DB22T 2529-2016 紫穗玉米花青素测定 分光光度法

ICS65.020.20B05备案号：54206-2017DB22吉林省地方标准DB22/T2529—2016紫穗玉米花青素测定分光光度法Determinationofanthocyanidinsinpurplecorn—Spectrophotometry2016-12-09发布2017-03-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2529—2016I前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林省农业科学院。本标准主要起草人：魏春雁、张之鑫、武巍、杨建、王巍巍、王莹、张国辉、樊慧梅、刘笑笑、马虹。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2529—20161紫穗玉米花青素测定分光光度法1范围本标准规定了紫穗玉米花青素含量分光光度测定方法。本标准适用于紫穗玉米中花青素含量的测定。本标准中花青素的定量限为0.00110g/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1花青素anthocyanidins存在于植物中的一类类黄酮有机化合物，又称花色素。4原理样品经盐酸-乙醇混合溶液提取，离心分离，花青素类化合物在酸性条件下呈红色，在波长520nm下有最大吸收，用可见分光光度计测定吸光度，与标准系列比较定量。5试验条件常温条件下。6试剂或材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水符合GB/T6682规定三级水。6.1试剂6.1.1盐酸：36%～38%。6.1.2无水乙醇。6.1.3盐酸-乙醇混合溶液：移取8.0mL浓盐酸，用无水乙醇（6.1.2）定容至1000mL。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2529—201626.2标准品矢车菊素（CAS：528-58-5）：纯度≥98%。6.3标准溶液配制6.3.1标准储备液：准确称取矢车菊素0.01g，精确至0.0001g，置于50mL容量瓶中，用盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）定容，浓度为200mg/L，4℃条件下，贮存于密闭棕色试剂瓶中避光保存。6.3.2系列标准使用溶液：分别移取0.00mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL标准储备液（6.3.1）于50mL容量瓶中，用盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）定容至刻度，浓度分别为0.0mg/L、0.4mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L。7仪器设备7.1可见分光光度计。7.2分析天平：感量±0.1mg。7.3超声波清洗器：超声频率40KHz。7.4离心机：转速≥10000r/min。7.5粉碎机：转速≥10000r/min。8样品样品风干处理至水分含量在15%以下，取籽粒，粉碎后，全部通过0.25mm孔径筛，密封、避光、冷藏。9试验步骤9.1样品溶液制备称取样品（称量范围在0.2000g～3.0000g之间，具体称样量的确定参考附录A），置于100mL三角瓶中，加入40mL盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3），置于超声波清洗器（7.3）中，30℃提取30min，将提取液转移到100mL容量瓶中；向三角瓶中再加20mL盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3），30℃超声提取10min，提取液转移到同一容量瓶中，再重复1次，合并提取液到容量瓶中，以盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）定容，摇匀。分取10mL，10000r/min离心10min，吸取上清液，待测。9.2标准曲线测定取系列标准溶液于比色皿中，以盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）为空白，在520nm波长下测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。9.3样品溶液测定取样品溶液于比色皿中，以盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）为空白，在520nm波长下测定吸光度。注：比色操作需要在样品溶液制备完成后的4h内完成。10试验数据处理本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2529—2016310.1样品中花青素含量按式（1）计算：1000CVXm…………………………………………（1）式中：X—样品中花青素含量（以矢车菊素计），单位为克每千克（g/kg）；C—从标准曲线上得到的含量，单位为毫克每升（mg/L）；V—定容体积，单位为毫升（mL）；m—试样的质量，单位为克（g）；1000—mL与L换算系数。10.2平行测定结果用算术平均值表示，按照GB/T8170规定，结果保留三位有效数字。11精密度11.1重复性在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于算术平均值的5%。11.2再现性在再现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于算术平均值的10%。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2529—20164AA附录A（资料性附录）样品参考称样量A.1样品参考称样量见表A.1表A.1花青素含量g/kg参考称样量g≤0.5003.00000.500~2.001.0000≥2.000.2000_________________________________本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印