实验4——DNS法测还原糖

1.实验原理在氢氧化钠和丙三醇存在下，还原糖能将3，5－二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基，生成氨基化合物。此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定浓度范围内其吸光度与还原糖含量呈线性关系2.适用范围及特点此法适用于各类食品中还原糖含量的测定，具有准确度高、重现性好、操作简便、快速等优点，尤其适用于大批样品的测定。3.实验试剂3，5－二硝基水杨酸溶液：称取6.5g3，5－二硝基水杨酸溶于少量水中，移入1000mL容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325mL，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容到1000mL。4.测定方法准确吸取0、2、3、4、5、6、7mg/mL的葡萄糖标准溶液各1mL，样液2mL，分别置于25mL比色管中，各加入3，5－二硝基水杨酸溶液2mL，用蒸馏水补齐至10mL刻度线，置沸水浴中煮5min显色，然后以流水迅速冷却，用水定容到25mL，摇匀。以空白调零，在540nm处测定吸光度，绘制标准曲线，计算样品中还原糖的含量。4.结果计算还原糖（%）=A×V定W样×V测×100其中：A——从标准曲线上求得的葡萄糖质量，mgV定——样品溶液定容的体积，mLW样——样品的质量，mgV测——测定时的取样体积，mL