SNT 2659-2010 国境口岸蚋类监测规程

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!!#!#$!%&%国境口岸蚋类监测规程$%&’(%)’&*+%,-./%)012+3/142(/)%&(’-)5%)(!%&%6&&6%&发布!%&&6%#6%&实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言　　本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局。本标准主要起草人：范建华、张建庆、高博、蔡怡珊、张述铿。Ⅰ犛犖／犜２６５９—２０１０国境口岸蚋类监测规程１　范围本标准规定了国境口岸蚋类监测的程序、方法、内容、统计分析和监测报告。本标准适用于国境口岸蚋类监测。２　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。２．１蚋类　犫犾犪犮犽犳犾犻犲狊节肢动物门、昆虫纲、双翅目、长角亚目、蚋科中具有医学重要性的吸血蚋类。２．２蚋类监测　犿狅狀犻狋狅狉犻狀犵狅犳犫犾犪犮犽犳犾犻犲狊采用某种特定的方法对某一生态环境中存在的蚋类的种群组成、数量动态、孳生地及其他有关影响因素进行系统的连续的调查活动。３　准备工作３．１　成立监测小组成立由３人～６人组成的监测小组，其中一名人员任组长。小组成员均应进行专业技术培训，监测过程中人员不宜变动。３．２　制定监测方案包括确定监测内容、时间、范围、地点、方法和监测用具等。３．３　确定监测范围依据国境口岸内监测区域及其生态环境制定。３．４　确定监测样地在国境口岸生活区和工作区特别是丛林、沿溪、沿河、沿海等适于蚋类孳生的生境选择并设置监测样地。３．５　确定监测时间在我国大部分地区，春季（４月）天气转暖后，蚋类开始活动，至秋季（１１月）气温下降后，活动减少直至停止。在南方部分省市，蚋类可经年活动。监测具体起止日期视当地蚋类活动季节和时间而定，在当地蚋类出现活动的前一旬开始，至蚋类活动消失结束，常年有蚋类活动的地区全年监测。监测周期为每旬一次，每旬第五日进行。如遇雨天等恶劣天气无法顺利监测时，监测时间适当顺延。１犛犖／犜２６５９—２０１０３．６　准备监测用具３．６．１　监测工具和用品纱帐、捕虫网、吸虫器、手电筒、白瓷盘、广口瓶、平皿、指管、镊子、剪刀、铅笔、标签、吸管、小刀、放大镜、塑料袋、７５％乙醇（体积分数）、三氯甲烷和（或）乙醚、毒瓶、记录本、签字笔、卷尺、温度计、湿度计、照度计、海拔仪、时钟、照相机、交通工具等。３．６．２　标本制作及鉴定用具生物显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、解剖针、小玻璃瓶、脱脂棉、吸管、酒精、蒸馏水、树胶酚、指甲油、氢氧化钾、记号笔、标签纸、樟脑块、标本盒、昆虫针等。３．６．３　个人防护用品工作服、手套、乳胶手套、雨靴、口罩、帽子、眼镜、肥皂、毛巾等。４　监测程序４．１　监测内容监测内容包括以下几方面：———国境口岸蚋类的地理分布；———国境口岸蚋类的种类组成；———国境口岸蚋类季节消长监测；———国境口岸蚋类昼间消长监测；———生境因素观测：地理、海拔、地貌、植被、天气、水体（包括：水温、洁净度、流速）、气温、照度、风速、相对湿度、降水量等。４．２　监测方法４．２．１　成蚋监测４．２．１．１　网捕法　　操作方法见附录Ａ．１．１．１。每网平均数即为成蚋密度［只／（人工·网）］。４．２．１．２　人帐诱法操作方法见附录Ａ．１．１．２。计算成蚋密度（只／人帐）。４．２．２　蚋幼虫、蛹监测蚋幼虫、蛹标本采集见附录Ａ．１．２。４．３　现场监测４．３．１　监测点生境因素观测４．３．１．１　记录监测点的海拔及其周围的地貌、植被。４．３．１．２　记录当时的温度、相对湿度、风速、光照、水体等。４．３．１．３　地区性气象数据以当地气象或林业部门观测的气象资料为准。２犛犖／犜２６５９—２０１０４．３．２　种类组成　　将捕获的蚋成虫进行种类鉴定、计数，计算蚋类种类构成比例４．３．３　季节消长季节消长监测应于监测时段内每旬选择一天，日期相对固定，在固定的监测点分别于日出后１ｈ、日落前１ｈ做两次监测。采用人帐诱法辅以网捕法。４．３．４　昼间消长昼间消长监测应自日出至日落，１次／２ｈ。采用人帐诱法辅以网捕法。４．３．５　填写记录表格每次监测结束后详细填写规定的记录表格。记录表格参见附录Ｂ。５　分类鉴定５．１　标本与标签标本应在采获时即贴上统一制备的标签，各标本应能查到原始记录。在７５％乙醇浸泡标本的标签上用ＨＢ铅笔填写清楚采集时间和地点，与标本同装一管；玻片标本的标签用黑墨汁或碳素笔填写，字迹应清楚易认。５．２　标本制作成蚋玻片标本制作见附录Ａ．２．２．１。蚋幼虫玻片标本制作见附录Ａ．２．２．２。蚋蛹玻片标本制作见附录Ａ．２．２．３。５．３　蚋种鉴定在生物显微镜或解剖镜下对捕获的蚋类进行种类鉴定，计数各蚋种的数量。６　统计分析６．１　资料整理年度蚋类监测结束后，把各种监测记录表格进行整理，并进行统计分析。６．２　列出蚋类种群组成根据蚋种鉴定结果确定本次监测的蚋类种类组成、优势蚋种，填写国境口岸蚋类本底调查表。６．３　绘制蚋类季节和昼间消长曲线图根据每次监测所得到的蚋类平均密度，绘制出国境口岸本次监测的蚋类季节消长和昼间消长曲线图。同时绘出优势蚋种的季节消长曲线图。３犛犖／犜２６５９—２０１０７　监测报告７．１　根据年度蚋类监测结果分析情况，汇总有关数据图表，写出国境口岸本次蚋类监测总结报告。监测报告主要内容：———口岸地理、气候、生境种类；———监测内容、方法、时间；———指出口岸蚋类种群组成、优势种、分布和季节消长、昼间消长规律；———新种或新记录来源分析、新种形态描述；———通过对口岸优势蚋种、常见蚋种活动规律、不同生境分布的分析，指出口岸蚋类防制的重点部位和薄弱环节，提出口岸蚋类防制的综合措施。７．２　向上级主管部门报告监测结果。４犛犖／犜２６５９—２０１０附　录　犃（规范性附录）蚋类标本采集、制作方法犃．１　标本采集犃．１．１　成蚋标本采集犃．１．１．１　网捕法采用昆虫采集网网捕法在蚋类孳生栖息场所进行采集。挥网时，采集者手持网柄，伸直胳膊呈“∞”形挥网，频率为３０次／ｍｉｎ，挥网５ｍｉｎ为一计量单位。挥网后，用力快挥３次～４次，将捕捉的昆虫集中网底，而后迅速将网末段塞入毒瓶内约１０ｍｉｎ毒杀之。将采集的蚋类装入指形管，做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。犃．１．１．２　人帐诱法在蚋类孳生栖息场所同时设三顶诱虫帐，每帐相距３０ｍ。将诱虫帐悬挂，上下四角撑开，用带固定，使帐下缘距地面３０ｃｍ～４０ｃｍ高。一人立于帐内，用手持电动捕蚊器吸捕进入帐中的成蚋，每次１ｈ。将捕获的成蚋吹入蚊笼或纱袋，做好记录和标记，带回实验室进行标本制作。犃．１．２　蚋幼虫、蛹标本采集犃．１．２．１　在蚋类孳生的溪流中漂浮和浸没于水中植物的茎叶、石块、砖头和枯枝落叶等杂物上，查找幼虫和蛹，发现后用镊子将幼虫挑到盛有７５％酒精的小指管内，再放入用铅笔写好采集地点和日期的标签，加盖密封，注意管内不留空气。犃．１．２．２　在植物茎叶上采到的蛹，用剪刀小心的连同植物茎叶一起剪下；在石块、砖头等杂物上的蛹，用刀子轻轻刮下，单只放入小指管内。在小指管的底部放一团湿棉球，小指管口用一松棉团塞上，管口向上垂直放置，待蛹羽化出成虫后，用三氯甲烷将成虫毒杀，收集成虫和蛹皮（成虫应和蛹皮一一对应），带回实验室制作标本。犃．２　标本制作犃．２．１　选取标本将采集的蚋类进行粗略分类计数，选取体形完整有代表性的个体制作标本。犃．２．２　玻片标本制作犃．２．２．１　成蚋玻片标本制作：ａ）　成虫外形特征的观察记录：触角、额、颜、中胸盾片、足、平衡棒和腹部的斑块、纹饰、形状、颜色、毛的形态等；ｂ）割翅：新鲜标本用７０％酒精浸泡约１ｈ，干标本用７０％酒精浸泡６ｈ以上，在解剖镜下用解剖针将成虫的两侧翅割掉，然后把割掉的翅放入已准备好的放一小滴树胶酚的载玻片上，并将翅５犛犖／犜２６５９—２０１０展平；ｃ）腐蚀：成虫割翅后，用蒸馏水洗３次，每次浸泡５ｍｉｎ，而后将其放入１０％氢氧化钾溶液中腐蚀约４ｈ，解剖镜下雌、雄虫生殖器各部清晰可见即可；ｄ）清洗：将腐蚀好的成虫用蒸馏水清洗３次，每次浸泡１５ｍｉｎ；ｅ）脱水：将清洗好的成虫用７０％、９０％、９５％、无水酒精脱水各１５ｍｉｎ；ｆ）封片：在上述放翅的载玻片上，在翅的附近放一滴树胶酚，然后将脱去酒精的成虫放到胶上，用解剖针将虫体分成头、胸、腹三部分，并将各部特征特别是前、中、后足展示清楚。雌虫须将食窦甲拉出。雄虫生殖器需将生殖腹板的侧面观和端面观描绘成图，再复位成腹面观。待制成标本１ｄ～２ｄ后稍干，使标本固定后再加适量胶并加盖玻片；ｇ）干燥：将制好的标本放阴凉处自然干燥或用５０℃～６０℃烘箱烘干；ｈ）封边：在盖玻片四边用指甲油封闭。与所孵出的蛹皮标本编为同一个编号，贴上标签，放入玻片标本盒内保存。犃．２．２．２　幼虫玻片标本制作：ａ）割肛腮：在解剖镜下用解剖针将幼虫第８腹节背面的肛腮割下，放入已准备好的放一小滴树胶酚的载玻片上；ｂ）腐蚀：幼虫用蒸馏水洗３次，每次浸泡５ｍｉｎ，而后将其放入１０％氢氧化钾溶液中腐蚀约２ｈ；ｃ）清洗：将腐蚀好的幼虫用蒸馏水清洗３次，每次浸泡１５ｍｉｎ；ｄ）脱水：用镊子将幼虫从蒸馏水中移至一载玻片上，滴上２滴无水乙醇脱水。在解剖镜下用解剖针割下头部和尾部。将头壳从侧面剖开，去掉头内已腐蚀的组织；ｅ）封片：将头壳、胸腹部和尾部放入步骤ａ）载玻片上的树胶酚中，将各部位摆平整（必要时可解剖开），将各部位特别是头斑、触角、上颚、头扇、鳃斑（应解剖出呼吸丝）、尾部的肛板和后环等展示清楚。待树胶酚稍干后，盖上盖玻片；ｆ）干燥：制好的玻片标本放阴凉处自然干燥或用５０℃～６０℃烘箱烘干；ｇ）封边：在盖玻片四边用指甲油封闭。贴上标签，放入玻片标本盒内保存。犃．２．２．３　蛹玻片标本制作：ａ）脱水：用镊子将蛹皮从７５％乙醇中取出，放在一张玻片上，滴上２滴无水乙醇脱水，浸泡５ｍｉｎ；ｂ）解剖：在解剖镜下用解剖针将蛹茧和蛹体分开，并割下一侧呼吸丝，用解剖针将蛹茧挑到滴一滴树胶酚的载玻片上，平整各部分特征使之充分暴露。同一个体的蛹体和蛹茧置于同一张玻片，蛹体标本的制作基本和成虫相同。待上述制作的玻片标本树胶酚稍干后，再滴上适量树胶酚，盖上盖玻片；ｃ）干燥：制好的玻片标本放阴凉处自然干燥或用５０℃～６０℃烘箱烘干；ｄ）封边：在盖玻片四边用指甲油封闭。贴上标签，放入玻片标本盒内保存。犃．２．３　浸泡标本制作对无须制成玻片的蚋幼虫或蛹标本可直接放入盛有７５％乙醇的小瓶内密封，加贴标签或用铅笔书写好标签放入瓶内后保存。犃．２．４　蚋种鉴定在解剖镜或生物显微镜下对制成标本的蚋类进行蚋种鉴定，计数各蚋种数量。６犛犖／犜２６５９—２０１０犃．２．５　填写标签鉴定后将种名（包括中文名和拉丁文名称）、性别、采集地点、采集日期等填入标签。玻片标本标签与载玻片等宽，呈正方形，将标签贴在载玻片的左端。犃．２．６　填写记录表每次标本制作结束后均应填写规范的记录表，做到内容全面，准确无误。７犛犖／犜２６５９—２０１０附　录　犅（资料性附录）蚋类监测记录表格表犅．１　国境口岸样地生境描述和蚋类采集记录生境描述：国境口岸：　　　　　　　　　　　东经：　　　　　　　　北纬：海拔：　　　　　地形、地貌特点：地面植被特征：描述于　　　年　　月　　日　　　　　　　　　　　　描述人：蚋类采集记录：　　　　年样地编号日月时间时分温度℃湿度％照度ｌｘ风速ｍ／ｓ方法天气采获虫数采集者：表犅．２　国境口岸蚋类本底调查表　　　样地编号：月份监测方法捕获只数密度种群构成只％只％只％合计调查单位：　　　　　　　　　　　　　填报人：　　　　　　　　　　填报日期：８犛犖／犜２６５９—２０１０表犅．３　地区性气象资料调查表省　　　　　　　　　口岸　　　　东经　　　　北纬　　　　　　　　海拔高度　　　　　　　　　　　　　　　年月旬温度／℃湿度降雨降雪霜冻日最高最低平均最高最低雨量／ｍｍ雨日雪量雪日霜日冻日其他１上中下２上中下３上中下４上中下５上中下６上中下７上中下８上中下９上中下１０上中下１１上中下１２上中下全年全年均温