DB32∕T 2201-2012 瓶栽金针菇工厂化生产技术规程

`ICS65.020.20B39备案号：36401-2013江苏省地方标准DB32DB32/T2201-2012瓶栽金针菇工厂化生产技术规程Bottlecultivationmushroomfactoryproductiontechnologyregulation2012-12-28发布2013-02-28实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2201-2012I前言金针菇是当今高效农业生产的选择品种之一，其栽培方式分为瓶栽和袋栽，为规范瓶栽金针菇工厂化生产，提高金针菇产量和质量，特制定本标准。本标准附录A为资料性附录。本标准的编写按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》的规定进行。本标准由江苏省质量技术监督局提出。本标准起草单位：江苏省扬州碧阳菌业有限公司、广东省珠海市绿阳菌业有限公司、仪征质量技术监督局、仪征市农业委员会起草。本标准起草人：邰定国、陈致东、陈志松、李磊、汤爱民、翟付凤、殷朝珍。DB32/T2201-20121瓶栽金针菇工厂化生产技术规程1范围本规程规定了瓶栽金针菇工厂化生产的产地环境、技术要求、生产设备和技术、采收和销售要求等。本规程适用于瓶栽金针菇周年工厂化生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB5749生活饮用水标准GB7096食用菌卫生标准GB7718预包装食品标签通则GB9687食品包装用聚乙烯成型品卫生标准NY/T528食用菌菌种生产技术规程NY/T749绿色食品食用菌农业行业标准NY/T5099无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求NY/T5294无公害食品设施蔬菜产地环境条件3场地环境3.1厂址选择应符合NY/T5294的规定，厂房周围无工业三废，远离村庄，交通便利，水源充足，无污水和其他污染源。3.2生产用水应符合GB5479的规定。3.3原材料使用安全技术要求符合NY/T5099的规定。4厂房布局厂区布局包括原料存放区、装瓶车间、无菌接种车间、菌种车间、养菌车间、冷库栽培区、包装车间、挖瓶车间、成品仓库、生活区和办公区等。各区和车间按生产操作流程近距离链接、便于流水作业。同时各区之间有一定的间隔，并在厂区周围和各车间之间进行适当绿化。4.1原材料存放区DB32/TXXX-20122地势要高，应防水防潮，交通便利。同时原料仓库应适当远离接种区、养菌区和栽培区。4.2装瓶车间装瓶车间要与灭菌炉、原材料存放区靠近，并且要足够宽敞，便于机械操作。4.3预冷车间预冷室应紧靠接种室，并安装万级净化装置、紫外线消毒设备、冷冻设备、抽湿设备等，要求负载冷却温度在15℃以下，湿度在70%以下。4.4无菌接种车间接种室应按万级净化要求建设，超净接种棚应按百级净化要求建设，同时要保证接种室温度在20℃以下，湿度在70%以下。4.5菌种生产区应符合NY/T528的规定。4.6养菌车间和栽培车间按冷库标准建设，应采用保温材料建造冷库，建议用阻燃性的聚胺脂保温材料。一般以10～15间并列一排，两排对面开门，中间间隔(4～5)m的操作过道，上方应能防风防雨，过道两侧通风顺畅。冷库背面与其他建筑应有2m以上的间距，四周应建排水渠和防虫渠，冷库的前面应开启进风窗和进风通道，后背应有排风卸压口。冷库建议大小为：长约(8～10)m，宽约(5～6)m，高约(5～6)m。冷库内设固定或活动菇架，固定菇架宽约(0.8～1)m（根据瓶筐尺寸设定），长度与冷库相当，床架8～9层，每层间距为0.5m左右，相邻两组架之间应设操作通道，每条通道宽约(0.8～1)m。活动菇架根据生产工艺情况设定。菇架顶层距离房顶应有1m以上空间，房顶平整，如需设房梁应采用吊顶。每间库房应配置外风通风系统、内风循环系统、制冷系统、湿度控制系统等设施，满载的情况下致冷的最低温度应能达到4℃以下。养菌房要求室内负载情况下温度能保持在(15～16)℃，室内CO2的浓度在3000mg/L以下，还应安装臭氧消毒设备、空气净化设备等。4.7包装车间和成品冷库包装车间墙壁应贴瓷砖，地面应水平光滑，不起沙。房间安装制冷系统，保证工作时室内温度在16℃以下。成品库应按冷库标准建设，并安装制冷设备，保证满负荷时温度能达到(2～3)℃。5生产工艺及流程生产工艺流程：原料储备配料装瓶灭菌冷却接种培养搔菌出菇采收包装挖瓶栽培种原种母种其中菌种生产约为(50～60)d，生产瓶从菌丝培养至采收完毕约为(55～60)d。6生产技术6.1菌种生产DB32/T2201-20123菌种生产应符合NY/T528的规定，并根据市场需要选用高产优质菌种。菌种制作一般分三级菌种，即母种、原种、栽培种。6.1.1母种生产6.1.1.1用金针菇菇体组织分离或孢子弹射培养出来的菌丝，经过一至二次纯化复壮后再转管得到母种。6.1.1.2母种制作，一般用试管分装，试管为18mm×180mm或20mm×200mm，每管分装约(15～20)ml制作好的培养基，然后用棉塞塞住试管口，放入123℃的高压蒸汽灭菌炉中灭菌约30min。开盖待冷却至60℃后排成斜面，斜面约占整个试管的2/3处。6.1.1.3母种培养基，参照附录A.1.1，一般使用马铃著葡萄糖琼脂培养基。6.1.1.4母种灭菌接种后应置于(20～22)℃的恒温箱内培养，培养期约为(10～15)d，培养期间应定期检查，凡生长异常或有杂菌感染的试管应及时剔除和销毁。6.1.1.5优良母种在适温下菌丝生长期约为(10～12)d，菌丝呈白色、无其他杂色，菌丝浓密、边缘整齐，气生菌丝旺盛，爬壁能力强。6.1.1.6母种转接次数一般为三至四次，用不完的试管需放入冰箱内保藏，保藏温度约为(2～4)℃，保藏时间以3～6个月为宜。6.1.2原种生产6.1.2.1将生长正常的母种扩大在较大容器中，即为原种。6.1.2.2原种一般使用750ml的菌种专用小口玻璃瓶，能耐125℃以上的高温。玻璃瓶一般为无色透明，便于检查菌种生长是否正常。6.1.2.3原种培养基的制作、分装、灭菌、及冷却接种。原种培养基参照附表A.2.1，一般采用木屑麦皮培养基，水份为63%左右。每瓶装料约600g，用小铲压平料面，并在中间打一个直径为20mm的小孔，然后放入123℃左右的高压灭菌炉中灭菌约40min，冷却后在料面和洞内各接一块金针菇母种。6.1.2.4接种后的原种放置于(20～22)℃的恒温培养房中培养20d左右，菌丝就可长到瓶底。其间每隔(3～5)d应定期检查一次，凡生长异常或有杂菌感染的菌瓶，应及时剔除和销毁。6.1.2.5优良原种的指标为：菌丝生长速度正常，不会太快或太慢，菌丝生长粗壮，致密，边缘整齐，表面气生菌丝浓密均匀，菌丝颜色雪白，无其它杂色或异常现象。6.1.3栽培种生产6.1.3.1将已生长良好的原种再扩接至专用的塑料瓶中，进行扩大培养，即生产栽培种。6.1.3.2栽培容器的选择：栽培种的生产既要便于菌种检查工作，又要能够在接种机上进行自动化接种，因此，所需的容器应为无色透明，同时也应为不宜破碎的广口瓶，目前生产上一般选用容积为(1100～1200)ml、口径为(70～80)mm的无色聚丙烯食用菌专用塑料瓶。6.1.3.3栽培种培养基：参照附录A.2.2。6.1.3.4栽培种的培养、检查、判断指标等参照原种。6.2生产瓶生产6.2.1原料的准备材料选择符合NY/T5099的要求。适合金针菇生产的原材料有木屑、棉籽壳、玉米芯、甘蔗渣、米糠、麦皮等。6.2.2配料DB32/TXXX-20124配方比例参照附录A.3。将所需的原材料按配方比例和要求准确称量和混合。6.2.3拌料装瓶将配制好的培养料加水搅拌，混合均匀，并将含水量及PH值调到要求范围内。然后将已搅拌好的培养料放入装瓶机内装瓶。每瓶（按目前的1100ml～1200ml）装料800g左右，要求每瓶料松紧一致、料面平整、重量均匀、料面高度离瓶口约20mm，并用打孔机在中间打一个或多个小孔。然后盖好瓶盖，放入灭菌炉灭菌。6.2.4灭菌采用高压灭菌炉，灭菌要求：灭菌温度为(122～125)℃，灭菌压力为(0.12～0.14)MPa，保温约60min。6.2.5冷却培养瓶灭菌完毕后，推入预冷室冷却，将瓶料温冷却至20℃以下。6.2.6接种当瓶料温冷却至20℃后，就可推入接种室内接种，接种要求按NY/T528标准中4.7.8的规范进行操作。每瓶接种量为(15～20)g，接种完毕应适当振动，让瓶料洞内掉入少量菌种。接种时应严格按无菌操作规程操作。6.2.7菌丝培养6.2.7.1将已接种的料瓶轻轻推入培养室，并堆叠整齐，每排瓶之间应留有20cm左右的间隙，保证室内风循环顺畅。每隔一定的距离还应留有人行通道，方便查看菌丝生长情况。6.2.7.2将培养室温度控制在(15～17)℃，湿度控制在75%以下，并打开自动通风装置，进行闭光培养。培养的前10d通风量可以少一点。15d以后，菌丝生长旺盛，此时的通风量应逐渐加大。6.2.7.3培养约28d以后，菌丝基本长满菌瓶，此时便可进行搔菌。6.2.8搔菌用专用搔菌机进行搔菌，搔菌时要求料面平整、深浅一致、冲刷干净、表面无散料，并补水15-20ml。6.2.9出菇管理6.2.9.1催蕾将室内温度调至(15～16)℃，湿度调至(90～95)%，并开启自动换气系统、自动加湿系统、室内风循环系统等，保证室内温度和湿度均匀，并保证室内CO2浓度在3000mg/L以下。大约(3～4)d以后，瓶料面就会长出鱼籽状的菇蕾。6.2.9.3驯化当菌瓶现蕾后，将室内温度逐步降至(8～10)℃，湿度降至(80～85)%，适当加大室内风循环量，并给予适量的光照剌激，让菇蕾分化成幼菇，并生长整齐。6.2.9.4抑制当菇体长出瓶口以后，将室内温度控制在(4～5)℃，湿度控制在(85～90)%。并适当光照和通风，让菇体整齐生长。6.2.9.5包胶片DB32/T2201-20125大约抑制(4～5)d后，当菇体长出瓶口约(30～40)mm时，就需包胶片。6.2.9.6伸长将库房温度保持在(6～8)℃，湿度保持在85%左右，不要通风。如菇体不整齐，可适当照光，促使菇体整齐生长。7采菇包装7.1采菇当菇体长出胶片约(10～20)mm，菇体长度约为(150～170)mm，菇帽直径在(8～12)mm时，就可进行采收。采收时要求水份含量≤88%。7.2包装7.2.1鲜金针菇产品应符合GB7096的规定，包装袋应符合GB9687的要求。7.2.2大包装：将采收下来的菇削去菇根，然后根据菇体质量分级装入专用塑料袋中。每包菇称重2.5kg，然后抽气或减压排出里面的空气，并用塑料绳将袋口绑紧。将菇袋叠放进硬质纸板箱中，每箱装8袋，菇净重20kg。7.2.3小包装：每包称重150g或200g，机械挤压出里面的空气后封口，按每箱5kg或10kg装入专用硬质纸箱中。8金针菇的运输和贮藏应在(4～10)℃条件下运输，运输工具应干净、卫生，不得与有毒有害物品、鲜活动物混装，运输途中防日晒、防雨淋。应选择干燥、避光、洁净处贮藏，储存温度为(0～5)℃，不可与有毒有害物品及鲜活动物一起存放。储存时间约为(7～10)d。9生产档案金针菇生产过程中的每道环节必须有生产记录并建档备查，资料保存期二年。DB32/TXXX-20126附录A（资料性附录）金针菇常用培养基及基配方A.1母种培养基A.1.1常规转管培养基（PDA培养基）:马铃薯200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，水1000ml，PH值自然。配制方法：将马铃薯去皮称量后，切成小块，然后放入约1500ml的水，小火煮沸至马铃薯熟而不烂，然后用过滤袋过滤，将滤液与称好的琼脂一起煮化，加入配制好的其他营养剂，分装灭菌。A.1.2复壮培养基：马铃薯200g，麸皮100g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，牛肉膏2g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，水1000ml，PH值自然。配制方法，将马铃