SNT 0330-2012 出口食品微生物学检验通则

书书书　中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜０３３０—２０１２代替ＳＮ０３３０—１９９４出口食品微生物学检验通则犌犲狀犲狉犪犾狉狌犾犲狊犳狅狉犿犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狊狅犳犲狓狆狅狉狋犳狅狅犱２０１２０５０７发布２０１２１１１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书目　　次前言Ⅲ…………………………………………………………………………………………………………１　范围１………………………………………………………………………………………………………２　规范性引用文件１…………………………………………………………………………………………３　实验室场所１………………………………………………………………………………………………　３．１　概述１…………………………………………………………………………………………………　３．２　安全要求１……………………………………………………………………………………………　３．３　实验室设计２…………………………………………………………………………………………　３．４　实验室区域２…………………………………………………………………………………………　３．５　实验室场所布局和设施２……………………………………………………………………………　３．６　清洁和消毒３…………………………………………………………………………………………４　操作人员４…………………………………………………………………………………………………　４．１　概述４…………………………………………………………………………………………………　４．２　能力４…………………………………………………………………………………………………　４．３　实验室人员的能力验证４……………………………………………………………………………　４．４　卫生４…………………………………………………………………………………………………５　仪器设备４…………………………………………………………………………………………………６　实验室器材的准备５………………………………………………………………………………………　６．１　准备５…………………………………………………………………………………………………　６．２　灭菌／去污５……………………………………………………………………………………………　６．３　一次性用品和材料５…………………………………………………………………………………　６．４　干净玻璃器皿和材料的保存５………………………………………………………………………　６．５　灭菌玻璃器皿和材料的管理５………………………………………………………………………　６．６　去污和消毒６…………………………………………………………………………………………　６．７　废物处理６……………………………………………………………………………………………　６．８　清洗６…………………………………………………………………………………………………７　培养基的制备和灭菌６……………………………………………………………………………………８　实验室样品６………………………………………………………………………………………………　８．１　取样６…………………………………………………………………………………………………　８．２　样品运送７……………………………………………………………………………………………　８．３　样品接收７……………………………………………………………………………………………　８．４　样品保存８……………………………………………………………………………………………　８．５　检测部分８……………………………………………………………………………………………９　检验９………………………………………………………………………………………………………　９．１　检验中的卫生防范９…………………………………………………………………………………　９．２　初始悬浊液和稀释液的制备９………………………………………………………………………１０　计数１０……………………………………………………………………………………………………Ⅰ犛犖／犜０３３０—２０１２　１０．１　概述１０………………………………………………………………………………………………　１０．２　固体培养基计数法１０………………………………………………………………………………　１０．３　固体培养基计数法的计算和结果表达１２…………………………………………………………　１０．４　霉菌和酵母菌计数１５………………………………………………………………………………　１０．５　液体培养基ＭＰＮ检测法１５………………………………………………………………………１１　定性检测方法１９…………………………………………………………………………………………　１１．１　概述１９………………………………………………………………………………………………　１１．２　原理１９………………………………………………………………………………………………　１１．３　测量不确定度２０……………………………………………………………………………………１２　确认的方法２０……………………………………………………………………………………………　１２．１　概述２０………………………………………………………………………………………………　１２．２　纯培养物的准备２０…………………………………………………………………………………　１２．３　革兰氏染色２０………………………………………………………………………………………　１２．４　生化方法鉴定２０……………………………………………………………………………………　１２．５　核酸探针鉴定２０……………………………………………………………………………………　１２．６　血清学方法２０………………………………………………………………………………………１３　检测报告２１………………………………………………………………………………………………１４　微生物检测方法的确认２１………………………………………………………………………………１５　结果质量保证／操作质量控制２１…………………………………………………………………………　１５．１　内部质量控制２１……………………………………………………………………………………　１５．２　参考菌株２２…………………………………………………………………………………………　１５．３　外部质量控制（能力验证）２２………………………………………………………………………附录Ａ（资料性附录）　一些消毒剂特性２３…………………………………………………………………附录Ｂ（规范性附录）　最可能数（ＭＰＮ）的测定２４…………………………………………………………Ⅱ犛犖／犜０３３０—２０１２前　　言　　本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准代替ＳＮ０３３０—１９９４《出口食品中微生物学检验通则》。本标准与ＳＮ０３３０—１９９４相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：———将原标准名称改为《出口食品微生物学检验通则》；———对原标准的范围进行了修订；———增加了“实验室场所”；———增加了“操作人员”；———增加了“仪器设备”；———增加了“实验室器材的准备”；———增加了“培养基的制备和灭菌”；———将原标准中的“取样”、“样品的验收、存放和检验样品的制备”合并为“实验室样品”，并按ＩＳＯ７２１８对该章节内容进行了修订；———将原标准中的“检验”分为“检验”、“计数”、“定性检测方法”、“确认的方法”等章节进行详细描述，并按ＩＳＯ７２１８对章节内容进行了修订；———将原标准中的“检验记录和结果的报告”改为“检测报告”，并按ＩＳＯ７２１８对章节内容进行了修订；———增加了“微生物检测方法的确认”；———增加了“结果质量保证／操作质量控制”；———删去原标准的附录Ａ，增加“最可能数（ＭＰＮ）的测定”。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局、中华人民共和国山西出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：黄晓蓉、郑晶、郑麟毅、刘中学、李卫华、蒋原、李志勇。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ０３３０—１９９４。Ⅲ犛犖／犜０３３０—２０１２出口食品微生物学检验通则１　范围本标准规定了按照特定标准执行的食品微生物检验的一般要求。本标准适用于食品微生物实验室对食品样品、食品及食品原料生产环境的微生物学检验。２　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ１９４８９　实验室　生物安全通用要求ＧＢ／Ｔ２７０２５　检测和校准实验室能力的通用要求ＧＢ／Ｔ２７４０５　实验室质量控制规范　食品微生物检测ＳＮ／Ｔ１５３８．１　培养基制备指南　第１部分：实验室　培养基制备质量保证通则ＳＮ／Ｔ１５３８．２　培养基制备指南　第２部分：培养基　性能测试实用指南ＳＮ／Ｔ２１０２．１　食源性病原体ＰＣＲ检测技术规范　第１部分：通用要求和定义ＩＳＯ／ＩＥＣ　指南４３１利用实验室间比对的能力验证试验　第１部分：能力验证试验方案的建立和实施ＩＳＯ６８８７　食品和动物饲料微生物学　微生物检验试验样品及初始悬浊液和十倍制稀释液的制备ＩＳＯ８１９９　水质　微生物培养计数指南ＩＳＯ８２６１　乳和乳制品　微生物检验试验样品及初始悬浊液和十倍制稀释液制备通用指南ＩＳＯ１４４６１１　乳和乳制品　微生物实验室内质量控制　第１部分：菌落计数用分析性能评定ＩＳＯ１４４６１２　乳和乳制品　微生物实验室内质量控制　第２部分：平行板和后续稀释步骤的菌落计数可靠性测定ＩＳＯ１６１４０　食品和动物饲料微生物学　可替代方法的确认程序ＩＳＯ／ＴＳ１９０３６　食品和动物饲料微生物学　定量检测的测量不确定度评估指南３　实验室场所３．１　概述本条款是实验室设计通用要求，注意样品的接收和制备应与其他检测样品有效隔离，以防止交叉污染。３．２　安全要求实验室设计应遵守不同微生物类型的安全要求。微生物分成４个危害等级：———危害等级Ⅰ（低个体危害，低群体危害）：不会导致人类和动物疾病的微生物。———危害等级Ⅱ（中等个体危害，低群体危害）：能引起人或动物发病，但一般情况下对实验室工作者、群体或环境不会引起严重危害的病原体。实验室暴露会导致严重感染，但有有效的治疗和预防措施，并且传播风险有限。１犛犖／犜０３３０—２０１２———危害等级Ⅲ（高个体危害，低群体危害）：能引起人类或动物严重疾病的病原体，但通常不在个体间传播，有有效的治疗和预防措施。———危害等级Ⅳ（高个体危害，高群体危害）：能引起人类或动物非常严重的疾病，可直接或间接在个体间传播的病原体，没有有效的治疗和预防措施。３．３　实验室设计食品微生物学危害等级Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级的实验室设计应满足ＧＢ１９４８９的要求，还应考虑３．４～３．６的要求。３．４　实验室区域３．４．１　概述实验室区域包含样品和检测区域（见３．４．２）和其他区域（见３．４．３），这些区域应相对独立。３．４．２　样品和检测区域实验室应对以下区域进行独立分隔或划分：———样品接收和保存区；———样品制备区，尤其是原材料（如含大量微生物的粉状物）的制备；———样品检测区，从初始悬浊液开始到微生物培养过程的样品检测；———可疑病原体操作区；———参考菌株和其他菌株保存区；———培养基和器具的准备及灭菌区；———培养基和试剂的保存区；———食品无菌检测区；———去除污染物区；———玻璃器皿和其他器具的清洗区；———危险化学品保存区，最好是特别设计的橱柜、房间或建筑物