临床检验仪器学习指导和习题集

临床检验仪器学习指导和习题集1/16离心机1.离心机工作原理:离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离。悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降，从而使溶液得以分离，颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。2.相对离心力和沉降速度:相对离心力：是指在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“g”。沉降速度：在强大离心力作用下，单位时间内物质运动的距离。3．常用的离心方法(1)差速离心法(又称分步离心法)在同一离心条件下，采用不同的离心速度和离心时间,使沉降速度不同的颗粒分步离心的方法。差速离心主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。差速离心法的优点是：操作简单，离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子；分离时间短、重复性高；样品处理量大。缺点是：分辨率有限、分离效果差，不能一次得到纯颗粒；壁效应严重等。(2)密度梯度离心法(又称区带离心法)分为速率区带离心法和等密度区带离心法。优点：具有很好的分辨率，分离效果好，可一次获得较纯颗粒；适用范围广并可防止已形成区带由于对流而引起混合。缺点是：离心时间较长；需要制备梯度液；操作严格，不宜掌握。4.离心机的分类与结构（1）低速离心机10000r以内，RCF15000g以内，它主要用作血浆、血清的分离及脑脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分离；高速离心机20000-25000r以内，RCF89000g以内，它主要用于临床实验室分子生物学中的DNA、RNA的分临床检验仪器学习指导和习题集2/16离和基础实验室对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液的分离、浓缩、提纯样品等；超速离心机50000-80000r以内，RCF510000g以内：制备型超速离心机主要用于生物大分子、细胞器和病毒等的分离纯化，能使亚细胞器分级分离，并可用于测定蛋白质及核酸的分子量；（2）离心机的结构:离心机的结构由转动装置、速度控制系统、定时器、离心套管、温度控制系统、真空系统等，高速和超速离心机一定有制冷系统。（3）离心机的主要技术参数及性能指标：主要参数包括：最大转速；最大离心力；最大容量等。离心机转头的常用标记及转头参数。转头参数有，Rmax、Rmin、RCFmax、RCFmin、RPMmax、Ｋ等。巩固与练习一、选择题1、应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为（C）A、向心现象B、离心现象C、离心技术D、向心技术2、在强大离心力作用下，单位时间内物质运动的距离称为（C）A、沉降运动B、重力沉降C、沉降速度D、离心技术3、下列属于低速离心机部件的是（C）A、真空系统B、冷凝器C、离心转盘D、水冷却系统4、单位离心力场下的沉降速度是指（C）A、向心速度B、离心速度C、沉降系数D、上浮速度5、沉降系数与样品颗粒的质量或密度的关系，下列叙述中正确的是（A）A、质量和密度越大，沉降系数越大B、质量越小，沉降系数越大C、质量或密度与沉降系数无关D、密度越大，沉降系数越小6、差速离心法和速率区带离心法进行分离时，主要的根据是不同样品组份的（C）A、密度B、重力C、沉降系数D、体积7、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是（B）A、差速离心法B、密度梯度分析离心法C、速率区带离心法D、等密度区带离心法8、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是（B）A、RPMmaxB、RmaxC、RminD、RCFmax9、利用不同的粒子在离心场中沉降的差别，在同一离心条件下，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内大小、形状不同的粒子分布沉淀的离心方法是（A）A、差速离心法B、速率区带离心法C、等密度区带离心法D、高速离心法10、下列转头标识代表固定角转头的是（A）A、FAB、VC、SWD、CF临床检验仪器学习指导和习题集3/1611、低速离心机可达到的最大转速是（A）A、10000B、8000C、6000D、1200012、高速离心机由于运转速度高，一般都带有（C）A、自动控制装置B、平衡控制装置C、低温控制装置D、室温控制装置二、简答题1．离心机的工作原理是什么？2．差速离心法的优、缺点是什么？3．低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围是什么？生物安全柜一．选择题1、生物安全柜根据生物安全防护水平的差异，分为(C)A.1级B.2级C.3级D.4级2、下列有关1级生物安全柜功能特点的叙述中，正确的是（B）A.用于保护操作人员合样品的安全，而不保护环境安全B.用于保护操作人员和环境安全，而不保护样品安全C.用于保护操作人员安全，而不保护样品和环境安全D.用于保护样品和环境安全，而不保护操作人员安全3、生物安全柜内保持负压状态的主要目的是（B）A.保护试验样品B.保护工作人员C.保护环境D.保护试验安全和环境4、下列有关Ⅱ级生物安全柜性能特点的叙述中，不正确的是（D）A.为临床生物防护中应用最普遍的一类生物安全柜B.可同时保护操作人员、处理样品安全和环境安全C.进入和排出安全柜的气体均须经HEPA过滤器过滤D.空气的流动为单向、非循环式5、下列有关生物安全柜的实验操作中，不正确的是（D）A.手臂缓慢移动，避免影响正常的气流临床检验仪器学习指导和习题集4/16B.尽量避免江离心机、漩涡振荡器安装在柜内C.柜内尽量不要使用明火D.处理不同标本时，因柜内有垂直洁净气流，故不用担心标本之间相互污染二．简答题1.生物安全柜的工作原理是什么？答：生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置。其工作原理主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。临床分析化学仪器1.光谱分析技术的基础理论吸收光谱是由于物质对光的选择性吸收产生的，物质的吸收光谱取决于物质的结构，包括分子吸收光谱和原子吸收光谱。分子吸收光谱包括电子、振动和转动这三种光谱。利用被测定组分中的分子所产生的吸收光谱进行测定的分析方法，即分子吸收法，包括可见与紫外分光光度法、红外光谱法；利用被测定组分中的原子吸收光谱进行测定的分析方法，即原子吸收法。原子吸收光谱通常是线状光谱，只包括外层电子跃迁吸收的能量，所以原子吸收光谱仪器采用的是锐线光源。发射光谱是物质的分子、原子或离子接受能量辐射跃迁到激发态，由激发态返回基态时以辐射的方式释放能量而产生的光谱。如荧光光谱仪。2.紫外-可见分光光度计2.1紫外-可见分光光度计的基本结构紫外-可见分光光度计的基本结构由光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统等五部分组成。光源是提供入射光的装置，包括热辐射灯（钨灯、卤钨灯等），气体放电灯（氢灯、氘灯及氙灯等）多种。单色器是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置，其性能直接影响射出光的纯度，从而影响测定的灵敏度、选择性及校正曲线的线性范围。吸收池是用临床检验仪器学习指导和习题集5/16来盛放被测溶液的器件，同时也决定着透光液层厚度，可用玻璃、石英。检测器是把光信号转换为电信号的装置，常用的有光电管、光电倍增管、光电二极管阵列、等。信号显示系统是把放大的信号以适当的方式显示或记录下来的装置。3荧光光谱仪3.1荧光发生的机理分子吸收了照射光的高能量后，处于基态最低能级的分子，到达激发态，到达激发态的各个振动能级的分子，和周围的分子碰撞，并把部分能量以热能的形式传给周围的分子，自己降落到单激发态的最低振动能级。然后，由此最低振动能级向基态的各个振动能级跃迁，同时以发光的形式释放出其能量。简单的说，物质经高能量射线激发后，所发出的比原激发光波较长的可见光称为荧光。3.2激发光谱和荧光光谱任何发射荧光的物质都具有激发光谱和荧光光谱两个特征光谱，它们是荧光分析中定性和定量的基础。3.3荧光光谱仪的工作原理和主要结构荧光分析法和紫外、原子吸收分析方法有本质的不同。它所测量的是待测物质所发射的荧光强弱，而不是物质对光谱的吸收强弱，属于发射光谱分析。荧光分光光度计的结构包括五个基本部分：①激光光源：用来激发样品中荧光分子产生荧光。常用汞灯、氙灯等②单色器：用来分离出所需要的单色光。仪器中具有两个单色器，一是激发单色器，用于选择激发光波长；二是发射单色器，用于选择发射到检测器上的荧光波长。③样品池：放置测试样品，用石英做成。④检测器：作用是接受光信号，并将其转变为电信号。4原子吸收光谱仪4.1原子吸收光谱仪基本工作原理是测定气态的自由原子对某种特定光谱的吸收。其结构原理与普通的分光光度计是相似的，只是用锐线光源代替了连续光源，用原子化器代替吸收池。空心阴极灯发出相应待测元素特征波长的射线，它穿过火焰，把试样的溶液以细粒子流的形式喷射到火焰上，部分射线被吸收。这一部分正比于试样的浓度，测量吸收量将其与标准溶液进行对比，从而确定浓度。4.2原子吸收光谱仪基本结构由光源、原子化器、分光系统及检测系统四个主要部件组成。光源的作用是发射被测元素的特征共振辐射。应用较多的有空心阴极灯。原子化器作用是提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转变成原子态的蒸气。常用的有火焰原子化器和石墨炉原子化器两种。分光系统作用是将所需要的共振吸收线分离出来。分光系统的关键部件是色散元件，可以是棱镜或衍射光栅。检测系统是将接收到的光信号转变成电信号，然后再经同步检波放大器放大，同时把接收到的非被测信号滤掉。临床检验仪器学习指导和习题集6/16练习与巩固一、选择题1．紫外-可见分光光度法是基于被测物质对（D）A．光的发射B光的衍射C光的散射D光的吸收2.辐射能作用于粒子（原子、分子或离子）后,粒子选择性地吸收某些频率的辐射能,并从低能态（基态）跃迁至高能态（激发态）,这种现象称为（C）A.折射B.发射C.吸收D.散射3.棱镜或光栅可作为（B）A.滤光元件B.聚焦元件C.分光元件D．感光元件4.原子吸收分光光度计的主要部件有光源、单色器、检测器和（C）A.电感耦合等离子体B.空心阴极灯C.原子化器D.辐射源5．下述中不是石墨炉原子化器特点的是（C）A电极插入样品触点时好时坏B重复性差C原子化效率较低D设备复杂6.下述属于发射光谱的是（D）A紫外吸收光谱B原子吸收光谱C红外光谱D荧光光谱7．在原子吸收分析法中,被测定元素的灵敏度、准确度在很大程度上取决（C）A空心阴极灯B火焰C原子化系统D分光系统8．分光光度计出现不能调零故障时，可能的原因包括（A）A光门不能完全关闭B比色器架没落位C光能量不够D光源损坏二、简答题1．简述光吸收定律的物理意义及使用范围。2．紫外-可见分光光度计的基本结构及各部分功能是什么？3．简述原子吸收光谱仪的主要结构、性能及特点。4．简述荧光光谱仪的主要结构及特点。自动生化分析相关仪器1．自动生化分析仪根据仪器反应装置结构不同，可分为连续流动式、离心式、分立式和干化学式；根据自动化程度不同，可分为全自动化和半自动化。分立式自动生化分析仪是目前国内外应用最多的一类自动生化分析仪，工作原理与手工操作相似，按手工操作的方式编排程序，用加样探针将样品加入各自的反应杯中，试剂探针按一定时间自动定量加入试剂，经搅拌器充分混匀后，在一定条件下反应。反应杯同时作为比色杯进行比色测定。各环节用传送带连接，按顺序依次操作，故称为“顺序式”分析。2.自动生化分析仪的重要的结构单元样品处理系统（1）样品架：有圆盘状和传送条带状等类型，用以放置样品杯或原始样临床检验仪器学习指导和习题集7/16品管。（2）试剂仓：用来放置实验试剂，一般都有冷藏装置，可同时放置几十种试剂。（3）样品和试剂取样单元：由机械臂、样品针或试剂针、吸量器、步进马达等组成。机械臂根据计算机的指令携带样品针或试剂针移动至指定位置，由吸量器准确吸量，转移至反应杯中。（4）搅拌器：使反应液和样品充分混匀，由电机和搅拌棒组成。检测系统（1）光源：大多采用卤素灯，工作波长