GB 23200.110-2018 食品安全国家标准 植物源性食品中氯吡脲残留量的测定 液相色谱-质

质参考件PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建中华人民共和国国家标准备案号：XXXX-XXXX陨悦杂65.100G食品安全国家标准植物源性食品中氯吡脲残留量的测定液相色谱-质谱联用法20180621发布原原20181221原原实施Nationalfoodsafetystandard要Determinationofforchlorfenuroninfoodsofplantorigin要Liquidchromatographytandemmassspectrometry23200.110—2018GB发布国家市场监督管理总局中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建—2018暋暋暋食品安全国家标准植物源性食品中氯吡脲残留量的测定暋液相色谱质谱联用法1暋范围本标准规定了植物源性食品中氯吡脲残留量液相色谱质谱/联用(HPLCMS/MS)的测定方法。本标准适用于植物源性食品中氯吡脲残留量的测定。2暋规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB2763暋食品安全国家标准暋食品中农药最大残留限量GB/T6682暋分析实验室用水规格和试验方法3暋原理试样中的氯吡脲用乙腈提取,分散固相萃取净化,液相色谱质谱联用法测定,外标法定量。4暋试剂与材料除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯试剂和符合GB/T6682规定的一级水。4灡1暋试剂4灡1灡1暋甲酸(HCOOH,CAS号:64186):色谱纯。4灡1灡2暋乙腈(CH3CN,CAS号:75058):色谱纯。4灡1灡3暋无水硫酸镁(MgSO4,CAS号:7487889)。4灡1灡4暋氯化钠(NaCl,CAS号:12125029)。4灡2暋溶液配制甲酸溶液(1+499,体积比):准确吸取1mL甲酸加入499mL水,混匀,然后将其置于超声波中超声15min,备用。4灡3暋标准品氯吡脲标准品(C12H10ClN3O,CAS号:68157608):纯度曒99灡0%。4灡4暋标准溶液配制4灡4灡1暋氯吡脲标准储备溶液(100mg/L):准确称取10mg(精确到0灡1mg)氯吡脲标准品于50mL烧杯中,用乙腈溶解并转移至100mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,混匀,-18曟冷冻避光保存,有效期6个月。4灡4灡2暋氯吡脲标准工作溶液(10mg/L):准确吸取1mL标准储备溶液,加到10mL容量瓶中,用乙腈稀释至刻度,混匀。4曟下保存,有效期1个月。4灡5暋材料4灡5灡1暋N丙基乙二胺(PSA),40毺m~60毺m。4灡5灡2暋石墨化炭黑(GCB),38毺m~120毺m。4灡5灡3暋十八烷基键合硅胶(C18),50毺m。1GB23200灡110—20184灡5灡4暋滤膜:0灡22毺m,有机系。5暋仪器和设备5灡1暋液相色谱质谱联用仪:配备电喷雾离子源(ESI)。5灡2暋分析天平,感量0灡01g和0灡0001g。5灡3暋离心机,转速不低于8000r/min。5灡4暋涡旋振荡器。6暋试样的制备蔬菜、水果和食用菌样品按相关标准取一定量,取样部位按GB2763的规定执行。对于个体较小的样品,取样后全部处理;对于个体较大的基本均匀样品,可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理;对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品,可在不同部位切取小片或截成小段后处理;取后的样品将其切碎,充分混匀,用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆。匀浆放入聚乙烯容器中。取谷类样品500g,粉碎后使其全部可通过425毺m的标准网筛,放入聚乙烯瓶或袋中。取油料作物、茶叶、坚果和香辛料样品各500g,粉碎后充分混匀,放入聚乙烯瓶或袋中。植物油类搅拌均匀。试样于-18曟及以下温度条件下保存。7暋分析步骤7灡1暋提取7灡1灡1暋蔬菜、水果、食用菌、植物油称取10g(精确到0灡01g)试样于50mL的离心管中,加入10mL乙腈,涡旋振荡提取3min;蔬菜、水果、食用菌向离心管中加入4g无水硫酸镁和1g氯化钠,植物油向离心管中加入5g氯化钠,涡旋1min;然后4000r/min离心5min,取1灡5mL上清液待净化。7灡1灡2暋谷物、油料、坚果称取5g(精确到0灡01g)试样于50mL的离心管中,加入10mL水,涡旋30s使试样完全润湿;然后加入10mL乙腈,涡旋振荡提取3min;向离心管中加入5g氯化钠,涡旋1min;4000r/min离心5min,取1灡5mL上清液待净化。7灡1灡3暋茶叶、香辛料称取2g(精确到0灡01g)试样于50mL的离心管中,加入10mL水、涡旋30s使试样完全润湿;然后加入10mL乙腈,涡旋振荡提取3min;向离心管中加入5g氯化钠,涡旋1min;4000r/min离心5min,取1灡5mL上清液待净化。7灡2暋净化7灡2灡1暋蔬菜、水果、食用菌、植物油将1灡5mL蔬菜(色素含量高的蔬菜如韭菜除外)或水果样品上清液放入装有50mgPSA和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中;将1灡5mL色素含量高的蔬菜样品上清液放入装有40mgPSA、15mgGCB和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中;将1灡5mL食用菌或植物油样品上清液放入装有50mgC18和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中;涡旋30s,5000r/min离心5min,取上清液过有机系滤膜,供HPLCMS/MS检测。7灡2灡2暋谷物、油料、坚果将1灡5mL上清液放入装有50mgC18和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中;涡旋30s,5000r/2GB23200灡110—2018min离心5min,取上清液过有机系滤膜,供HPLCMS/MS检测。7灡2灡3暋茶叶、香辛料将1灡5mL上清液放入装有50mgPSA、20mgGCB和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中;涡旋30s,5000r/min离心5min,取上清液过有机系滤膜,供HPLCMS/MS检测。7灡3暋仪器参考条件7灡3灡1暋液相色谱参考条件a)暋色谱柱:C18柱,100mm暳2灡1mm(内径),1灡7毺m或相应类型色谱柱;b)暋柱温:45曟;c)暋流动相:A为乙腈,B为0灡2%甲酸溶液;d)暋进样量:5毺L;e)暋流速:0灡3mL/min;f)暋流动相及梯度洗脱条件:见表1。表1暋流动相及梯度洗脱条件(VA+VB)时间min流动相VA流动相VB010901灡590102灡590102灡61090510907灡3灡2暋质谱参考条件a)暋离子源类型:ESI;b)暋毛细管电压:3kV;c)暋锥孔气:氮气,50L/h;d)暋离子源温度:120曟;e)暋干燥气:氮气,流速600L/h,温度350曟;f)暋碰撞气:氩气,0灡16mL/min;g)暋扫描方式:正离子扫描;h)暋检测方式:多反应监测(MRM),监测条件见表2。表2暋多反应监测(MRM)的条件化合物名称定性离子对m/z定量离子对m/z锥孔电压V碰撞能量V氯吡脲248灡0/129灡0248灡0/93灡0248灡0/129灡02016347灡4暋标准工作曲线准确吸取适量氯吡脲标准工作溶液(4灡4灡2),用空白基质提取液稀释,配制成质量浓度为0灡002mg/L、0灡01mg/L、0灡05mg/L、0灡1mg/L、1mg/L系列基质标准溶液,供液相色谱质谱联用仪测定。以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液质量浓度为横坐标,绘制标准曲线,求出回归方程和相关系数。7灡5暋定性及定量7灡5灡1暋保留时间被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准溶液该组分色谱峰的保留时间相比较,相对3GB23200灡110—2018误差应在暲2灡5%之内。7灡5灡2暋定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,目标化合物的质谱定量和定性离子应出现,而且同一检测批次,对同一化合物,样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的标准溶液相比,其允许偏差不超过表3规定的范围,则可判断样品中存在氯吡脲。表3暋定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分率相对离子丰度5020~50(含)10~20(含)曑10允许相对偏差暲20暲25暲30暲507灡6暋测定将基质标准溶液和待测溶液分别注入液相色谱质谱联用仪中,以保留时间和定性离子定性,样品中氯吡脲质量浓度应在标准工作曲线质量浓度范围内,超过标准工作曲线最高点的则应稀释后再进行分析。采用外标法定量。7灡7暋空白试验除不加试样外,按照7灡1~7灡6的规定进行平行操作。8暋结果计算试样中氯吡脲残留量用质量分数氊计,单位以毫克每千克(mg/kg)表示,按式(1)计算。氊=A暳氀暳VAs暳m(1)…………………………………………暋暋式中:氊———试样中氯吡脲残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);A———样品溶液中氯吡脲峰面积;氀———标准溶液中氯吡脲质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);V———样品溶液定容体积,单位为毫升(mL);As———农药标准溶液中氯吡脲峰面积;m———试样的质量,单位为克(g)。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示,保留2位有效数字。当结果大于1mg/kg时,保留3位有效数字。9暋精密度9灡1暋在重复性条件下,2次独立测定结果的绝对差值不超过重复性限(r),重复性限(r)的数据为:a)暋含量为0灡01mg/kg时,重复性限(r)为0灡0030;b)暋含量为0灡05mg/kg时,重复性限(r)为0灡012;c)暋含量为0灡5mg/kg时,重复性限(r)为0灡11。9灡2暋在再现性条件下,2次独立测定结果的绝对差值不超过再现性限(R),再现性限(R)的数据为:a)暋含量为0灡01mg/kg时,再现性限(R)为0灡0044;b)暋含量为0灡05mg/kg时,再现性限(R)为0灡015;c)暋含量为0灡5mg/kg时,再现性限(R)为0灡16。10暋其他本方法定量限为0灡01mg/kg。4GB23200灡110—201811暋图谱0灡01mg/L氯吡脲标准溶液总离子流色谱图见图1。!#!$%!!$%#!$&!!$&#!$’!!$’#!$(!!$(#!!!)*+%!!!%,#!-.-$/0$&$123++456$789:;10/=2$5/04+/+#%!?4#图1暋0灡01mg/L氯吡脲标准溶液总离子流色谱图5