DB14∕T 1608-2018 高粱种质资源低温库保存技术规程

ICS65.020.20B05DB14山西省地方标准DB14/T1608—2018高粱种质资源低温库保存技术规程2018-01-10发布2018-03-10实施山西省质量技术监督局发布DB14/T1608—2018I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14入库前处理........................................................................25入库保存..........................................................................56监测与更新........................................................................57信息管理..........................................................................6附录A入库保存种质资源的标准（资料性附录）...........................................8附录B种子含水量测定方法（规范性附录）...............................................9DB14/T1608—2018II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西省农业科学院提出并归口。本标准起草单位：山西省农业科学院农作物品种资源研究所。本标准主要起草人：秦慧彬、穆志新、李萌。DB14/T1608—20181高粱种质资源低温库保存技术规程1范围本标准规定了高粱种质资源低温库保存的入库前处理、入库保存、监测与更新及信息管理。本标准适用于高粱种质资源的长期、中期保存和监测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3543.3农作物种子检验规程净度分析GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽实验GB/T3543.6农作物种子检验规程水分测定3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1生活力种子在适当条件下能发育成植株的一种能力，一般用发芽率和发芽势计量。3.2干燥采用不损害种子活力的脱水技术，把种子含水量降到适于贮藏水平的过程。3.3监测在种质库种子保存过程中，定期取出种子样品进行发芽率测定，检查种子生活力状况，同时测查贮存种子的数量，以确定种子是否应进行繁殖更新。4入库前处理4.1接纳登记DB14/T1608—20182对入库保存的种子进行接纳登记，即对其进行纯度、净度、健康状况和数量等指标的初步检查和基本信息的登记。具体参见附录A。4.2查重、去重检查接收的同一批种子之间是否有重复（也称自身查重），并将接收种子“全国统一编号”、“原保存编号”和“种质名称”等数据项输入计算机，与库存种子管理数据库核对是否有重复。对已保存的种子，不再重新入库。4.3种子清选剔除破碎种子、空粒、瘪粒、霉粒、受病虫侵害粒及其他混杂种子，以及灰尘等其他物质。4.4生活力检测4.4.1发芽试验条件高粱种子初始发芽力的检测按照GB/T3543.4执行。高粱种子发芽条件为20℃～30℃，最适宜发芽温度为25℃。4.4.2破除休眠怀疑高粱种子休眠时，发芽试验前可采用冷冻方法进行处理。具体做法为：发芽试验前见所有发芽试验种子放在湿润的发芽床上，置于5℃～10℃预冷处理3d，然后在25℃下发芽。4.4.3准备试验条件与种子从所需发芽测试的高粱种子中随机取数量相等的3份种子并分装于3个纸袋中，每个纸袋内需附上流水号标签。每份种子数量为100粒。调节发芽箱的光照、温度、湿度；备好各种器具、试剂与药品，发芽床要进行洗涤和消毒。4.4.4发芽试验用医用酒精对每个发芽皿进行消毒，然后将发芽床基质滤纸或吸水纸置于发芽皿中，并加入高压灭菌的蒸馏水至淹没高粱种子一半。将每袋种子倒入每个发芽皿（盒）中并均匀的摆放在湿润的发芽床上，粒与粒之间应保持一定的距离，然后盖上盖放入已调节好的发芽箱中。4.4.5发芽试验持续时间高粱种子的发芽试验初次计数天数为4d，末次计数天数为10d。如果在规定试验时间结束前，样品已达最高发芽率，则试验可提前结束。如有发霉的种子应取出冲洗，严重发霉的应更换发芽床。4.4.6发芽鉴定及发芽数量记录每份种子材料发育成的正常幼苗数为发芽数。在初次计数或其他中期计数时，应将正常幼苗（已达到全部主要构造能正确鉴定的幼苗）取出去，并记录数量。对可疑或损伤、畸形或有其他缺陷的幼苗保留到末次计数时再判别并记录数量。严重腐烂或发霉的种子应尽早从发芽床上除去并记数。4.4.7发芽结果的计算与表示发芽结果是用正常幼苗数占供试种子数的百分率表示。百分率按四舍五入法计算到整数位。DB14/T1608—201834.5保存数量和入库初始发芽率标准高粱种子入长期库（-18℃）保存的发芽率应≥85%，保存量应≥200g。高粱种子入中期库（±4℃）保存的发芽率应≥75%，保存量应≥150g。4.6库编号编码剔除发芽率低于最低限的高粱种子后，对符合入库标准的种子进行编号，每份种子给一个永久库编号。可根据保存作物种类和种子特点，制定库编号编码。4.7种子干燥4.7.1干燥条件高粱种子的干燥条件可以选择干燥箱加热干燥法和双“十五”干燥间低湿干燥法。加热干燥法的条件为温度38℃，湿度8%～10%，时间2d。双“十五”干燥间低湿干燥法的条件为温度15℃±2℃、湿度15%～20%，时间7～15d。4.7.2预估或测定种子的初始含水量把要预估的高粱种子置于环境中，当种子的重量不再变化时，种子就与环境中空气的水分达到了平衡。测出当时当地的大气相对湿度和平均温度，就可预估出种子含水量。平衡种子含水量大约需要7～10d。可用通风湿度计测量存放种子地点的湿度。表1为高粱种子在25℃，不同相对湿度下的平衡含水量。表1在25℃时高粱种子的平衡含水量种名相对湿度％153045607590高粱6.48.610.512.015.218.8注：在实际测定种子初始含水量按附录A方法对高粱种子抽测1～2份。4.7.3种子预干燥当高粱种子的初始含水量超过17%时需进行预干燥。先在低温的干燥间（20℃～25℃，20%～30%RH）进行干燥，最好能采用“双15（15℃，15%RH）”的干燥箱，使高粱种子水分降至13%左右，然后再加热干燥。预干燥时间长短可用减重量法计算。其方法如下：首先测定种子的初始含水量和初始重量，并确定干燥后要达到的含水量，然后用下面的公式计算出达到最后含水量时的种子重量。DB14/T1608—201844.7.4种子干燥逐份核查库编号和种子份数，确保不缺不乱。核对完后，将种子装入透气的尼龙网袋中，然后放入干燥箱内。干燥过程中至少每隔4h观察干燥箱和干燥间的温、湿度变化和设备的运行情况。4.7.5种子含水量测定当种子干燥到预定时间时，抽测1～2份种子的含水量。含水量测定按附录B方法进行。若含水量达到贮藏要求时，将种子从干燥箱中取出并进行包装，否则继续进行干燥。4.8种子包装称重准备高粱种子入库所需的铝箔袋，并贴好标签。核对装有种子的尼龙袋上标签与入库铝箔袋上标签一致，把种子倒入相应的袋中。尼龙袋内的原始标签也一同装入铝箔袋中，即时封口。包装间温度一般为20℃～25℃，相对湿度30%～40%。包装速度要快，以防干燥的种子吸收空气中的水分。包装好的种子用电子称称重，以克为单位。5入库保存5.1种子储藏条件温湿度条件：长期库温度-18℃，相对湿度小于50％；中期库温度-4℃～4℃，相对湿度小于65％。储藏含水量：长期库5％～7％；中期库5％～9％。5.2结果回执种子入库保存后，管理人员应对每一供种者提供的每一批种质做一份入库结果报告，主要内容包括合格种子清单和不合格种子清单。对合格的种子，要向供种单位开具种质入库保存证明。不合格的种子要告知不合格原因并退回给提供者。6监测与更新6.1生活力检测间期种子储藏过程中两次生活力监测的间隔时间。长期库生活力监测间期如下：a)种子首次生活力监测间期为15a。b)种子第二次及随后监测间期：当发芽率高于85％以上时，每10～15年监测一次。当发芽率低于85％时，每5～10a监测一次。c)中期库生活力监测间期为5a。6.2监测前准备DB14/T1608—20185将要监测的种子从冷库中取出后存放到缓冲间2～3d后再放到干燥间，在干燥间放置3～5h后打开种子袋并数出需进行监测的种子，随后应尽快密封好并放回冷库。6.3发芽率测定以20粒种子为一组，重复2～3组高粱种子进行序列发芽试验，试验步骤与种子生活力监测方法相同。依据试验结果，按照计算出的序列分析界限值（见表2）做出决定：A-继续保存；B-继续测定；C-更新。参数：P0=0.85；p1=0.75；α=β=0.05，n=20。表2发芽试验结果序列分析的界限值试验种子种子发芽数20粒为一组继续保存继续测定更新120—12～200～1124037～4028～360～2736053～6044～520～4348069～8060～680～59510085～10076～840～756.4监测结果处理将监测结果输入计算机并建立监测数据库。若监测发芽率在更新标准范围内，则需安排种子进行繁殖更新。除此之外，当高粱种子在长期库贮存生活力或保存量出现下列情况之一时，也应当立即取出种子进行繁殖更新。中期库发芽率与保存量的更新标准参照长期库标准执行。——高粱种子发芽率降至起始发芽率水平的85％时。——活种子数目不足以进行4次繁殖所需的种子量时，即每份活种子数目低于800粒。——当种子样品在中期库绝种时。——同一批次发芽率降至更新临界值以下的份数占到该批次份数的50％时，该批次所有种子都应该进行更新。6.5繁殖更新依据监测结果，确定需要繁殖更新的高粱种子清单。将需繁殖更新的种子信息输入数据库，建立繁种更新数据库。繁殖更新的操作按“农作物种质资源整理技术规程”进行。7信息管理7.1基本信息每一份入库保存种子鉴定和来源的信息，该信息不能改变。一般由提供者提供。包括：全国统一编号（如有需提供），原保存编号，种质名称，学名，提供者，原产地，来源地等。DB14/T1608—201867.2采集信息在种质资源种植过程中的调查信息，主要由提供种子者提供。7.3管理信息每一份登记种质在入库处理过程中获得的一系列数据信息，以及供管理人员使用的有关数据信息。包括：入库初始信息、监测信息、更新信息、提取利用信息等。7.4计算机管理利用计算机建立种质库种质管理数据库，数据项由种质的基本信息、采集信息和管理信息组成。主要包括：库编号、全国统一编号（如有需记录）、库位号、作物名称、原产地、提供者、繁殖年份、入库保存日期、发芽率、发芽势、保存量、贮藏含水量、种子粒形、种子粒色、种子饱满度、种质整齐度等。7.5纸质资料档案管理将数据采集的原始记载表，分作物按库编号或入库时间顺序装订成册，建立原始记录资料档案管理。DB14/T1608—20187AA附录A（资料性附录）入库保存种质资源标准A.1送交种子标准a)种子应是当季繁殖的，发芽率一般要求85%以上；b)种子要清选干