植物的组织培养技术-PPT课件

专题3植物的组织培养技术高频考点突破专题3植物的组织培养技术基础自主梳理命题视角剖析即时达标训练基础自主梳理一、菊花的组织培养1．理论基础：植物细胞的________。2．基本过程：外植体――→______愈伤组织――→______幼苗―→移栽。全能性脱分化再分化3．影响因素(1)材料：______、年龄、保存时间长短等。(2)营养①无机营养a．大量元素。b．__________。②有机营养：________、甘氨酸、烟酸、肌醇以及蔗糖等。(3)激素：__________和细胞分裂素。(4)pH：_____左右。(5)温度：18～22℃。(6)光照：每日光照12h。种类微量元素维生素生长素5.84．实验操作步骤：制备MS培养基→外植体消毒→______→培养→_______→栽培二、月季的花药培养1．理论基础：花粉具有________。2．花粉发育过程：_____________、单核期、__________等阶段。3．产生花粉植株的两种途径：接种移栽全能性四分体时期双核期4．操作关键(1)选材①要选择_______、____________的花蕾。②花粉最好处于单核期即细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。③确定花粉发育时期最常用的方法是___________和_______________，可以将细胞核分别染成红色和______色。初花期完全未开放醋酸洋红法焙花青—铬矾法蓝黑(2)接种①剥离花药尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织。②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或________的形成。(3)培养：花药培养一段时间后开裂，________________或释放出胚状体。要将前者及时转移到分化培养基上，如释放出胚状体，要尽快在花药开裂后，将______________，分别移植到新的培养基上。胚状体长出愈伤组织幼小植株分开学车问答科目一科目二科目三科目四高频考点突破植物组织培养的基本过程及影响因素1．培养过程(1)菊花组织培养过程菊花组织脱分化,形成愈伤组织――→再分化长出丛芽―→生根――→移栽菊花植株。(2)月季的花药培养2．影响植物组织培养的因素(1)内因：植物的种类，同一植物材料的年龄、保存时间的长短等。(2)外因①营养a．矿质元素。b．有机物。②调节剂(生长素、细胞分裂素)a．使用顺序不同→结果不同。b．两者用量比例不同→发育方向不同。③环境条件：温度、pH、光照等。【易误警示】一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。即时应用(随学随练，轻松夺冠)1．菊花的组织培养和月季的花药培养都是利用组织培养技术，关于两者的叙述下列说法中正确的选项有()序号比较项目菊花的组织培养月季的花药培养①植物激素不必添加需要添加②染色体倍性的鉴定不需要需要③光照每日日光灯照射12小时最初不需要，幼小植株形成后需要④形成愈伤组织或胚状体后不需更换培养基需要更换培养基A.①②③B．②③④C．①②④D．①②③④解析：选D。菊花的组织培养用茎段来培养，比较容易，不必添加植物激素；在菊花组织培养中不会发生染色体倍性的变化；需要每天日光灯照射12小时；形成愈伤组织或胚状体后不必更换培养基。月季花药的离体培养需要添加细胞分裂素和生长素等植物激素；在花药培养中，通过愈伤组织形成的植株会出现染色体倍性的变化，所以需要染色体倍性的鉴定；最初不需要光照，幼小植株形成后需要光照；形成愈伤组织或胚状体后需要转移到分化培养基上进一步分化培养。植物激素在组织培养过程中的重要作用生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为：激素使用实验结果使用顺序先生长素后细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先细胞分裂素后生长素细胞既分裂也分化生长素与细胞分裂素同时使用分化频率提高生长素用量与细胞分裂素用量的比例该比值高时利于根的分化，抑制芽的形成该比值低时利于芽的分化，抑制根的形成该比值适中时促进愈伤组织的生长即时应用(随学随练，轻松夺冠)2．利用植物组织培养的方法可快速、大量地繁殖植物。在培养过程中，取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示：请据表回答下列问题：(1)在此过程中能实现脱分化的花芽是________组。从实验结果可以看出，能诱导新芽形成的条件是___________________________________。(2)上述实验结果表明，在植物组织培养过程中，诱导芽和根形成的关键是_______________________________________________________________________。在生产实践中，欲快速、大量获得此植物的花芽，可选用________组的培养基进行大量生产。答案：(1)BCD细胞分裂素浓度大于生长素浓度(2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比)D命题视角剖析紧扣教材重点花药的离体培养(2011年南京质检)下图是水稻的花药通过无菌操作，培养产生花粉植株的两种途径的示意图。请据图回答下列问题：例1(1)图中的花粉应选自________________________的时期，花药培养成功率最高。图中的A是________，C过程指________，B指________。(2)这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于___________________________________。(3)配制培养基时加琼脂的目的是__________________________________。(4)组织培养要求无菌操作的原因是____________________________________。(5)要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有__________和________两类植物激素。【尝试解答】(1)在单核期即细胞核由中央移向细胞一侧胚状体诱导生根幼苗(2)培养基中激素的种类及其浓度配比(3)使培养基呈固体状态，有利于外植体的生长(4)如不无菌操作，微生物会在培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织竞争(5)细胞分裂素生长素【解析】(1)进行花药离体培养，花粉发育时期的选择非常重要，宜选取单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期。(2)图示两种途径的主要区别在于所使用培养基中激素的种类及浓度比不同。(3)培养基中加入琼脂可制成固体培养基。(4)由于微生物会在营养丰富的培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织进行竞争，故培养过程中应“无菌”操作。(5)植物组织培养过程中，生长素与细胞分裂素的应用对于外植体脱分化、再分化至关重要。洞察高考热点(2009年高考山东卷)人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：例2请回答：(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行______。接种前，要对人参根进行________。(2)用于离体培养的根切块，叫做________。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于________污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于________污染。(3)用少量________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。【解析】(1)灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止杂菌的污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行消毒。突破易错疑点实验操作中易误的几个问题(1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。(2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。(3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照；而在后期均需光照。【尝试解答】__A__【解析】确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法，有些植物细胞核不易着色时，需采用焙花青—铬矾法。