GUS染色液(即用型)

GUS染色液(即用型)简介：GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶，该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。GUS受体基因系统有表达E.coliGUS酶的稳定性和在植物内的低活性LeageneGUS染色液(即用型)又称β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-GalactosidaseReporterGeneStainingKit)简称为GUS染色液，其染色原理是适宜的反应条件下β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色，多用于转基因植物的GUS基因表达分析，该即用型试剂比常规GUS染色液操作简便。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。组成：自备材料：1、70%乙醇2、去离子水3、小瓶或多孔板、显微镜操作步骤(仅供参考)：1、配制X-Gluc溶液(50x)：取1mlX-GlucSolution完全加至1支X-Gluc中，充分溶解，即获得X-Gluc溶液(50x)。配制好的X-Gluc溶液(50x)-20℃保存，1个月有效。2、配制X-Gluc染色液：该染色液最好现用现配，短期贮存可以4℃保存3天。3、取适量待染叶片等组织加入适量GUS染色液，使GUS染色液完全浸没组织。4、37℃孵育，随着孵育时间的延长，蓝色渐渐出现，当表达量较高时，GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。5、用乙醇脱去样本的叶绿素，一般样本浸没于乙醇1～3h，至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光学显微编号名称DP001350mlDP0013100mlStorage试剂(A):X-Gluc1支2支-20℃避光试剂(B):X-GlucSolution1ml2×1mlRT试剂(C):GUSBuffer50ml100ml4℃避光使用说明书1份镜下观察，白色背景上的蓝色即为GUS表达位点。注意事项：1、配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3天。2、由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗根就可直接染色；烟草和马铃薯这些植物的茎和叶须在染色前切成薄片（1-3mm）；当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞，建议采购常规GUS染色液。有效期：6个月有效。相关：编号名称CC0022D-Hanks平衡盐溶液(1×,含酚红)CC0130胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)CS0001ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer)DC0032Masson三色染色液NR0003Lezol(总RNA提取试剂)TC0699植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)TO1013丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)