PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液------------0

PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等，其pH应在7.25～7.35之间，否则需要调整。0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。一般情况下，0.2mol/lPB的pH值稍高些，稀释成0.01mol/L的PBS时，常可达到要求的pH值，若需调整pH，通常也是调PB的pH。配制方法为：1．0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液（PhosphateBuffer,PB）试剂：NaH2PO4•2H2ONa2HPO4•12H2O配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。（1）0.2mol/L的NaH2PO4；称取NaH2PO4.12H2O31.2g(或NaH2PO4•H2O27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。（2）0.2mol/L的Na2HPO4：称取Na2HPO4.•12H2O哦71.632g（或Na2HPO4•7H2O53.6g或Na2HPO4•2H2O35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。（3）0.2mol/LpH7.4的PB的配制：取19ml0.2mol/L的NaH2PO4和81ml0.2mol/L的Na2HPO4•12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。2．0.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水（PhosphateBufferedSaline,PBS）试剂：0.2mol/LPB50mlNaCl8.5～9g(约0.15mol/L)重蒸水至1000ml配制方法：称取NaCl8.5～9g及0.2mol/L的PB50ml，加入1000ml的容量瓶中，最后加重蒸水至1000ml，充分摇匀即可。若拟配制0.02mol/L的PBS，则PB量加倍即可，依此类推7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）pH0.2mol/LNa2HPO4(毫升)0.2mol/LNaH2PO4(毫升)pH0.2mol/LNa2HPO4(毫升)0.2mol/LNaH2PO4(毫升)5.85.96.06.16.26.36.46.56.66.76.86.98.010.012.315.018.522.526.531.537.543.549.555.092.090.087.785.081.577.573.568.562.556.551.045.07.07.17.27.37.47.57.67.77.87.98.061.067.072.077.081.084.087.089.591.593.094.739.033.028.023.019.016.013.010.58.57.05.3Na2HPO4·2H2O分子量=180.05，0.2mol/L溶液为85.61克/升。Na2HPO4·12H2O分子量=360.22，0.2mol/L溶液为71.64克/升。Na2HPO4·2H2O分子量=158.03，0.2mol/L溶液为31.21克/升。