DB36T 765-2013 十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定技术规范

ICS65.020B16备案号：40669-2014DB36江西省地方标准DB36/T765—2013十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定技术规范TheTechniqueStandardsofEvaluatetheClubrootResistanceofCruciferaeVegetable2013-12-25发布2014-02-01实施江西省质量技术监督局发布DB36/T765—2013I目次前言................................................................................II 1范围..............................................................................1 2术语和定义........................................................................1 3鉴定方法..........................................................................1 4病情调查..........................................................................2 5抗病性评价........................................................................2 附录A（资料性附录）十字花科蔬菜根肿病症状与发生规律................................4 附录B（规范性附录）根肿病接种体制备、蔬菜根肿病严重度分级标准、病情指数计算方法....5 DB36/T765—2013II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由江西省农科院提出。本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人：黄瑞荣、黄蓉、华菊玲、胡建坤、闵跃中、梁玉勇。DB36/T765—20131十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定技术规范1范围本标准规定了十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定方法及其抗病性评价标准。本标准适用于江西省十字花科蔬菜品种对根肿病人工接种和田间病圃抗性鉴定和评价。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1自然诱发(naturalinduction)在适宜病害发生的环境和病原物存在的条件下，病原物借自然因素直接或间接传播到寄主植物或器官上，使其发病。2.2人工接种(artificialinoculation)采用人工方法将病原物直接或间接接种到寄主植物的种子或根部，使其发病，并依据相关的抗性评价标准，来区分品种的抗病性。2.3对照品种(controlvariety)为了保证抗性鉴定结果的准确性、可靠性，减少年度间和环境条件差异，选择抗性水平较稳定的品种作为抗性鉴定试验的对照品种。3鉴定方法3.1田间病圃鉴定3.1.1病圃设置在十字花科根肿病常发区，选择地势平坦、土壤肥沃、肥力均匀、排灌方便、土壤pH值﹤6.5的根肿病连年发生的田块。3.1.2对照品种以小白菜“苏州青”和大白菜“青杂改良3号”为田间病圃和人工接种鉴定抗病性的感病对照品种，以每批次鉴定的对照品种的抗性结果来评判各参鉴品种的相对抗性。3.1.3整地、播种与间苗DB36/T765—20132采用人工或化学除草方法清除田间杂草。施足基肥，腐熟农家肥1000kg/667㎡～1500kg/667㎡，复合肥40kg/667㎡，机耕翻地，辅助人工精细整地。开沟做畦（垄），畦宽1.4m，畦沟底宽0.40m，沟深0.25m。播种时间在每年的4月中下旬～5月中下旬/8月下旬～10月上旬，以8月下旬～10月上旬播种鉴定时机最好。分小区，按畦播种，随机区组排列。各品种每小区播2行，每行播10穴，每穴播3粒～5粒种子，按畦面的宽度方向条播，重复3次。播种后在畦面上撒1cm厚的田间病土盖种。菜苗长出1片～2片真叶后间苗，每穴保留菜苗3株。3.1.4病圃管理种子出苗后，如晴天日最高气温28℃以上，可在11:00～15:00时采用遮阳网遮阳。前期苗床用洒水壶或喷雾器喷水保湿，中后期沟灌沟排，保持床土湿润。菜苗长至25d～30d，667㎡施尿素3kg。用防虫网预防虫害，辅助杀虫剂除虫。禁用杀菌剂防病。3.2人工接种鉴定3.2.1床土配制取根肿病常发、重发田块的带菌土壤，按2/3的带菌土壤与1/3含蛭石的营养土，加适量的清水混配均匀，调节土壤含水量至60%。3.2.2床土装盘床土置入60cm×40cm×15cm的秧盘，用土量以装平秧盘为准。每盘加入20g尿素，30g复合肥，搅拌均匀。3.2.3接种在秧盘内的床土中，制作直径3cm、深3cm的孔穴，每盘等距离打孔8排，每排5穴，计40穴。穴内填充配制的菌土(附录B)。供鉴种子菌液(附录B)浸种5h后播种到菌土内。喷清水保持盘中土壤湿润。3.2.4苗盘管理种子发芽出苗后，保持秧盘土壤湿润。出苗后5d～7d间苗，每穴保留菜苗2株～3株。苗龄25d，每盘追施尿素2g（兑水配成溶液）。防虫网防虫，辅助使用杀虫剂杀虫。4病情调查4.1调查时间以苗龄45d～50d进行病圃鉴定与人工接种鉴定病情调查。4.2调查方法与数据处理调查各参鉴品种的所有菜苗，检查每株菜苗根部病情（症状识别见附录A），按“0级～9级”分级标准（见附录B）记载病情,统计病株率和病情指数（见附录B）。5抗病性评价5.1评价标准DB36/T765—20133蔬菜品种的抗病性以田间病圃和人工接种两种方法鉴定的结果进行综合评价；以田间病圃单一方式鉴定品种的抗性，判定抗病品种应有不少于2次或不同年份的田间鉴定结果。以对照品种的病株率不低于50%，且5级以上的病株占总病株数的50%以上，为病圃和人工接种鉴定结果有效性标准。5.2抗性表型划分根据调查统计的各品种的病情指数，按照表1评定各参鉴品种对根肿病的抗性结果。表1蔬菜品种抗根肿病评价标准抗性表型病情指数高抗（HR）x≤5抗（R）5﹤X≤10中抗（MR）10﹤X≤20中感（MS）20﹤X≤30感（S）30﹤X≤50高感（HS）X﹥50DB36/T765—20134AA附录A（资料性附录）十字花科蔬菜根肿病症状与发生规律A.1根肿病症状蔬菜根肿病因病菌危害蔬菜根部导致主根、侧根肿瘤而影响植株正常生长。条件适宜时，蔬菜整个生长期均可发生。苗期感染，病害初始，植株地上部无明显症状，但植株生长逐渐减缓，新叶生长迟滞，植株矮小，基部叶片常在中午时出现萎蔫，早晚恢复正常；病害后期，植株生长不良，基部叶片变黄、萎蔫成失水状，严重时全株枯死。感病植株地下部分的根部形成肿瘤，肿瘤的形状、大小因着生部位不同而有较大差异。一般主根上的肿瘤个体大而数量少，肿瘤多靠近上部，甚至露出土表，球形或近球形；侧根上的瘤多呈圆筒形、手指状；须根上的瘤多串生，数量可多达20余个。肿瘤初期表面光滑，后期常发生龟裂、粗糙，易被其它杂菌侵入而引起根部组织腐烂。A.2根肿病发生基本规律病原菌为芸薹根肿菌（PlasmodiophorabrassicaeWoronin），在分类上属于根肿菌目、薹根肿菌属真菌。土传病害，借雨水、灌溉水、农事操作和种子、菜苗调运等方式扩散蔓延。病原菌专性寄生，寄主范围广，几乎为害所有十字花科植物。病菌以休眠孢子在土壤中或附着在种子表面度过不良环境，在有水的条件下萌发产生游动孢子，由根毛侵入寄主细胞内，刺激薄壁细胞分裂、膨大，致根系形成肿瘤，影响根的正常生理功能，导致根系生长和吸收能力下降，植株生长发育受阻，甚至枯萎死亡。条件适宜时可四季发生。干旱年份发病轻，十字花科作物连作田及酸性土壤发病重。DB36/T765—20135BB附录B（规范性附录）根肿病接种体制备、蔬菜根肿病严重度分级标准、病情指数计算方法B.1根肿病接种体制备B.1.1菌液把保存于-20℃冰柜中的根瘤取出，解冻后置入捣碎机中加适量清水捣碎。两层纱布过滤，除去根部纤维组织，离心机离心浓缩，用水稀释配制成悬浮液，于显微镜下采用血球计数板法计数，调节孢子浓度至2.5×106孢子/ml备用。B.1.2菌土取孢子浓度2.5×106孢子/ml的菌液，配成含水量60%、孢子量为1×106孢子/g的接种体“菌土”，密封48h备用。B.2病害严重度分级标准0级：根系正常，无肿瘤；1级：侧根有小肿瘤；3级：主根肿大，其直径小于2倍茎基部；5级：主根肿大，其直径是茎基部的2～3倍；7级：主根肿大，其直径是茎基部的3～4倍；9级：主根肿大，其直径是茎基部的4倍以上或肿大的根部出现变黑。B.3病情指数计算方法病情指数=[∑(各级病株数×相对病级数值)/调查总株数×最高病级数值]×100........(B.1)_________________________________