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ICS65.020.20B22备案号:47705-2015DB32江苏省地方标准DB32/T2791-2015水稻品种南粳9108AjaponicaRiceVarietyNanjing91082015-10-20发布2015-12-20实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2791-2015I前言本标准按GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》编制。本标准由江苏省农业科学院提出。本标准起草单位:江苏省农业科学院。本标准主要起草人:姚姝、陈涛、赵春芳、赵庆勇、周丽慧、赵凌、朱镇、张亚东、王才林。DB32/T2791-20151水稻品种南粳91081范围本标准规定了南粳9108的亲本来源、品种类型、产量及产量结构、全生育期、适宜种植方式、生物学特性和暗胚乳突变基因和香米基因的分子验证。本标准适用于江苏省苏中及宁镇扬丘陵地区中上等肥力条件下种植的南粳9108。2亲本来源母本为武香粳14,父本为关东194,经系谱法选育而成。3品种类型迟熟中粳稻。4产量及产量结构4.1产量650kg/亩左右。4.2产量结构移栽稻每亩有效穗(19~20)万,每穗总粒数(140~150)粒,结实率90%,千粒重(26~27)g;机插稻每亩有效穗(21~22)万,每穗总粒数(130~140)粒,结实率90%,千粒重(25~26)g。5全生育期手栽秧(149~154)d,机插秧(145~150)d。6适宜种植方式适合于苏中及宁镇扬丘陵地区机插、抛秧或人工移栽。7生物学特性及特征7.1茎叶性状DB32/T2791-20152表1茎叶性状序号性状性状描述观察时期1芽鞘色绿色3叶期前2叶鞘色(基部)绿色幼苗期3叶片颜色深绿色分蘖期4倒数第二叶叶片长度(40.1~50.0)cm抽穗期5倒数第二叶叶片宽度(1.5~2.0)cm抽穗期6倒数第二叶叶尖与主茎夹角直立,<15°抽穗期7倒数第二叶叶耳色浅绿色抽穗期8剑叶叶片长度(25.1~35.0)cm灌浆期9剑叶叶片宽度(1.5~2.0)cm灌浆期10剑叶叶片角度直立,<15°灌浆期11叶片曲度挺直灌浆-成熟期12基茎粗(0.7~1.0)cm成熟期13茎秆角度直立<10°成熟期14节间数6个(手栽),(5~6)个(机插)成熟期15主茎叶片数16~17(手栽),15~16(机插)抽穗期16主茎高度(95~100)cm成熟期7.2穗部和籽粒性状表2穗部和籽粒性状序号性状性状描述观察时期1柱头颜色白色开花期2花药颜色黄色开花期3颖尖色秆黄色成熟期4芒分布及长短无成熟期5穗长(16~18)cm成熟期6穗型半直立成熟期7颖壳色黄色成熟期8谷粒长度(7.2~7.5)mm成熟期9谷粒宽度(4.0~4.2)mm成熟期10谷粒形状阔卵形成熟期7.3品质性状DB32/T2791-20153表3品质性状序号性状性状描述观察时期1糙米率>85%收获后(1~3)个月2精米率>75%收获后(1~3)个月3整精米率>70%收获后(1~3)个月4长宽比1.7~1.8收获后(1~3)个月5垩白率<10%收获后(1~3)个月6垩白度<3%收获后(1~3)个月7透明度2级,米粒干燥后呈云雾状收获后(1~3)个月8碱消值6级收获后(1~3)个月9胶稠度(100~120)mm收获后(1~3)个月10直链淀粉含量(9.5~12.0)%收获后(1~3)个月8抗逆性表4抗逆性状序号性状性状描述观察时期1白叶枯病感,3级~5级抽穗-成熟期2苗期稻瘟病感,5级苗期3穗颈瘟感,3级抽穗-成熟期4纹枯病感抽穗-成熟期5条纹叶枯病抗~高抗苗期6倒伏抗成熟期9暗胚乳突变基因和香米基因的分子验证稻谷的暗胚乳基因和香米基因的分子检测方法见附录A。DB32/T2791-20154AA附录A(资料性附录)暗胚乳突变基因和香米基因的分子检测方法南粳9108是含有暗胚乳突变基因Wx-mq和香米基因fgr的水稻品种,可针对这两个基因进行分子标记检测,辅助辨别品种的真伪。A.1Wx-mq基因四引物PCR分子标记检测A.1.1引物PCR分子标记序列稻谷出苗后在三叶期按单株提取基因组DNA,利用四引物PCR标记进行分子检测。正向外引物(Wx-mq-O-F)序列为5'-ATGTTGTGTTCTTGTGTTCTTTGCAGGC-3',反向外引物(Wx-mq-O-R)序列为5'-GTAGATCTTCTCACCGGTCTTTCCCCAA-3',正向内引物(Wx-mq-I-F)序列为5'-GGGTGAGGTTTTTCCATTGCTACAATCG-3',反向内引物(Wx-mq-I-R)序列为5'-GTCGATGAACACACGGTCGACTCAAT-3'。A.1.2PCR反应体系。20μLPCR反应体系包括:DNA(10ng/μL)2.0μL,Primer(4pmol/μL)2.0μL,10×PCRBuffer(含MgCl2)2.0μL,dNTP(2.5mmol/L)0.4μL,Taq酶(5U/μL)0.5μL和ddH2O13.1μL。PCR反应在MJResearchPTC-200热循环仪上进行,反应程序如下:94℃下预变性5min,每个循环94℃下变性30s,65℃下退火30s,72℃下延伸1min,共35个循环,最后72℃下延伸10min,4℃下保存待用。A.1.3产物分析反应产物在质量比浓度为1.5%的琼脂糖凝胶上电泳,经溴化乙锭染色并于凝胶成像系统下观察分析。利用Wx-mq基因四引物分子标记扩增水稻品种的基因组DNA,南粳9108标准稻谷能同时扩增出439bp和292bp的DNA条带,而非南粳9108标准稻谷则同时扩增出439bp和200bp或同时存在439bp、292bp和200bp的DNA条带。(M:分子量标准;2、4、5、6、7、8、9、10为南粳9108稻谷标准带型,1、3为非标准带型。)A.2香米基因fgr的分子标记检测A.2.1fgr标记序列100bp250bp500bp1000bp2000bpM12345678910439bp292bp200bp750bpDB32/T2791-20155将稻谷进行幼苗DNA提取,利用InDel标记进行分子检测。正向引物(InDel-E2-F)序列为5׳-GGGAGGCGCTGAAGAGGA-3׳,反向引物序列(InDel-E2-R)序列为5׳-GGGTAGTCACCACCCTACCTTG-3׳。A.2.2PCR反应体系。20μLPCR反应体系包括:DNA(10ng/μL)2.0μL,Primer(4pmol/μL)2.0μL,10×PCRBuffer(含MgCl2)2.0μL,dNTP(2.5mmol/L)0.4μL,Taq酶(5U/μL)0.5μL和ddH2O13.1μL。PCR反应在MJResearchPTC-200热循环仪上进行,反应程序如下:94℃下预变性5min,每个循环94℃下变性30s,55℃下退火30s,72℃下延伸1min,共35个循环,最后72℃下延伸10min,4℃下保存待用。A.2.3产物分析反应产物在8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳,经硝酸银染色并于凝胶成像系统下观察分析。利用fgr基因InDel分子标记扩增水稻品种的基因组DNA,南粳9108标准稻谷能扩增出100bp的DNA条带,而非南粳9108标准稻谷则扩增出107bp或同时具有100bp和107bp的带型。(M:分子量标准;1、2、5、6、7、8、10为南粳9108稻谷标准带型,3、4、9为非标准带型。)_________________________________M1234567891050bp100bp150bp107bp100bp
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