SN T 0519-2010 进出口食品中丙环唑残留量的检测方法

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!!#!#$%!#!代替!#$%&!%&&’进出口食品中丙环唑残留量的检测方法$%&%’()*+&),*,-.’,.)/,*+0,1%’%2)34%)*-,,3-,’)(.,’&+*3%5.,’&%!#!6##6!#发布%!##6!6!#实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书中华人民共和国出入境检验检疫行　业　标　准进出口食品中丙环唑残留量的检测方法ＳＮ／Ｔ０５１９—２０１０中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６　６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６　印张１．５　字数３９千字２０１１年４月第一版　２０１１年４月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２１７９９　定价２４．００元书书书前　　言　　本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准代替ＳＮ０５１９—１９９６《出口粮谷中丙环唑残留量检验方法》。本标准与ＳＮ０５１９—１９９６相比，主要技术变化如下：———标准名称修改为“进出口食品中丙环唑残留量的检测方法”；———取消了“抽样和制样”，增加了“试样制备与保存”；———扩大了样品基质的适用范围；———气相色谱检测器由氮磷检测器改为电子捕获检测器；———增加了气相色谱质谱检测方法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国陕西出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局。本标准主要起草人：李建华、何强、孔祥虹、乐爱山、朱坚、沈崇钰、沈伟建、葛宝坤、王云凤、王明泰。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ０５１９—１９９６。Ⅰ犛犖／犜０５１９—２０１０进出口食品中丙环唑残留量的检测方法１　范围本标准规定了食品中丙环唑残留量的气相色谱检测方法和气相色谱质谱检测与确证方法。本标准适用于大米、荞麦、绿豆、苹果、草莓、香蕉、柑橘、韭菜、西兰花、蘑菇、枸杞子、茶叶、板栗、蜂蜜、猪肾、牛肉、鸡肉、鱼肉等食品中丙环唑残留量的测定和确证。２　方法提要试样用乙酸乙酯或乙腈提取，经Ｃ１８和石墨化炭黑固相萃取柱净化，用配备电子捕获检测器的气相色谱仪和气相色谱质谱仪进行检测和确证，外标法定量。３　试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。３．１　乙酸乙酯。３．２　乙腈。３．３　甲醇：液相色谱级。３．４　氯化钠。３．５　无水硫酸钠：经６５０℃灼烧４ｈ，置于密闭容器中备用。３．６　甲醇水溶液（６０＋４０，体积比）：量取６０ｍＬ甲醇（３．３）与４０ｍＬ水混合。３．７　丙环唑标准物质（Ｐｒｏｐｉｃｏｎａｚｏｌｅ，Ｃ１５Ｈ１７Ｃｌ２Ｎ３Ｏ２，ＣＡＳ编号：６０２０７９０７）：纯度大于等于９９％。３．８　丙环唑标准储备溶液：准确称取适量的丙环唑标准物质，用乙酸乙酯配制成１０００μｇ／ｍＬ的标准储备溶液，于０℃～４℃储存。３．９　丙环唑标准工作溶液Ａ：根据需要用乙酸乙酯将储备液稀释配制成适当浓度的标准工作溶液，供气相色谱测定，此溶液于０℃～４℃储存。３．１０　丙环唑标准工作溶液Ｂ：根据需要用空白基质提取液将储备液稀释配制成适当浓度的标准工作溶液，供气相色谱质谱测定使用，现用现配。３．１１　Ｃ１８固相萃取柱：５００ｍｇ，３ｍＬ；使用前分别用５ｍＬ甲醇和５ｍＬ水预淋洗柱子，流速１ｍＬ／ｍｉｎ。３．１２　石墨化炭黑固相萃取柱：２５０ｍｇ，３ｍＬ；使用前用５ｍＬ甲醇预淋洗柱子，流速１ｍＬ／ｍｉｎ。４　仪器和设备４．１　气相色谱仪：配电子捕获检测器（ＥＣＤ）。４．２　气相色谱质谱联用仪：配电子轰击离子源（ＥＩ源）。４．３　组织捣碎机。４．４　粉碎机。４．５　电子天平：感量分别为０．０１ｍｇ和０．０１ｇ。１犛犖／犜０５１９—２０１０４．６　涡旋混合器。４．７　均质器：１００００ｒ／ｍｉｎ。４．８　具塞离心管：聚丙烯，５０ｍＬ。４．９　旋转蒸发器。４．１０　氮吹仪。４．１１　离心机：５０００ｒ／ｍｉｎ。４．１２　固相萃取装置。５　试样制备与保存５．１　试样制备５．１．１　苹果、草莓、香蕉、柑橘、枸杞子、韭菜、西兰花、蘑菇取代表性样品约５００ｇ，将其可食用部分切碎（不可水洗），用组织捣碎机加工成浆状，混匀，装入洁净的容器内，密闭并标明标记。５．１．２　大米、荞麦、绿豆、茶叶、板栗取代表性样品约５００ｇ，用粉碎机粉碎并通过２．０ｍｍ圆孔筛，混匀，装入洁净的容器内，密闭并标明标记。５．１．３　猪肾、牛肉、鸡肉、鱼肉取代表性样品约５００ｇ，将其可食用部分切碎后，用组织捣碎机充分捣碎，混匀，装入洁净的容器内，密闭并标明标记。５．１．４　蜂蜜取代表性样品约５００ｇ，对无结晶蜂蜜样品将其搅拌均匀；对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过６０℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。在融化时应注意防止水分挥发。装入洁净的容器内，密闭并标明标记。５．２　试样保存大米、荞麦、绿豆、茶叶、板栗、蜂蜜等试样于０℃～４℃保存；苹果、草莓、香蕉、柑橘、韭菜、西兰花、蘑菇、枸杞子、猪肾、牛肉、鸡肉、鱼肉等试样于－１８℃以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。６　测定步骤６．１　提取６．１．１　大米、荞麦、绿豆、板栗、猪肾、牛肉、鸡肉、鱼肉称取５ｇ试样（精确至０．０１ｇ）于５０ｍＬ离心管中，加入１０ｇ无水硫酸钠，２０ｍＬ乙酸乙酯，１００００ｒ／ｍｉｎ均质提取２ｍｉｎ，３０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清液倒入浓缩瓶中。残渣再用２×２０ｍＬ乙酸乙酯重复提取两次，合并提取液于浓缩瓶中，于４５℃浓缩至近干，加５ｍＬ甲醇水溶液溶解残渣，待净化。２犛犖／犜０５１９—２０１０６．１．２　茶叶、苹果、草莓、香蕉、柑橘、韭菜、西兰花、蘑菇、枸杞子、蜂蜜称取５ｇ（精确至０．０１ｇ）试样于５０ｍＬ离心管中，加入５ｇ氯化钠，１０ｍＬ水（对于茶叶，加水后静置３０ｍｉｎ），２０ｍＬ乙腈，涡旋振荡提取１０ｍｉｎ，３０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清液转移到浓缩瓶中。残渣再用２×２０ｍＬ乙腈重复提取两次，合并提取液于浓缩瓶中，于４５℃浓缩至近干，加５ｍＬ甲醇水溶液溶解残渣，待净化。６．２　净化将上述提取液（６．１）通过经活化过的Ｃ１８固相萃取柱（３．１１），再用５ｍＬ甲醇水溶液淋洗Ｃ１８固相萃取柱，保持液滴流速约１ｍＬ／ｍｉｎ，弃去流出液。将Ｃ１８固相萃取柱抽干后与石墨化炭黑固相萃取柱（３．１２）（柱内填约１ｃｍ高无水硫酸钠）依次串接，在Ｃ１８固相萃取柱中加入３ｍＬ甲醇洗脱，待甲醇全部流过Ｃ１８固相萃取柱后，弃掉Ｃ１８固相萃取柱，再用８ｍＬ甲醇洗脱石墨化炭黑固相萃取柱，收集全部洗脱液，于４０℃水浴中氮气吹干，用乙酸乙酯溶解定容至１．０ｍＬ，供气相色谱和气相色谱质谱测定和确证。６．３　测定６．３．１　气相色谱条件气相色谱条件如下：ａ）　色谱柱：ＤＢ３５弹性石英毛细管柱，０．２５ｍｍ（内径）×３０ｍ，膜厚０．２５μｍ，或相当者；ｂ）色谱柱温度：８０℃（１ｍｉｎ）２０℃／ｍｉｎ２３０℃（１ｍｉｎ）４℃／ｍｉｎ２５０℃（８ｍｉｎ）３０℃／ｍｉｎ２８０℃（５ｍｉｎ）；ｃ）进样口温度：２５０℃；ｄ）检测器温度：２８０℃；ｅ）载气：氮气，纯度大于等于９９．９９９％，流量１．０ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）尾吹气：９０ｍＬ／ｍｉｎ；ｇ）进样方式：无分流进样，１ｍｉｎ后开阀；ｈ）进样量：１．０μＬ。６．３．２　气相色谱质谱条件气相色谱质谱条件如下：ａ）色谱柱：石英毛细管柱ＤＢ１７０１，０．２５ｍｍ（内径）×３０ｍ，膜厚０．２５μｍ，或相当者；ｂ）色谱柱温度：８０℃（１ｍｉｎ）１５℃／ｍｉｎ２３０℃（１ｍｉｎ）４℃／ｍｉｎ２５０℃（５ｍｉｎ）２０℃／ｍｉｎ２７０℃（５ｍｉｎ）；ｃ）进样口温度：２５０℃；ｄ）色谱质谱接口温度：２７０℃；ｅ）载气：氦气，纯度≥９９．９９９％，０．６ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）进样量：１．０μＬ；ｇ）进样方式：不分流进样，１ｍｉｎ后开阀；ｈ）电离方式：ＥＩ；ｉ）电离能量：７０ｅＶ；ｊ）测定方式：选择离子监测方式（ＳＩＭ）；ｋ）监测离子（ｍ／ｚ）：２５９，１７３，１９１，２６１；定量离子（ｍ／ｚ）：２５９；３犛犖／犜０５１９—２０１０ｌ）溶剂延迟：１０ｍｉｎ。６．３．３　气相色谱检测根据样液中丙环唑含量情况，选定与样液浓度相近的标准工作溶液（３．９），标准工作溶液和样液中丙环唑的响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定，以保留时间定性，测量峰面积与标准工作溶液比较进行定量。在６．３．１给定的色谱条件下，丙环唑及异构体的保留时间约为１９．２ｍｉｎ和１９．４ｍｉｎ。丙环唑标准品的色谱图参见附录Ａ中图Ａ．１。６．３．４　气相色谱质谱检测及确证根据样液中丙环唑含量情况，选定与样液浓度相近的标准工作溶液（３．１０），标准工作溶液和样液中丙环唑的响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在６．３．２规定的气相色谱质谱条件下，样品中待测物质的保留时间与标准工作溶液中对应的保留时间的偏差在±２．５％以内，且样品中被测物质的相对离子丰度与浓度相当的标准工作溶液的相对离子丰度允许偏差不超过表１规定的范围，则可确定样品中存在对应的被测物。在上述气相色谱质谱条件下，丙环唑及异构体的保留时间约为１８．５ｍｉｎ和１８．７ｍｉｎ。丙环唑标准品的气相色谱质谱总离子流图和全扫描质谱图参见附录Ｂ中图Ｂ．１和图Ｂ．２。表１　使用定性气相色谱质谱时相对离子丰度最大允许偏差相对丰度／％＞５０＞２０～５０＞１０～２０≤１０允许的相对偏差／％±２０±２５±３０±５０６．４　空白试验除不称取试样外，均按上述检测步骤进行。６．５　结果计算和表述用色谱数据处理软件或按式（１）计算试样中丙环唑残留量：犡＝犃×犮ｓ×犞犃ｓ×犿………………………………（１）式中：犡———试样中丙环唑的残留量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃———样液中丙环唑及异构体的色谱峰面积之和；犮ｓ———标准工作液中丙环唑的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犞———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犃ｓ———标准工作液中丙环唑及异构体的色谱峰面积之和；犿———最终样液所代表的试样质量，单位为克（ｇ）。注：计算结果须扣除空白值。７　测定低限和回收率７．１　测定低限本方法中气相色谱法和气相色谱质谱法的测定低限均为０．０１ｍｇ／ｋｇ。４犛犖／犜０５１９—２０１０７．２　回收率本方法中气相色谱法和气相色谱质谱法回收率的数据分别见表２和表３。表２　样品的添加浓度及回收率的数据（犌犆）样品名称添加浓度ｍｇ／ｋｇ回收率范围％样品名称添加浓度ｍｇ／ｋｇ回收率范围％大米０．０１０８１．６～８４．４０．０２０７６．７～７９．７０．０５０７３．２～８４．２荞麦０．０１０７０．９～８３．１０．０２０７５．９～８５．５０．０５０７１．８～８６．７绿豆０．０１０８７．１～９９．３０．０２０８８．９～９９．９０．０５０８３．９～１０３．８苹果０．０１０９２．９～１００．９０．０２０９６．３～１０２．７０．０５０９４．６～１０２．２草莓０．０１０９５．２～１０１．１０．０２０９４．４～１０７．６０．０５０９１．１～１０３．８香蕉０．０１０７５．５～９８．２０．０２０８８．３～９２．８０．０５０８６．２～１０９．７柑橘０．０１０９８．４～１０５．５０．０２０９５．６～１１２．４０．０５０８５．２～１１２．３韭菜０．０１０８８．７～９４．８０．０２０８７．６～９３．８０．０５０８９．３～９８．２西兰花０．０１０８６．９～９２．００．０２０８６．５～９４．３０．０５０８６．４～９６．７蘑菇０．０１０８４．３～９０．８０．０２０８５．１～９３．８０．０５０８５．３～９８．１枸杞子０．０１０７６．９～８６．１