浙江大学生物化学丙实验报告1

浙江大学生物化学丙实验报告1浙江大学生物化学丙实验报告1专业：农业资源与环境姓名：李佳怡实验报告学号：_J6实验报告日期：地点：生物实验中心310课程名称：生物化学实验（丙）实验名称：蔗糖酶的提取一、实验目的和要求（必填）三、实验材料与试剂（必填）五、操作方法和实验步骤（必填）七、实验结果与分析（必填）.指导老师：方祥年成绩:__同组学生姓名：金宇尊、鲍其琛二、实验内容和原理（必填）四、实验器材与仪器（必填）六、实验数据记录和处理八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学_掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法;2、巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。二、实验内容和原理订1、实验内容:线蔗糖酶的提取、分离纯化2、实验原理:酵母细胞破碎细胞破碎的常用方法液体剪切法―超声波法.机械搅拌法.高压匀浆法细胞破碎的常用方法固体剪切法一压力和研磨非机械法——物理法.化学渗透法.酶溶本实验采用研磨的方法。通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取岀来。蔗糖酶的初步分离纯化蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集样品。由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。三、实验材料与试剂1、实验材料市售干酵母粉10g/组（3酵母中提取和分离纯化蔗糖酶的过程中具体运用了哪些方法你认为还有哪些方法可以运用说说你的设想。答：①在本次试验中采用机械法中固体剪切法的研磨法：分离纯化过程用了选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀的方法，后通过离心达到真正分离纯化的目的。②英他常用细胞破碎方法：液体剪切法中的超声波法、机械搅拌法、高压匀浆法以及固体剪切法中的压力法和非机械法中的溶胀和自溶、化学渗透和生物酶降解等。由于蔗糖酶存在于细胞内部，所以需要将细胞破碎以获取蔗糖酶。另外，浓缩方法有沉淀法、吸附法、超过滤法、透析法、减压蒸懈法、冰冻干燥法等。不同的方法都各有优势和缺点，我们要根据不同的实验条件和要求、目的来选择较为适宜的方法。（《生物化学技术原理及应用》赵永芳第四版）3、实验感想第一次做生化实验，感觉还是很新鲜。在实验开始研磨的过程中，就有点被一股难闻的味道恶心到了。之后在实验具体操作过程中，发现实验本身比较简单，所以即使第一次实验没有预_，还是能够很快的理解实验的内容。但是之后的实验应该还是比较复杂的，所以需要我们好好预_，并进行一定的思考，以便在下次实验课上能充分的将理论课上所学知识应用到实验中去。