SNT 2123-2008 出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２１２３—２００８出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳犮狅犾犾犲犮狋犻狅狀，狋狉犪狀狊狆狅狉狋犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲狅犳狊犪犿狆犾犲狊犳狅狉犲狀狋狉狔犪狀犱犲狓犻狋犪狀犻犿犪犾狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲２００８０９０４发布２００９０３１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前　　言本标准主要依据ＯＩＥ公布的《陆生动物诊断试验与疫苗手册》（２００４版）第１．１．１章和《国际水生动物疾病诊断手册》（２００６版）第１．１．４章中有关内容编制而成。本标准的附录Ａ为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。本标准主要起草人：范万红、曾少灵、吕建强、詹爱军、秦智锋、曹琛福。本标准是首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２１２３—２００８出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范１　范围本标准规定了出入境动物和动物产品检疫实验样品的采集、运输和保存的要求。本标准适用于出入境动物和动物产品检疫实验样品的采集、运输和保存。２　规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。ＧＢ／Ｔ１８０８８　出入境动物检疫采样国际动物卫生组织（ＯＩＥ）　陆生动物诊断试验与疫苗手册国际动物卫生组织（ＯＩＥ）　国际水生动物疾病诊断手册３　术语和定义ＧＢ／Ｔ１８０８８确立的以及下列术语和定义适用于本标准。３．１合同货物　犮狅狀狋狉犪犮狋犵狅狅犱狊一次发运或接收的货物，其数量以指定的合同或货运清单为凭证。可以由一批或多批批量货物组成。３．２批量货物　犫犪狋犮犺犵狅狅犱狊数量确定的货物品质应均匀一致（同一品种或种类，产地相同，包装一致等）。属于合同货物中的某一批，通过它们可以综合评价合同货物的质量。３．３抽检货物　狊犪犿狆犾犻狀犵犵狅狅犱狊从批量货物中的一个位置取出的少量货物。多个抽检货物应从批量货物中的不同位置采样。３．４混合货样　犿犻狓犻狀犵狊犪犿狆犾犲条件允许，从某一特定批量货物采样、混合，即为混合货样。３．５缩减样品　犮狌狋狋犻狀犵狊犪犿狆犾犲混合货样经缩减而获得对该批量货物具有代表性的样品。３．６检验样品　狋犲狊狋犻狀犵狊犪犿狆犾犲在实验室中进行检测的样品。１犛犖／犜２１２３—２００８４　样品的采集４．１　采样要求４．１．１　采样应按相关规定进行。４．１．２　在采样之前应确认货、证相符。４．１．３　采样过程中应避免环境等不良因素的影响，防止污染样品。４．１．４　使用无菌采样用具，如注射器、采血器、试管、探子、铲子、匙、采样器、广口瓶、剪子、样品袋等应经过消毒灭菌处理。４．１．５　根据样品种类如盒、袋、瓶和罐装者，应取完整未开封的。如果样品很大，则需用无菌采样器采样；样品是固体粉末，应边取边混合；样品是液体的，通过振摇混匀即可取样；冷冻样品应保持在冷冻状态采样、保存及运输，非冷冻动物产品需在０℃～５℃中保存及运输。４．１．６　采样前或采样后应在盛装样品的容器或样品袋上立即贴注标签，标签内容应能够全面反映样品的相关信息，如样品品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样日期等。４．１．７　采样后应出具采样单一式三份，一份留采样单位存查，一份交货主或其代理人，一份随同样品送实验室。４．１．８　采样过程应完全符合我国相关生物安全管理法律法规和规章的要求和规定，加强个人防护，以防止病原扩散和人畜共患病的发生。４．２　样品采集４．２．１　活体样品的采集４．２．１．１　血液样品的采集采血前用７５％酒精棉球消毒采血部位后施行采血。采血部位、采血方法及采血量依据动物种类、品种、个体大小等不同情况和具体的检测要求而定。４．２．１．２　排泄物样品的采集从动物的直肠或泄殖腔采集新鲜排泄物，直接置于灭菌容器中。也可以用棉拭子从直肠或泄殖腔擦拭采集后放入含磷酸盐缓冲液的灭菌容器中。４．２．１．３　皮肤及其附属物的采集以灭菌针筒吸取完整水泡中的水泡液置无菌管保存。检验螨、虱子或真菌时先清除表皮上的羽绒和羽毛，用解剖刀刮取深层皮屑。４．２．１．４　生殖道和尿道样品的采集使用棉拭子采集子宫颈和尿道样品。４．２．１．５　精液的采集通过人造阴道、人工刺激等人工采精的方法采集精液样品。采样器具不得接触消毒清洗液，避免破坏样品的生物活性。４．２．１．６　眼部分泌物样品的采集提起眼睑，用棉拭子在其表面轻轻刮拭采集眼部分泌物样品。４．２．１．７　鼻腔分泌物样品的采集以保存液润湿拭子，撩拭鼻腔收集分泌物完成采样。动物出现病毒感染症状时应使用长型鼻腔采样器进行采样。４．２．１．８　乳汁样品的采集采样前清洗乳头，弃去最初流出的乳汁，收集其后流出的乳汁作为乳汁样品。采样过程不得使用消毒剂。２犛犖／犜２１２３—２００８４．２．２　非活体样品的采集４．２．２．１　动物尸体样品的采集依据动物的大小和种类，选择合适的采样工具。样品容器应标明采样日期、组织名称和动物尸检情况。出现可疑狂犬病或海绵状脑病症状，应取动物完整头颅作为样品。用作微生物检测的样品应避免肠内容物污染组织样品。用作细菌培养或病毒分离样品的采样工具不应接触消毒类溶剂。４．２．２．２　饲料样品的采集饲料样品从饲料槽和水槽里采集。４．２．２．３　蜜蜂样品的采集在蜂窝附近采集成年的蜜蜂尸体或接近死亡的个体，后者加以冷冻法致死。另外直接从蜂巢中采集有异常形态变化的部分作为蜂巢样品。４．２．３　鱼样品采集４．２．３．１　刚孵化或处于卵黄囊期的幼鱼，采集整条鱼为样品，并去除其卵黄囊。４．２．３．２　长度为４ｃｍ～６ｃｍ的鱼，采集全部内脏（包括肾脏）和脑髓，沿鳃盖后沿切下鱼头并稍作挤压可得脑髓。４．２．３．３　长度超过６ｃｍ的鱼，采集肾脏、脾脏和脑髓。４．２．３．４　处于繁殖期的鱼（也称亲鱼）采集精液、卵液或相关组织。４．２．３．５　混样时最多以来自５头鱼的样品为单位进行混样。若采集的是亲鱼的卵液，则按照１ｍＬ／条鱼的量进行采集，混样后每份样品不超过５ｍＬ。４．３　采样数量４．３．１　出入境动物的采样数量动物的采样数量根据ＯＩＥ《陆生动物诊断试验与疫苗手册》中所提出的概率把关的采样原则计算或采用ＯＩＥ《国际水生动物疾病诊断手册》中所指定的采样数量。出入境动物的采样数量见附录Ａ表Ａ．１。４．３．２　出入境动物产品的采样数量动物产品的采样数量根据ＯＩＥ《陆生动物诊断试验与疫苗手册》中所提出的概率把关的采样原则计算。出入境动物产品的采样数量见附录Ａ表Ａ．２。４．３．３　对采样数量有特殊要求或规定的情况出入境动物和动物产品凡属已经签订了双边检疫协议或议定书的，其采样数量按检疫协议或议定书的要求进行采样。４．４　样品的随附信息４．４．１　货主或代理人的姓名和联系地址、疫病发生的地理位置、联系电话和传真号码。４．４．２　送样人的姓名、联系地址、电子邮件地址、电话和传真号码。４．４．３　样品动物的种类、怀疑感染的疾病和申请进行的检测项目。４．４．４　向样品接收实验室提供完整的样品信息档案，包括以下信息：ａ）　动物尸检的项目清单和情况描述、尸检结果；ｂ）　农场出现病畜的时间长短，新进动物需注明来源地；ｃ）　首宗病畜出现的时间以及后续出现的病畜或死亡个例的发生时间，附带说明曾经报送同类病畜的数目情况；ｄ）　描述疾病在畜禽中传播的情况；ｅ）　农场的动物数量，病死的动物数量，以及出现病征的动物数量、年龄、性别和种类；ｆ）　病征描述和病状持续期，病畜体温，病畜的口、眼睛和四肢情况，以及产奶和产蛋的情况；ｇ）　提供货物途经的国际路线，或从国外或外地输入动物的引进信息等；ｈ）　动物接受过的任何治疗方案、治疗时间、疫苗注射史和时间；３犛犖／犜２１２３—２００８ｉ）　动物其他病史和实际饲养的观察记录。５　样品的运输５．１　样品的包装５．１．１　一般要求保证样品包装良好，确保到达实验室的样品外观完整且在运输途中不发生泄漏。样品的包装分为三部分：主要承载容器、中间夹层包装垫料和坚固的包装外壳。５．１．２　液体样品的包装要求５．１．２．１　主要承载容器的中间夹层包装应防漏。５．１．２．２　使用具有良好吸附能力的材料包裹承载容器，防止液体泄漏等情况的发生。５．１．２．３　若同时使用多个承载容器，应将每个容器分开包装或以坚固的架子固定后间隔固定，防止容器在运输途中互相擦碰。５．１．３　固体样品的包装要求５．１．３．１　主要承载容器应密封无孔，不得超过外壳包装的质量限制，中间的夹层包装应密封无孔。５．１．３．２　使用具有良好吸附能力的材料包裹主要承载容器，防止内容物外漏。５．２　样品的运输５．２．１　样品的保存和运输５．２．１．１　根据专业要求及检测对象确定样品的保存方法。５．２．１．２　应在２４ｈ内将样品送到检测实验室。特殊情况下，根据待检对象的要求和运输的要求作相应处理。５．２．２　填报送检单按下列内容填报送检单：送检单位、送检日期、样品名称、采样部位、数量、来源、货主信息、申请检测的项目等。送检时，必须同时提交采样单，供检验人员参考。６　样品的保存６．１　血清样品的保存血清的保存条件以不影响血清的免疫学与生物学特性为原则。根据不同使用目的，血清保存分为短期保存和长期保存两种情况。１周内进行检测的血清样品可置于４℃作短期保存。１周后进行检测或检测后需要留样的血清样品作长期保存，一般有三种方法：深度冷藏、制成纸上样品干燥后室温保存和冷冻干燥保存，同时应根据不同的检测对象，在保持样品生物学活性的前提下选择合适的长期保存的冷冻温度和方式。６．２　组织器官样品的保存用作病毒检测的组织器官采集后应尽快冷藏。使用干冰冷藏需密封样品，防止二氧化碳影响样品的生物活性。不能马上进行检验的样品，要低温保存。６．３　乳汁样品的保存用作血清学检测的乳汁样品不可冻藏、加热或者是剧烈振荡，不能及时送达实验室可加入防腐剂，但要进行病毒中和试验的乳汁样品在保存时不可添加防腐剂。乳汁样品用作细菌检测时可冷藏。６．４　喉、鼻咽或直肠拭子的保存将拭子放入含磷酸盐缓冲液的灭菌容器中，根据不同使用目的选择性加入复合抗生素，冷藏保存，如需长期保存则置于－２０℃以下。６．５　尿或腹水等体液的保存直接收入灭菌瓶中冷藏保存。４犛犖／犜２１２３—２００８６．６　粪便样品的保存直接采集的粪便样品应置于灭菌的螺盖试管或塑料样品袋中，不可使用胶塞试管。直肠或泄殖腔拭子以等量含复合抗生素的磷酸盐缓冲液浸泡，并置于灭菌的螺盖试管中保存。运送时间超过２４ｈ或用作寄生虫检测的样品须在４℃下保存。６．７　鱼样品的保存６．７．１　用作病毒检测的鱼类样品的保存采集到的鱼器官、器官浆质或卵液应以灭菌试管盛装并保存在４℃。器官样品以添加抗生素的细胞培养液或汉氏平衡盐溶液（ＨＢＳＳ）悬浮，每份器官至少浸泡在５份运输液中。采用的抗生素浓度一般为：庆大霉素（１０００μｇ／ｍＬ），青霉素（８００ＩＵ／ｍＬ），硫酸链霉素（８００μｇ／ｍＬ）等。器官样品也可浸泡在含浓度为４００ＩＵ／ｍＬ的制霉菌素或两性霉素Ｂ等抗真菌药物的缓冲液中。运输时间超过１２ｈ，需加入５％～１０％的血清或蛋白来稳定病毒。６．７．２　用作细菌检测的鱼类样品的保存新鲜采集到的鱼器官或卵液等组织样品应以灭菌试管盛装并保存在４℃。运输液中不可添加任何抗生素或抑霉菌素。６．８　样品保存期对发出检疫报告后的样品，根据检测项目的要求和有关样品处理的规定，确定样品的保存期。５犛犖／犜２１２３—２００８附　录　犃（规范性附录）出入境动物及动物产品的采样数量犃．１　出入境动物的采样数量采样按照ＧＢ／Ｔ１８０８８进行，具体见表Ａ．１。表犃．１　出入境动物的采样数量动　物　种　类采　样　数　量大家畜（牛、马、驼等）、中家畜（猪、山羊、绵羊等）逐头采样。小家畜（兔、貂等）、两栖动物、爬行动物进口种用：逐头采样；进口非种用：按下述“实验动物”一栏的