DB34T 2823-2017 菌类产品中石蜡定性鉴定方法 气相色谱质谱法

ICS 65.020B30DB34安徽省地方标准DB34/T2823—2017菌类产品中石蜡定性鉴定方法气相色谱质谱法QualitativeidentificationmethodofparaffinresiduesinmushroomproductsGC-MSmethod文稿版次选择2017-03-30发布2017-04-30实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T2823—2017I前  言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省检验检疫科学技术研究院提出。本标准归口单位：安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会。本标准起草单位：安徽省检验检疫科学技术研究院、安徽国泰众信检测技术有限公司。本标准主要起草人：胡艳云、吕亚宁、丁磊、陈洪周、周典兵、宋伟、韩芳、盛旋、郑平。DB34/T2823—20171菌类产品中石蜡定性鉴定方法气相色谱质谱法1范围本标准规定了菌类产品中石蜡的气相色谱-质谱定性鉴定方法。本方法适用于干蘑菇、新鲜蘑菇产品中石蜡残留的定性鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法原理样品用正己烷提取，取上清液过0.45μm有机膜，直接用气相色谱-质谱联用仪分析，通过与石蜡标准品保留时间比对，及气相色谱-质谱谱库检索匹配度比对，定性判断样品中是否含有石蜡残留。4试剂和材料4.1除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.2正己烷：色谱纯。4.3全精制切片石蜡（CAS8002-74-2，熔点52℃～64℃）。4.4石蜡标准参考样：分别称取熔点为52℃～64℃各系列切片石蜡5.00g，放入小烧杯中加热，待全部熔化后搅拌均匀冷却，即得到石蜡标准参考样。4.5石蜡标准储备液：准确称取适量上述石蜡标准参考样，以正己烷溶解并配制成1000μg/mL标准储备液，使用时用正己烷稀释成适当的浓度。4.6石蜡标准工作液：将石蜡标准储备液用正己烷稀释成10μg/mL的标准工作液。5仪器和设备5.1气相色谱-质谱联用仪，配谱库检索软件。5.2粉碎机。5.3振荡器。5.4一次性注射器。5.5有机滤膜：0.45μm。5.6分析天平：感量0.01g。5.7氮吹仪。DB34/T2823—201726试样制备与保存6.1试样制备从原始样品中取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。6.2试样保存将试样置于-18℃以下冷冻避光保存。7分析步骤7.1提取干蘑菇样品：称取2.00g（精确到0.01g）于50mL具塞锥形瓶中。新鲜蘑菇样品：称取10.00g（精确到0.01g），于50mL具塞锥形瓶中，加入10g无水硫酸钠。在锥形瓶中加入50mL正己烷，盖上塞子，置于振荡器上振摇15min，静置10min。将上述提取液经滤纸过滤后，收集滤液，于30℃下减压浓缩至2mL，用5mL正己烷分数次洗涤浓缩瓶，并将洗涤液转移至10mL玻璃试管内，40℃下氮气流下浓缩至干，用2mL正己烷溶解残渣，过0.45µm有机滤膜，供气相色谱质谱测定。7.2气相色谱参考条件7.2.1气相色谱参考条件条件如下：a)色谱柱：DB-5MS，30m×0.25mm×0.25μm或相当；b)载气：氦气，恒流模式，1.0mL/min；c)进样口：温度280℃，不分流进样；d)柱温：100℃保持2min，10℃/min升至280℃，保持14min；e)传输线温度：280℃。7.2.2质谱参考条件条件如下：a)电离方式：EI；b)电离能量：70eV；c)扫描模式：全扫描（SCAN）模式；d)扫描碎片范围：30-500amu；e)溶剂切除时间：10min。7.2.3气相色谱质谱定性检验分别吸取1.0μL石蜡标准溶液和样品溶液注入气相色谱-质谱仪中，比对石蜡标准溶液和蘑菇、大米样品的总离子流图，如果样品谱图同时满足：样品谱图中有五个或五个以上峰的保留时间与石蜡标准溶液保留时间吻合（相差小于±0.5％）；DB34/T2823—20173保留时间吻合的峰经质谱谱库检索软件检索，与长直链烷烃匹配度大于等于90％；保留时间吻合的峰，峰面积大于浓度为10μg/mL石蜡标准品的相应峰面积。即判定该样品中石蜡残留定性检验结果为阳性，否则判断为阴性。石蜡标准品总离子流图、阳性样品总离子流图、峰面积比对图和阴性样品总离子流图见附录A。7.2.4空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。8测定低限本标准对干蘑菇的定性检出限为10mg/kg，新鲜蘑菇的定性检出限为2mg/kg。DB34/T2823—20174AA附录A（资料性附录）石蜡标准品谱图、阳性样品谱图、峰面积比对图和阴性样品谱图图A.1石蜡标准溶液总离子流图图A.2阳性蘑菇样品总离子流图DB34/T2823—20175图A.3阳性蘑菇样品与石蜡标准品峰面积对比图图A.4阴性蘑菇样品总离子流图_________________________________