DB41T 1906-2019 苜蓿青贮料质量分级

ICS65.120B25DB41河南省地方标准DB41/T1906—2019苜蓿青贮料质量分级2019-09-30发布2019-12-30实施河南省市场监督管理局发布DB41/T1906—2019I目次前言................................................................................II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语和定义.........................................................................14质量分级...........................................................................15要求...............................................................................26检验方法...........................................................................2附录A（资料性附录）比色法测定苜蓿青贮料氨态氮含量....................................4附录B（资料性附录）高效液相色谱法测定苜蓿青贮料有机酸含量............................6DB41/T1906—2019II前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河南省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位：河南农业大学、河南省饲草饲料站。本标准主要起草人：朱晓艳、牛岩、史莹华、郑爱荣、王成章、王彦华、张晓霞、李德锋、王红艺、王璟、黄晓燕。DB41/T1906—20191苜蓿青贮料质量分级1范围本标准规定了苜蓿青贮料的术语和定义、质量分级、要求和检验方法。本标准适用于以苜蓿为原料调制的青贮饲料。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6432饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T6435饲料中水分的测定GB/T6438饲料中粗灰分的测定GB/T10468水果和蔬菜产品pH值的测定方法GB13078饲料卫生标准GB/T20195动物饲料试样的制备GB/T20806饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定NY/T1459饲料中酸性洗涤纤维的测定NY/T2129饲草产品抽样技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1苜蓿青贮料将刈割、晾晒至含水量60%～70%的青绿苜蓿切短后置于密封的青贮容器中，经乳酸菌厌氧发酵产生乳酸后抑制有害微生物生长，使青绿苜蓿可以长期保存的多汁饲料产品。4质量分级苜蓿青贮料质量分级应符合表1的规定。表1苜蓿青贮料质量分级项目等级一级二级三级四级pH值≤4.3＞4.3，≤4.6＞4.6，≤4.8＞4.8，≤5.2氨态氮/总氮，%≤10.0＞10.0，≤15.0＞15.0，≤20.0＞20.0，≤30.0乳酸，%≥75.0＜75.0，≥60.0＜60.0，≥50.0＜50.0，≥40.0DB41/T1906—20192表1（续）项目等级一级二级三级四级乙酸，%≤20.0＞20.0，≤30.0＞30.0，≤40.0＞40.0，≤50.0丁酸，%0.0≤2.0＞2.0，≤10.0＞10.0粗蛋白质，%≥20.0＜20.0，≥18.0＜18.0，≥16.0＜16.0，≥15.0中性洗涤纤维，%≤35.0＞35.0，≤40.0＞40.0，≤44.0＞44.0，≤45.0酸性洗涤纤维，%≤30.0＞30.0，≤33.0＞33.0，≤36.0＞36.0，≤37.0注：粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维以占干物质的量表示；乳酸、乙酸、丁酸数值以占有机酸的总量表示，有机酸为乳酸、乙酸、丁酸、丙酸的总和构成。5要求5.1感官5.1.1颜色绿色、黄绿色、暗绿色或黄褐色，无褐色或黑色。5.1.2气味酸香味或稍有酒精、醋酸味，无霉味、腐臭味或氨味。5.1.3质地茎叶结构清晰或基本保持原状，松散，柔软湿润，无茎叶模糊、腐烂、黏滑或干硬。5.2干物质苜蓿青贮原料干物质含量为30%～40%。5.3粗灰分苜蓿青贮原料粗灰分含量低于12%。5.4青贮料卫生应符合GB13078的规定。6检验方法6.1感官在自然光下视物最清楚的距离内目测苜蓿青贮料的色泽、结构；青贮料常态下，贴近鼻尖嗅闻气味；用手指捻，通过触觉评价质地。6.2抽样按NY/T2129的规定执行。DB41/T1906—201936.3试样制备6.3.1常规指标按GB/T20195的规定执行。6.3.2浸提液取具代表性苜蓿青贮料样品20g，置于组织捣碎机（或家用榨汁机）中，加入去离子水180mL，搅拌1min，用四层纱布和滤纸过滤，得到试样浸提液。6.4pH值将制备的试样浸提液，按GB/T10468的规定执行。6.5氨态氮将制备的试样浸提液，按附录A的规定执行。6.6乳酸、乙酸、丁酸将制备的试样浸提液，按附录B的规定执行。6.7粗蛋白质按GB/T6432的规定执行。6.8中性洗涤纤维按GB/T20806的规定执行。6.9酸性洗涤纤维按NY/T1459的规定执行。6.10干物质按GB/T6345的规定执行。6.11粗灰分按GB/T6438的规定执行。DB41/T1906—20194附录A（资料性附录）比色法测定苜蓿青贮料氨态氮含量A.1试剂A.1.1苯酚显色剂将0.15g亚硝基铁氰化钠（Na2[Fe(CN)5·NO]2H2O）溶解在1.5L蒸馏水中，再加入29.7g结晶苯酚，定容至3L，于棕色玻璃瓶中避光贮存。A.1.2次氯酸钠试剂将15g氢氧化钠（NaOH）溶解在2L蒸馏水中，再加入113.6g磷酸氢二钠（Na2HPO6·7H2O），中火加热并不断搅拌至完全溶解。冷却后加入44.1mL含8.5%活性氯的次氯酸钠（NaClO）溶液，混匀，定容至3L，于棕色玻璃瓶中避光贮存。A.1.3标准铵储备液准确称取0.6607g经100℃烘干24h的硫酸铵（[(NH4)2SO4]）溶于适量蒸馏水中，并定容至100mL，配制成100mmol/L的标准铵储备液。将上述储备液稀释配制成1.0mol/L、2.0mol/L、3.0mol/L、4.0mol/L、5.0mol/L五种不同浓度梯度的标准液。A.2仪器与设备A.2.1分光光度计：630nm，1cm玻璃比色皿。A.2.2天平：万分之一。A.2.3恒温水浴锅。A.2.4移液器：50μL。A.2.5移液管：2mL，5mL，50mL。A.2.6玻璃器皿：试管，所需器皿用稀盐酸浸泡，依次用自来水、蒸馏水洗净。A.3测定步骤A.3.1标准曲线建立取不同浓度梯度的标准液各50μL至做好标记的试管中，空白为50μL蒸馏水，依次加入2.5mL苯酚显色剂、2.0mL次氯酸钠试剂，摇匀，95℃水浴中显色5min。冷却后，630nm波长下比色。以吸光度和标准液浓度为坐标轴建立标准曲线。A.3.2样品测定向每支试管中加入50μL正文中所述制备青贮浸出液，按检测步骤测定样本液的吸光度，如吸光度太高，可将样品稀释后再测定。A.3.3水分测定按GB/T6435的规定执行。DB41/T1906—20195A.3.4总氮含量测定按GB/T6432的规定执行。A.3.5结果计算氨态氮的含量按公示进行计算：式中：X——氨态氮含量，单位为占总氮的质量百分比（%）；ρ——样液的浓度，单位为毫摩尔每升（mmol/L）；D——样液的总稀释倍数；M——样品的水分含量，单位为百分比（%）；N——试样的总氮含量，单位为占鲜样的质量百分比（%）；以两个平行试样测定结果的算术平均值报告结果，保留一位小数。DB41/T1906—20196附录B（资料性附录）高效液相色谱法测定苜蓿青贮料有机酸含量B.1试剂和材料乳酸、乙酸、丙酸、丁酸标准品，超纯水，色谱纯高氯酸。B.2仪器高效液相色谱仪、SPD检测器、工作站、均质机。B.3测定程序B.3.1色谱条件ShodexRspakKC-811色谱柱（8mm×300mm，为离子交换柱），流动相为3mol高氯酸溶液，流速1mL/min，SPD检测器波长210nm，柱温50℃，进样量20μL。B.3.2标准品分析采用外标法，用乳酸、乙酸、丙酸、丁酸标准液制作标准工作曲线。根据试样浸提液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作曲线，对标准工作溶液与试样浸提液等体积参插进样测定，标准工作溶液和试样浸提液乳酸、乙酸、丙酸、丁酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。按照色谱条件分析标准品，乳酸、乙酸、丙酸、丁酸的保留时间分别约为8.1min、9.6min、11.2min、13.8min，标准品的液相色谱图见图B.1。图B.1乳酸、乙酸、丙酸、丁酸混合标准品的液相色谱图注：LA为乳酸，AA为乙酸，PA为丙酸，BA为丁酸，mAU为毫吸光度B.3.3空白实验除不加试样浸提液外，按B.3.1和B.3.2条件和程序进行。B.3.4结果计算DB41/T1906—20197用色谱工作站计算试样浸提液被测物的含量，计算中扣除空白值，再通过换算浸提液制备过程中对应的样品量，获得乳酸、乙酸、丙酸、丁酸在样品中的比例。每样取两个平行样测定，取平均值作为分析结果，方法允许相对偏差≤6%。_________________________________