DB32∕T 2902-2016 大花蕙兰组织培养技术规程

ICS65.020.20B05备案号：49031-2016DB32江苏省地方标准DB32/T2902-2016大花蕙兰组织培养技术规程TechnicalregulationforrapidpropagationinvivoofCymbidiumhybrid2016-03-10发布2016-04-10实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2902-2016I前言本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写规则》的规定编制。本标准提出单位：由江苏省中国科学院植物研究所。本标准起草单位：江苏省中国科学院植物研究所、常州祝庄园艺有限公司。本标准主要起草人：顾永华、郑玉红、李丕睿、李晓敏、韩福贵、李和平、杨军、高福洪。DB32/T2902-20161大花蕙兰组织培养技术规程1范围本标准规定了大花蕙兰组织培养技术要求。本标准适用于大花蕙兰的组培快繁。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。3母株选择选择具该品种典型性状、生长健壮且无病虫害的母株。4外植体4.1选择剪取长度5cm～8cm的幼芽。4.2消毒在洗涤剂溶液中振荡洗涤20min后，在无菌条件下切去芽的上半段，剥去最外层的（1～2）枚叶，在95％酒精中浸泡30s，再剥去（2～3）片叶，露出顶芽和侧芽。用0.2％的升汞浸泡15min～20min后，无菌水冲洗（6～8）次，吸水纸吸干表面水分。在1％次氯酸钠中浸泡1min后取出，无菌水冲洗约10min。5原球茎诱导诱导培养基：MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L+活性炭0.5g/L，pH5.8。将顶芽和侧芽在75％酒精中浸泡15s，无菌水冲洗数次，切成小块，放入诱导培养基。培养温度为（25±1）℃，光照强度为1500lx~2000lx，光照时间为12h～15h。待幼苗长至3cm～4cm时，切除顶部苗，将原球茎纵切成3mm～4mm厚的薄片，将薄片切面向下放入诱导培养基中培养。6继代增殖继代培养基：1/2MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+活性碳0.5g/L，pH5.8。将原球茎去芽后接种于继代培养基。培养温度为（25±1）℃，光照强度为1500lx~3000lx，光照时间为12h～15h。40d～50d后继代1次。7生根培养DB32/T2902-20162生根培养基：1/2MS+NAA1.0mg/L，GA31.0mg/L+活性碳1.0g/L，pH5.6。当继代苗长至2cm～4cm高时切下接种到生根培养基，培养温度为25℃，光照强度为3000lx~5000lx，光照时间为12h～13h。8炼苗当生根苗的不定根长至1.2cm左右，将组培瓶从培养室取出，在缓冲间驯化3d～5d后移入温室，遮荫60%，10d～15d后从瓶中取出，洗净根部培养基后用40%多菌灵可湿性粉剂（500～800）倍液浸泡20min。9移栽9.1基质将干白苔藓放入多菌灵1000倍液中浸泡半天，取出甩干。9.2容器采用圆形口、尖底的5cm×11cm穴盘。旧穴盘需消毒后才可使用。9.3方法将白苔藓整理成条状，裹住假鳞茎和根系，卷成球状，根部向下压入穴盘。10移栽后管理放置于温度18℃～28℃，光照5000lx左右，湿度70％～85％的环境中。每7d～10d喷1次多菌灵1000倍液。15d后将光照提高至15000lx，每隔7d～10d喷施可溶性完全肥料（N:P:K=1:1:1）1000倍液1次。_________________________________