DB13T 812-2006 大豆及其制品蛋白质溶解度的测定

B46河北省地方标准DB13/T812—2006大豆及其制品蛋白质溶解度的测定2006-11-11发布2006-11-20实施DB13河北省质量技术监督局发布食品伙伴网—2006I前言本标准由河北省畜牧兽医局提出。本标准起草单位：河北农业大学、河北省饲料工业办公室、河北省饲料产品质量监督检验站。本标准主要起草人：赵国先、王铃、师校军、米振杰、武英利、黄仁录、李艳琴。食品伙伴网—20061大豆及其制品蛋白质溶解度的测定1范围本标准规定了大豆及其制品中蛋白质溶解度测定的原理、试剂、仪器设备和测定方法。本标准适用于饲料检测单位、饲料企业、养殖场（户）、大中专院校对大豆及其制品加工质量的检测和监控。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T601—2002化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T6432—1994饲料粗蛋白测定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。蛋白质溶解度在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白质质量占试样中总蛋白质量的百分数。通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白质分散指数（PDI）来表示。4原理用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量；同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算出试样的蛋白溶解度。5试剂a）氢氧化钾（分析纯），无水硫酸钾、五水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲酚绿、硫酸铵；b）浓硫酸、盐酸（分析纯）、95%乙醇、蒸馏水。6仪器和设备a)感量为0.0001g分析天平；b)磁力搅拌器；c)离心机；d)样品粉碎机；e)60目分析筛；f)电炉；g)100ml或250ml凯氏烧瓶；h)凯氏蒸馏装置；i)250ml锥形瓶；j)1000ml容量瓶；k)微量滴定管。7分析步骤7.1试剂7.1.10.042mol/L氢氧化钾溶液称取2.360g氢氧化钾，加水溶解后，转移至1000ml容量瓶中，用水定容至刻度。7.1.2混合催化剂称取6g硫酸钾和0.4g硫酸铜，磨碎混匀。食品伙伴网—200627.1.3氢氧化钠溶液称取400g氢氧化钠，加水溶解后，转移至1000ml容量瓶中，用水定容至刻度。7.1.4硼酸溶液称取20g硼酸，加水溶解后，转移至1000ml容量瓶中，用水定容至刻度。7.1.50.1mol/L盐酸标准溶液量取8.3ml浓盐酸，注入1000ml水中混匀，按GB/T601---2002要求进行标定即可。7.1.6混合指示剂称取1g甲基红和5g溴甲酚绿，加入乙醇溶解后，转移至1000ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度。7.2样品制备取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎至60目，装入密封容器中。7.3操作步骤7.3.1试样处理称取试样1.5g（准确至0.0002g）置于250m烧杯中，准确移入0.042M氢氧化钾溶液75m，磁力搅拌20min，然后将试样转移至离心管中，以2700r/min的速度离心10min。7.3.2测定吸取上清液15ml,放入消化管中,按照GB/T6432----1994凯氏定氮法测定试样中可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T6432----1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白质的含量。7.3.3分析结果计算试样中蛋白质溶解度按照（1）式进行计算：100MP(%)p×=…………………………………（1）式中：p——试样中蛋白质溶解度，%；P——试样中可溶性蛋白质的含量；M——试样中粗蛋白质的含量。7.3.4重复性7.3.4.1每个样品应取2份平行样进行测定，以其算术平均值为分析结果。7.3.4.2测定允许相对偏差不大于1%。7.4注意事项7.4.1不同样品的粒度应相同。7.4.2不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应一致。食品伙伴网