GB 5009.244-2016 食品安全国家标准 食品中二氧化氯的测定

中华人民共和国国家标准GB5009.244—2016食品安全国家标准食品中二氧化氯的测定2016-08-31发布2017-03-01实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.244—2016Ⅰ前言本标准代替SN/T1954—2007《进出口冰鲜肉中二氧化氯残留量的检验方法分光光度法》。本标准与SN/T1954—2007相比,主要变化如下:———修改了检测方法及检测方法的适用范围;———增加试样分类;———修改试样处理条件;———修改检出限,增加定量限。GB5009.244—20161食品安全国家标准食品中二氧化氯的测定1范围本标准规定了蔬菜、水果、畜禽肉、水产品中二氧化氯的分光光度检测方法。本标准适用于蔬菜、水果、畜禽肉、水产品中二氧化氯的测定。2原理试料中的二氧化氯用磷酸盐缓冲溶液提取,经冷冻离心,纤维滤纸过滤,以甘氨酸作掩蔽剂,消除溶液中Cl2、ClO-等物质的假阳性干扰,加入N,N-二乙基-对苯二胺(DPD)显色剂与二氧化氯显色,采用分光光度法在552nm处测定其最大吸光度,从而确定食品中二氧化氯的含量。3试剂和材料除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。3.1试剂3.1.1甘氨酸(C2H5NO2)。3.1.2乙二胺四乙酸二钠(EDTA)(C10H14N2Na2O8)。3.1.3碘化钾(KI):纯度99.5%。3.1.4亚氯酸钠(NaClO2)。3.1.5乙酸(CH3COOH)。3.1.6硫酸(H2SO4)。3.1.7无水硫酸钠(Na2SO4)。3.1.8氢氧化钠(NaOH)。3.1.9磷酸二氢钾(KH2PO4)。3.1.10N,N-二乙基-对苯二胺(DPD)。3.1.11硫代硫酸钠(Na2S2O3)。3.1.12可溶性淀粉。3.1.13重铬酸钾(Cr2K2O7)。3.1.14高纯氮气。3.2试剂配制3.2.1DPD显色剂(1g/L):称取1gDPD(3.1.10)溶于含8mL硫酸溶液(1+3)和200mgEDTA的无氯二级水(3.2.2)中,并用无氯二级水稀释至1000mL,储于具玻塞的棕色玻璃瓶中,置于暗处。3.2.2无氧化性氯二级水:二级水中加入亚硫酸钠(3.1.4),将氧化性氯还原为氯离子(以DPD检查不显色),再进行蒸馏,所得水为无氧化性氯二级水。GB5009.244—201623.2.3甘氨酸溶液(10%):取10g甘氨酸(3.1.1),用水溶解,定容至100mL。3.2.4氢氧化钠溶液(2mol/L):称取80g氢氧化钠,用水溶解,定容至1L。3.2.5氢氧化钠溶液(0.1mol/L):称取4g氢氧化钠,用水溶解,定容至1L。3.2.6硫酸溶液(1mol/L):量取98.4%的硫酸(3.1.6)54mL,缓慢地加入约300mL蒸馏水中,冷却以后,转移到容量瓶中,把容器用约20mL蒸馏水洗涤3次,也转移到容量瓶中,用水定容至1L。3.2.7磷酸二氢钾溶液[c(KH2PO4)=0.1mol/L]:13.61g磷酸二氢钾溶液(3.1.9),用水溶解,定容至1L。3.2.8磷酸盐缓冲液(pH=6.5):取500mL0.1mol/LKH2PO4和81mL0.1mol/LNaOH,用水稀释至1L。3.2.9亚氯酸钠饱和溶液:取适量亚氯酸钠(3.1.4)于烧杯内,加少量水,搅拌使成为饱和溶液(亚氯酸钠的溶解度相当高,按所需用量配制)。3.2.10硫代硫酸钠标准溶液的配制[c(Na2S2O3)=0.1000mol/L]:称取16g无水硫酸钠(3.1.7),溶于1L水中,加热煮沸10min,冷却,避光两周后过滤备用。3.2.11硫代硫酸钠标准溶液的标定[c(Na2S2O3)=0.1000mol/L]:称取0.15g于120℃烘至恒重的基准重铬酸钾(3.1.13),准确至0.0001g,置于碘量瓶中,加入25mL水,溶解后加入2g碘化钾及20mL20%硫酸溶液,摇匀,于暗处放置10min。加150mL水,用配制好的硫代硫酸钠标准溶液(3.2.10)滴定,近终点时加入3mL淀粉指示液(5g/L)(3.1.12),继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。3.2.12淀粉指示剂(5g/L):称取5.0g淀粉放入50mL烧杯,量取1L蒸馏水,先用数滴把淀粉调成糊状,再取约900mL水加热至微沸时,倒入糊状淀粉,再用剩余蒸馏水冲洗50mL烧杯3次,洗液倒入烧杯,然后再加入1滴10%盐酸,微沸3min。3.2.13淀粉溶液(1%):称取1g可溶性淀粉,用少许水将其调成糊状,用100mL沸水将其溶解,再加热煮沸至澄清。3.3标准品3.3.1二氧化氯标准储备溶液的制备在A瓶中放入300mL纯水,将A瓶一端玻璃与空气压缩机相接,另一玻璃管与B瓶相连。B瓶为高强度硼硅玻璃瓶,瓶口有三根玻璃管;第一根插至离瓶底5mm处,用以引进空气;第二根上接带刻度的圆柱形分液漏斗,下端伸至液面下;第三根下端离开液面,上端与C瓶相接。溶解10g亚氯酸钠于750mL纯水中并倒入B瓶中,在分液漏斗中装有20mL硫酸溶液。C瓶装有亚氯酸钠饱和溶液的洗气塔。D瓶为2L硼硅玻璃收集瓶,瓶中装有1500mL纯水,用以吸收所发生的二氧化氯,余气由排气管排出。整套装置应放入通风橱内。二氧化氯的发生及吸收装置见图1。图1二氧化氯的发生及吸收装置GB5009.244—20163启动空气压缩机,使空气均匀地通过整个装置。每隔5min由分液漏斗加入5mL硫酸溶液,加完最后一次硫酸溶液后,空气流量要持续30min。所获得的黄色二氧化氯储备溶液放入棕色瓶中密塞于冷藏箱中保存。其质量浓度约为250mg/L~600mg/L,相当于500mg/L~1200mg/L有效氯(Cl2)。3.3.2二氧化氯标准储备溶液的标定向250mL碘量瓶内加入100mL纯水、1g碘化钾及5mL乙酸,摇动碘量瓶使碘化钾完全溶解。加入10.00mL二氧化氯标准溶液,在暗处放置5min。用0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液(3.2.10)滴定至溶液呈淡黄色时,加入1mL淀粉溶液,继续滴定至终点。按以上步骤加入相同量的试剂(仅不加二氧化氯),用硫代硫酸钠标准溶液滴定至蓝色消失,记录空白用量。二氧化氯标准储备溶液的浓度按式(1)计算:ρ(ClO2)=c×(V1-V0)×13.49V2…………………………(1)式中:ρ(ClO2)———二氧化氯标准储备溶液的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);c———硫代硫酸钠标准溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L);V1———滴定二氧化氯所用硫代硫酸钠标准溶液的体积,单位为毫升(mL);V0———滴定空白所用硫代硫酸钠标准溶液的体积,单位为毫升(mL);V2———二氧化氯体积,单位为毫升(mL);13.49———与1.00mL硫代硫酸钠标准溶液[c(Na2S2O3)=0.1000mol/L](3.2.10)相当的以毫克表示的二氧化氯的质量。3.4二氧化氯标准溶液配制1mL溶液含二氧化氯(ClO2)0.25mg,根据测定的二氧化氯储备液的浓度,吸取一定量二氧化氯标准储备液,用无氯二级水(3.2.2)进行稀释。该溶液即用即配。4仪器和设备4.1紫外-可见分光光度计。4.2均质器:≥8000r/min。4.3离心机:≥10000r/min。4.4具塞锥形瓶:100mL。4.5滤膜:0.22μm。4.6移液管:1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL。4.7分析天平。5分析步骤5.1试样制备从所取全部样品中取出有代表性样品约1kg,经捣碎机充分捣碎均匀,均分成两份,分别装入洁净容器内作为试样。密封并加贴标签。GB5009.244—201645.2试样保存将试样于-18℃以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.3提取5.3.1水果及蔬菜称取试样1.00g(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入20mL磷酸盐缓冲溶液(pH6.5)(3.2.8),8000r/min均质提取3min,于高速离心机中10000r/min冷冻离心10min,取出,用纤维滤纸过滤于10mL具塞比色管中,供分光光度计测定。5.3.2畜禽肉及水产品称取试样1.00g(精确至0.01g)于100mL离心管中,加入50mL磷酸盐缓冲溶液(pH6.5)(3.2.8),8000r/min均质提取3min,于高速离心机中10000r/min冷冻离心10min,取出,用纤维滤纸过滤于10mL具塞比色管中,供分光光度计测定。5.4测定5.4.1标准曲线的绘制向一系列10mL具塞比色管中加入一定量的二氧化氯标准使用溶液,使各管中的浓度相当于0.00mg/L、0.05mg/L、0.10mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L的二氧化氯标准溶液。分别加入1.0mL磷酸盐缓冲液(3.2.8)和1.0mLDPD溶液(3.2.1)、1.0mL甘氨酸溶液,定容至刻度摇匀,在60s内,用1cm比色皿在552nm处测定吸光度,以标准工作液的浓度为横坐标,以响应值(吸收值)为纵坐标,绘制标准曲线,见附录A。5.4.2样品中二氧化氯的测定取5mL滤液于10mL具塞比色管中,向滤液中加入1mL甘氨酸溶液(3.2.3)混合,加入1mL磷酸盐缓冲液(3.2.8)和1.0mLDPD溶液(3.2.1),用水定容至刻度10mL摇匀。立即在60s内,用1cm比色皿在552nm处测定吸光度,根据标准曲线求出二氧化氯的浓度。注:整个操作过程需避光。6分析结果的表述试样中二氧化氯含量按式(2)计算:X=(c-c0)×Vm…………………………(2)式中:X———试样中ClO2含量,单位为毫克每千克(mg/kg);c———样液中ClO2的浓度,单位为毫克每升(mg/L);c0———试剂空白中ClO2的浓度,单位为毫克每升(mg/L);GB5009.244—20165V———样液最终定容体积,单位为毫升(mL);m———最终样液所代表的试样质量,单位为克(g)。计算结果保留小数点后两位。7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8其他方法检出限为0.65mg/kg,水果及蔬菜定量限为2.00mg/kg,肉及水产品定量限为5.00mg/kg。GB5009.244—20166附录A二氧化氯的标准曲线二氧化氯的标准曲线见图A.1。图A.1二氧化氯的标准曲线