2020高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课时精练课件

[基础对点]知识点一筛选微生物的研究思路1.土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成()A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后进一步利用，B正确。解析答案B答案2．分离土壤中分解尿素的细菌时，对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦答案C答案解析土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物，①符合要求；培养基中尿素作为唯一氮源，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长，⑧符合要求；分离微生物要用固体培养基，需要加琼脂，③符合要求；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源，⑤符合要求。解析3．选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物，通过不含有机物的培养基、缺氮培养基、含尿素(不含其他氮源)的培养基，可从土壤中分离出的微生物依次是()A．硝化细菌、放线菌、根瘤菌B．根瘤菌、青霉菌、固氮菌C．异养型细菌、放线菌、硝化细菌D．自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌答案D答案解析选择培养基可以根据不同微生物的代谢特点，通过改变培养基的成分，以达到选择某种微生物的目的。不含有机物的培养基可以分离出自养型微生物；缺少氮元素的培养基可以培养固氮微生物；含尿素(不含其他氮源)的培养基可以分离出能分解尿素的微生物，D正确。解析4．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比最可能是()A．比实际值高B．比实际值低C．和实际值一致D．比实际值可能高也可能低解析在涂布时，有可能两个或两个以上的细胞连在一起，使平板上观察到的只是一个菌落。解析答案B答案知识点二实验设计及操作5.关于土壤中细菌的分离，下列正确的操作步骤是()①土壤取样②称取10g土壤，加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至103、104、105、106、107倍A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→②→④→③D．①→④→②→③解析在分离土壤中某种细菌时，应先选取土样(10g)，然后加入到盛有无菌水的锥形瓶中获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数，C正确。解析答案C答案6．下列操作需要在火焰旁进行的是()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤B．②③④⑤C．③④⑤D．②③④解析实验操作过程要进行严格的无菌操作，除实验空间必须消毒外，每个操作步骤都必须在无菌区进行。土壤的称取、土壤溶液的稀释、涂布平板都需要在酒精灯火焰旁的无菌区完成，以防止杂菌污染，D正确。解析答案D答案7．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析细菌将尿素分解后，培养基中pH升高，使酚红指示剂变红，A正确。解析答案A答案8．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括()A．对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物B．倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同C．所用培养基成分及pH大小与实验组保持一致D．对照组和实验组均放在相同且适宜的条件下培养答案B答案解析对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对照，A正确；对照组培养基用量的大小与实验组基本相同即可，不一定绝对相同，B错误；对照组所用培养基的成分及pH应与实验组完全一致，C正确；对照组和实验组的培养基都要置于相同条件下培养，以保证单一变量，D正确。解析9．下列关于微生物培养的叙述，错误的是()A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物一般要按不同的稀释倍数进行分离B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数D．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落答案C答案解析土壤中各种微生物数量不同，大约70%～90%为细菌，放线菌和真菌较少，故不同类型微生物，一般要按不同稀释倍数进行分离，A正确；由A可知，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，B正确；稀释涂布平板法能用于微生物的计数，C错误；接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落，D正确。解析[能力提升]10．关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是()A．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．选择菌落数在30～300间的所有平板进行计数，以平均数为实验结果C．对10mL土样稀释106倍后，取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个D．应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度答案D答案解析土壤中分解尿素的细菌为异养菌，硝化细菌是自养菌，二者利用的碳源不同，A错误；选择菌落数在30～300间的平板进行计数，舍去数据相差较大的数据，以平均数为实验结果，B错误；对10mL土样稀释106倍后，取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，应选择菌落数在30～300间的平板进行计数，则应舍弃菌落数为18的平板，那么该10mL土样中分解尿素的细菌数为(234＋276)/2÷0.1×10×106＝2.55×1010(个)，C错误；分离微生物时，需要设置不接种的培养基与实验组一起培养做空白对照，设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰，D正确。解析11．甲、乙、丙是三种微生物，表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是()ⅠⅡⅢ粉状硫10g＋＋＋K2HPO44g＋＋＋FeSO40.5g＋＋＋蔗糖10g＋－＋(NH4)2SO40.4g－＋＋H2O100mL＋＋＋MgSO49.25g＋＋＋CaCl20.5g＋＋＋注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没有加入这种物质。A．甲、乙、丙都是异养型微生物B．甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物C．甲是异养型微生物，乙是固氮微生物，丙是自养型微生物D．甲是固氮微生物，乙是自养型微生物，丙是异养型微生物解析Ⅰ培养基缺少氮源，Ⅱ培养基缺少碳源，Ⅲ培养基营养全面。甲能在Ⅰ上生长繁殖，而乙、丙都不能，说明甲是能够固氮的微生物；乙能在Ⅱ中生长繁殖，甲、丙不能，说明乙不需要培养基为它的正常生命活动提供碳源物质，乙一定为自养型微生物；丙只能在Ⅲ上生长繁殖，为异养型微生物。解析答案D答案12．土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请据图回答相关问题：(1)能分解尿素的细菌代谢类型为________，为获得该种细菌，应从富含有机质的土壤表层取土样。(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用________________的培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。(3)因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要________以减少误差。将103～107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用________将菌液铺平，这种接种方法称为________________。(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计具有________(现象)的菌落数，结果如下表，其中________倍的稀释比较合适。稀释倍数103104105106107菌落数(个)5003672483618答案(1)异养型(2)以尿素为唯一氮源酚红(3)摇匀涂布器稀释涂布平板法(4)红色环带105和106答案解析(1)能分解尿素的细菌可将尿素分解成氨，代谢类型为异养型。(2)分离土壤中分解尿素的细菌，应该用以尿素为唯一氮源的培养基进行分离，分解尿素的细菌在分解尿素时产生氨，使酚红指示剂显红色，所以要加入酚红指示剂进行鉴别。(3)取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将103～107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法进行接种，需要将菌液用涂布器涂布到固体培养基上。(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，具有红色环带的菌落即是分解尿素的细菌的菌落。估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30到300之间的平板，分析表格数据可知，105和106的稀释度下菌落数在这一范围。解析13．在调查某湖水中H细菌指数(1升水中含有的H细菌个数)的实验中，先将5升湖水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到4个培养皿中培养，培养后统计的菌落数分别是42、38、55、18。请回答：(1)培养基中的蛋白胨和淀粉分别为细菌生长提供了___________、________。(2)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水水样的平板置于____________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种____________作为对照。(3)细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为__________。根据上述结果计算，被检样的H细菌指数为________。用这种方法测定密度，实际活菌数目要比测得的数目________，原因是__________________________。(4)为了纯化获得的H细菌，在微生物的实验室培养过程中，关键是_______，而实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后才能倒掉。答案(1)氮源、碳源和维生素碳源(2)恒温培养箱等量无菌水(3)种群45多当两个或多个细胞连在一起时在平板上观察到的是一个菌落(4)防止杂菌污染灭菌答案解析(1)蛋白胨通常为微生物提供氮源、碳源和维生素，淀粉通常作为碳源。(2)恒温培养箱能够保证细菌生长最适温度，故细菌数量增长较快。在另一平板上接种等量无菌水作为对照，判断平板上是否灭菌彻底。(3)细菌培养产生的单个肉眼可见的子细胞群体称为菌落，生态系统中称为种群。计算时应去掉18这个偏差较大组，其他3组(42、38、55)取平均值为45。用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于两个或多个细胞连在一起时在平板上观察到的是一个菌落，所以实际活菌数目要比测得的数目多。(4)为了纯化获得的H细菌，在微生物的实验室培养过程中，关键是防止杂菌污染；实验结束，为避免微生物污染环境和感染操作者，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉。解析14．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用________法或______________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用______________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B______；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明__________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D