膜过滤技术总结(UF&DF)

切向流过滤简介切向流过滤简介在工艺中应用产品关键参数简介UF/DF工艺优化使用及验证目录单抗常用过滤类型死端过滤切向流过滤过滤在抗体中应用•死端过滤：无菌过滤、澄清过滤、病毒过滤等•切相流过滤：菌体和上清的分离；蛋白缓冲液置换或浓缩等切相流过滤过程及分类切向流过滤应用常用过滤方式膜类型选择膜材质选择需求：高浓度料液，苛刻pH清洗，所以选择Biomax超低蛋白吸附，高得率易于清洗，pH2~13等蛋白吸附较高，pH1~14等膜孔径选择超滤膜包的孔径是已截留分子量定义的(NominalMolecularWeightLimit)，如果一个超滤膜对某个分子量的葡聚糖截留率为90%，就将这个超滤膜标定为该分子量的超滤膜(Millipore)。工艺优化•蛋白特性（大小和形状、剪切力敏感性、温度敏感性等）•蛋白在初始溶液/终溶液中的特性（溶解度、稳定性等）•蛋白在初始浓度，浓缩后最终浓度和体积•工艺最终规模及工艺时间确定工艺优化建立：1.稳定/可重复2.经济/高效3.符合工艺需求工艺优化流程浓缩前流速和TMP确定此案例，选择FeedFlux为5L/min/m2，原因：在几乎相同的流速下，膜面积只需要57%。透析浓度确定确定透析浓度后，可计算透析浓度下进口流速和TMP透析方式恒定体积透析换液为较优方式透析体积确定根据实验目的及溶液性质确定透析体积样品回收1.不冲洗系统中残留蛋白，保持最高浓度，损失得率2.冲洗系统中残留蛋白，提高得率，降低浓度•常用样品回收方式：–空气顶空–Buffer顶洗–Buffer冲洗–Buffer循环得率确定产品损失的主要原因Solubility/Quality：过度的剪切应力、不适当的温度或酶的作用，可能会导致产品的变性和/或降解损失膜载量确定Time≤4h根据工艺规模，加上一定安全系数确定膜载量。其他优化—DOE其他优化—DOE设备展示使用概述缩小与放大1.载量2.膜长度3.膜类型（孔径、材料、通道类型等）4.TMP/△P5.流速（LMH）6.温度7.样品相关性质（浓度、Buffer组成）8.管路设备相关等寿命建立目的：确定超滤步骤中所用的超滤膜的清洁、保存和使用次数。谢谢！