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ICS65.020.01B05备案号:54496-2017DB22吉林省地方标准DB22/T2621—2017玉米耐盐碱性鉴定技术规程Protocolfortheidentificationofsaline/alkalinetoleranceinmaize2017-05-08发布2017-06-08实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—2017I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则编写。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位:吉林省农业科学院。本标准主要起草人:李晓辉、张春宵、金峰学、孙伟、李淑芳、李万军、刘文平、王吉艳、郭嘉、袁英、刘文国、路明、孙传波、刘艳芝。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—20171玉米耐盐碱性鉴定技术规程1范围本标准规定了玉米(ZeamaysL.)耐盐碱性鉴定的胁迫溶液配制、仪器设备、鉴定方法及耐盐碱性评价标准。本标准适用于玉米自交系和单交种的耐盐碱性检测,其他杂交种类型、群体和开放授粉品种及种质资源可参考本标准。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T3543.4-1995农作物种子检验规程发芽试验GB4404.1粮食作物种子第1部分:禾谷类3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1种子萌发率percentageofseedbourgeon种子从吸胀开始的一系列有序的生理过程和形态发生过程。在每24h提供8h光照条件下,25℃恒温培养后,露出胚芽种子数占种子总数的百分率。3.2耐盐/耐碱/耐盐碱性saline/alkaline/saline-alkalinetolerance玉米耐受非常规浓度的盐/碱/盐碱环境,仍能生长发育的特征和特性。3.3耐盐/耐碱/耐盐碱率percentageofsaline/alkaline/saline-alkalinetolerance盐/碱/盐碱胁迫条件下,待测材料对盐碱胁迫反应相关的生长发育指标与对照条件下相应指标比值的百分率。3.4耐盐/耐碱/耐盐碱性级别gradeofsaline/alkaline/saline-alkalinetolerance耐盐/碱/盐碱性分五级,从强到弱依次为:1级,高耐(HR,highlytolerant);2级,耐(R,tolerant);3级,中等(MR,moderatelytolerant);4级,敏感(S,susceptible);5级,高感(HS,highlysusceptible)。4胁迫溶液配制4.1盐胁迫溶液(200mmol/LNaCl)本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—2017211.7gNaCl加蒸馏水溶解,定容至1000ml即可获得200mmol/L的NaCl溶液。4.2碱胁迫溶液(100mmol/LNa2CO3)10.6gNa2CO3加蒸馏水溶解,定容至1000ml即可获得100mmol/L的Na2CO3溶液。4.3盐碱胁迫溶液(200mmol/LNaCl和25mmol/LNa2CO3的混合液)11.7gNaCl和2.65gNa2CO3加蒸馏水溶解,定容至1000ml即可获得混合盐碱胁迫溶液。注:苗期胁迫溶液配制使用等量的Hoagland培养液代替蒸馏水溶解上述试剂。5仪器设备5.1酸度计。5.2电子天平:感应为0.01g、0.001g。5.3微量移液器:规格分别为10L、20L、100L、200L、1000L,连续可调。5.4磁力搅拌器。5.5微波炉。5.6高压灭菌锅。5.7光照培养箱:温度控制范围10℃~40℃,光照强度控制在750Lux~1250Lux之间。6鉴定方法6.1芽期耐盐碱性鉴定6.1.1种子准备6.1.1.1种子质量应符合GB/T4404.1中对种子纯度、净度和水分的要求。种子为当年当季收获的充分成熟的饱满种子,且种子要大小一致,种子发芽率大于95%,不应包衣或拌种。6.1.1.2选取饱满一致供试玉米种子,10g/L的次氯酸钠消毒20min,灭菌蒸馏水冲洗3遍。30℃~35℃烘干10h,冷却至室温待用。6.1.1.3100粒种子为1次重复,共4次重复。6.1.2胁迫处理6.1.2.1采用纸床培养。6.1.2.2在发芽皿内进行,发芽纸吸足盐胁迫溶液、碱胁迫溶液或盐碱胁迫溶液后,沥去多余溶液,放置于发芽皿中,发芽纸与发芽皿间结合紧密、无气泡。6.1.2.3将种子均匀摆放在发芽纸上,种子间保持一定间距。6.1.2.4种子上加盖一张同样大小,吸足盐胁迫溶液、碱胁迫溶液或盐碱胁迫溶液的发芽纸,置光照培养箱中培养。每2d更换一次发芽纸。6.1.3对照处理培养方式除让发芽纸吸足蒸馏水外,其它均同6.1.2。6.1.4性状调查本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—20173将发芽皿放入光照培养箱中,在每24h提供8h光照条件下,25℃恒温培养,第2d、4d、6d和8d调查发芽种子数。6.1.5芽期耐盐/耐碱/耐盐碱率芽期种子萌发率按式(1)计算:%1001TsGerXXnd.................................(1)式中:nd——种子萌发率;XGer——在特定时间的种子萌发数;XTs——种子总数。芽期萌发指数按式(2)计算:825.0650.0475.0200.1ndndndndPI..............(2)式中:PI——萌发指数;nd——种子萌发率,nd2、nd4、nd6、nd8分别为第2、4、6和8d的种子萌发率。芽期耐盐/耐碱/耐盐碱率按式(3)计算:%1001cktPIPIGTI...............................(3)式中:GTI——芽期耐盐/耐碱/耐盐碱率;PI——萌发指数,下标t(tolerance)、ck分别表示盐/碱/盐碱胁迫条件和对照条件。6.2苗期耐盐碱性鉴定6.2.1种子准备30株幼苗为1次重复,共4次重复。其余同6.1.1。6.2.2样品准备6.2.2.1种子播种于装有蛭石的塑料钵(上口径9cm×高度9cm)中,每钵定苗3株,塑料钵整齐摆放托盘中。6.2.2.2在光照培养箱中,25℃恒温培养,相对湿度60%。6.2.2.3待种子发芽后,浇灌Hoagland培养液。每2d用预设浓度的Hoagland处理液浇灌,浇灌量为塑料钵中蛭石体积的二倍。注:Hoagland培养液配方见附录A。6.2.3胁迫处理本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—20174待幼苗长至三叶一心时,根据试验鉴定目的分别选用含有Hoagland溶液的盐胁迫溶液、碱胁迫溶液和盐碱胁迫溶液,每2d用预设浓度的Hoagland处理液浇灌,浇灌量为塑料钵中蛭石体积的二倍,以便将以前的累积盐分冲洗掉,以保持各处理液浓度的恒定。6.2.4对照处理除浇灌液为Hoagland溶液外,其它均同6.2.3。6.2.5性状调查盐/碱/盐碱胁迫处理7d后,观察苗情表现进行统计,见表1。表1耐盐/耐碱/耐盐碱胁迫处理下单株苗情分类苗情类别受害状况0生长正常,无受害症状1生长基本正常,全株几乎无萎蔫或叶缘蜷曲2全株1/4叶片萎蔫或叶缘蜷曲,叶色变黄3全株1/3叶片萎蔫或叶缘卷曲,叶尖、叶缘焦枯4全株1/2叶片萎蔫或叶缘卷曲,叶枯、叶落5全株枯死或接近死亡6.2.6苗期耐盐/耐碱/耐盐碱率苗期耐盐/耐碱/耐盐碱率按下公式(4)计算:100%××5tiiNNCSTI.................................(4)式中:STI——苗期耐盐/耐碱/耐盐碱率;Ci——苗情类别;Ni——每类苗情株数;5——最高苗情类别;Nt——检验样本总株数。6.3全生育期耐盐碱性鉴定6.3.1种子准备同6.1.1。6.3.2胁迫土制备6.3.2.1应选取符合GB/T3543.4-1995中4.3的土壤作为基质,将其烘干。6.3.2.2根据试验鉴定目的,参照附录B在烘干基质中加入适量的胁迫溶液,并补充水,保持土壤含水量为田间持水量的(65±5)%直至收获,即完成盐土、碱土和盐碱胁迫土的制备。6.3.3对照土制备本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—20175除在烘干基质中加水保持土壤含水量为田间持水量的(65±5)%直至收获外,其余同6.3.2。6.3.4试验设计6.3.4.1在体积约为30L(上径30cm、下径25cm、桶深33cm)的塑料桶内,每桶装入土20kg。6.3.4.2每桶施入纯N0.518g、P2O50.530g、K2O0.706g作底肥,在拔节期和大喇叭口期前2次各追施纯N0.518g。6.3.4.3旱棚内每桶播3粒种子,播种后浇水至有水渗出,出苗后每桶保留1株;对照和胁迫处理均15株幼苗为1次重复,3次重复。注:每公顷需施纯N200kg~240kg,P2O560kg~90kg,K2O90kg~110kg,氮肥的三分之一作底肥,三分之二作追肥;磷钾肥全部作底肥。6.3.5栽培管理根据试验要求适期播种。规范管理,同一项作业在同一天内完成。玉米抽雄前,所有参试品种(系)同时发生倒伏,可进行扶棵,少部分品种(系)发生倒伏,则不扶。及时防治玉米螟等病虫害。6.3.6收获计产成熟后每次重复随机选取5株收获,每份材料3次重复。用鲜籽粒烘干称重后,按14%标准含水量折算籽粒重量。6.3.7全生育期耐盐/耐碱/耐盐碱率如果待测材料较少,按公式(5)计算:2..1.2.1..1..1..TRCKRCKSTSTRTSTRCKRCKSTSYYYYYYYYYYWRTI.....(5)式中:WRTI——参试品种的全生育期耐盐/耐碱/耐盐碱率;YS.T——参试品种的耐盐碱处理产量;YS.CK——参试品种的对照处理产量;YR.CK——对照品种的对照处理产量;YR.T——对照品种的耐盐碱处理产量。如果待测材料较多,且为自交系和农家品种,按公式(6)计算:1..1..TMCKMCKSTSYYYYWRTI...........................(6)式中:WRTI——参试品种的全生育期耐盐/耐碱/耐盐碱率;YS.T——参试品种的耐盐碱处理产量;YS.CK——参试品种的对照处理产量;YM.CK——所有材料的对照处理产量;YM.T——所有材料的耐盐碱处理产量。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—20176如果待测材料较多,且为杂交种,按公式(7)计算,该耐盐/耐碱/耐盐碱率高的为胁迫和对照条件下均能高产的材料。2...1.T.1-..1-..CKMCKSTSCKMMCKMCKSTMTSYYYYYYYYYWRTI..........(7)式中:WRTI——参试品种的全生育期耐盐/耐碱/耐盐碱率;YS.T——参试品种的耐盐碱处理产量;YS.CK——参试品种的对照处理产量;YM.CK——所有材料的对照处理产量。YM.T——所有材料的耐盐碱处理产量。7耐盐碱性评价标准芽期、苗期和全生育期的耐盐/耐碱/耐盐碱性评价应分别符合附录C中表C.1、表C.2及表C.3的规定。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2621—20177AA附录A(资料性附录)Hoagland培养液配方Hoagland培养液配方见表A.1。表A.1Hoagland培养液配方种类营养成分浓度(μg/L)Ca(NO3)2•4H2O9.45×105KNO35.06×105NH4NO38.0×104KH2
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