游离羧基。典型药物：阿司匹林、双水杨酯、甲芬那酸、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、吡罗昔康、扑热息痛。理化性质：酸性（羧基，含氢键吸电子给电子）、水解性（酯键、酰胺键）、紫外/红外特性。2、鉴别实验1）三氯化铁反应水杨酸反应：水杨酸加三氯化铁试液，生成紫堇色配位化合物。酚羟基反应：对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液，显蓝紫色。2）缩合反应酮洛芬（二苯甲酮）：酸性条件下与二硝基苯肼缩合，生成橙色偶氮化合物。3）重氮化-偶合反应芳伯氨基：在稀盐酸加热条件下，与亚硝酸钠试液反应，再与碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。4）氧化反应甲芬那酸：溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色。吲哚美辛：在硫酸存在下，与重铬酸钾共热，应显紫色；在盐酸中与亚硝酸钠反应显绿色，渐变黄色。5）水解反应阿司匹林与Na2CO3试液加热水解后，加过量稀硫酸酸化，生成白色沉淀，并产生醋酸臭气。6）光谱法（略）、7）色谱法（略）。3、特殊杂质及检查1）阿司匹林中游离水杨酸的检查检测方法：稀硫酸铁铵溶液显色反应。注：药典采用1%冰醋酸溶液制备供试品溶液，以防阿司匹林水解，同时采用HPLC检查，C18作填充剂。有关物质：除游离水杨酸外的合成原料（苯酚）及其他合成副产物，如醋酸苯酯、水杨酸苯酯、水杨酸苷、水杨酰水杨酸、乙酰水杨酸苯酯等。注：除水杨酸峰外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积。4、含量测定a.直接滴定法：药物溶于中性乙醇，以酚酞为指示剂，用NaOH滴定液直接滴定。b.剩余量滴定法：用定量过量的NaOH滴定液溶解后，用盐酸滴定液回滴定剩余的NaOH滴定液。c.水解后剩余量滴定法：加入定量过量的NaOH，加热使酯键水解后，再用硫酸回滴剩余的NaOH滴定。d.两步滴定法：第一步中和制剂中酸性水解产物及稳定剂，以消除干扰；第二步为水解后剩余量滴定。（注：阿司匹林原料药采用酸碱滴定法，而阿司匹林片剂采用两步滴定法。）e.非水溶液滴定法：吡罗昔康具有吡啶环，显碱性，可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定。第6页第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析1、性质用途：收缩血管、升血压、散瞳、舒张支气管、迟缓胃肠肌、加速心率、加强心肌收缩等作用。结构：邻苯二酚、苯乙胺（3个取代基团）。典型药物：肾上腺素、异丙R、重酒石酸去甲R、盐酸去氧R、盐酸多巴胺、盐酸甲氧明、麻黄碱等。理化性质：酚羟基特性、弱碱性（NH2）、旋光性、紫外吸收特性。2、鉴别试验a.三氯化铁反应：酚羟基与Fe3+配位显绿色；在碱性条件为紫红色。b.甲醛-硫酸反应：肾上腺素显红色，异丙显暗紫色，重酒石酸显淡红色。c.还原反应：略。d.氨基醇的双缩脲反应：（鉴别盐酸麻黄碱）加CuSO4与NaOH即显蓝紫色；加乙醚后分层，乙醚层显紫红色，水层显蓝色。e.脂肪伯胺的rimini试验：略。3、特殊杂质与检查项目：酮体杂质（紫外分光法）、光学纯度ee（色谱法和电泳法）、有关物质（TLC——盐酸去氧肾素；纸色谱——盐酸苯乙酸胍；HPLC——其他药物）。4、含量测定1）非水溶液滴定法对象：有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐及金属盐类药物。非水溶剂种类：酸性R如冰醋酸；碱性R如二甲基甲酰胺；两性R如甲醇；惰性R如甲苯、三氯甲烷。基本原理：强酸置换出与弱碱结合的弱酸，即BH+A-+HClO4→BH+ClO4-+HA。（注：有机弱碱的盐均用高氯酸滴定。）（注：加入定量的醋酸汞-冰醋酸溶液的目的是消除氢卤酸对滴定的干扰。）终点指示：常用电位法和指示剂法。指示剂为结晶紫，酸式色为黄色，碱式色为紫色。2）溴量法对象：盐酸去氧肾素、重酒石酸间羟胺原料药《药典ChP2010》原理：苯酚结构在酸性条件下与溴定量发生反应，再以碘量法滴定剩余的溴。3）亚硝酸钠法方法：芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，用永停法指示终点。4）紫外分光法与比色法（略）5）高效液相色谱法（略）第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药的分析1、性质用途：局部可逆性地阻断神经冲动发生与传导。结构：亲脂性芳香环、中间连接功能基（酯键-对氨基R；酰胺键-酰苯胺R）、亲水