GBT 5009.45-1996 水产品卫生标准的分析方法

GB/T5009.45—1996中华人民共和国国家标准水产品卫生标准的分析方法MethodforanalysisofhygienicstandardoffishandotheraquaticproductsGB/T5009.45—19961主题内容与适用范围本标准规定了鲳鱼、鳓鱼、鳗鱼、鲚鱼、鱼、黄姑鱼、鲐鱼、蓝圆鲹（池鱼）、铁甲鱼、鲅鱼、鲱鱼等海水鱼类和青鱼、草鱼、鲢鱼、鲤鱼、鳙鱼、鳊鱼、鲫鱼、鲶鱼、湟鱼等淡水鱼类，墨鱼（乌贼）、蛸、鱿鱼等头足类海产品及其他水产品的卫生指标的分析方法。本标准适用于海水鱼类、淡水鱼类、头足类海产和其他水产品的各项卫生指标的分析。2引用标准GB2733海水鱼卫生标准GB2735头足类海产品卫生标准GB2736淡水鱼卫生标准GB2739湟鱼卫生标准GB2740河虾卫生标准GB2741海虾卫生标准GB2742牡蛎卫生标准GB2743海蟹卫生标准GB2744花蛤卫生标准GB2745缢蛏卫生标准GB/T5009.11食品中总砷的测定方法GB/T5009.15食品中镉的测定方法GB/T5009.17食品中总汞的测定方法GB/T5009.19食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法GB/T5009.44肉与肉制品卫生标准的分析方法第一篇鲜鱼类第二篇本篇适用于黄鱼、带鱼、鲐鱼、鲳鱼、鲚鱼、墨鱼（乌贼）、青鱼、草鱼、鲢鱼、鲤鱼、鳙鱼、蓝圆鲹（池鱼）、鲱鱼、湟鱼各项卫生指标的测定。3感官检查3．1黄鱼（黄花鱼）按GB2733操作。3．2带鱼按GB2733操作。3．3墨鱼（乌贼）按GB2735操作。中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施GB/T5009.45—19963．4青鱼、草鱼、鲢鱼、鲤鱼、鳙鱼按GB2736操作。3．5蓝圆鲹（池鱼）按GB2733操作。3．6鲱鱼按GB2733操作。3．7湟鱼按GB2739操作。4理化检验4．1挥发性盐基氮按GB/T5009.44中4.1操作。4．2汞按GB/T5009.17操作。4．3六六六、滴滴涕按GB/T5009.19操作。4．4组胺适用于蓝圆鲹（池鱼）、鲐鱼。4．4．1原理鱼体中组织胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。最低检出浓度为5mg/100g。4．4．2试剂4．4．2．1正戊醇。4．4．2．2三氯乙酸溶液（100g/L）。4．4．2．3碳酸钠溶液（50g/L）。4．4．2．4氢氧化钠溶液（250g/L）。4．4．2．5盐酸（1+11）。4．4．2．6组织胺标准溶液：准确称取0.2767g于100±5℃干燥2h的磷酸组织胺，溶于水，移入100mL容量瓶中，再加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1.0mg组织胺。4．4．2．7磷酸组织胺标准使用液：吸取1.0mL组织胺标准溶液，置于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于20μg组织胺。4．4．2．8偶氮试剂。4．4．2．8．1甲液：称取0.5g对硝基苯胺，加5mL盐酸溶液溶解后，再加水稀释至200mL，置冰箱中。4．4．2．8．2乙液：亚硝酸钠溶液（5g/L），临用现配。甲液5mL、乙液40mL混合后立即使用。4．4．3分析步骤4．4．3．1样品处理称取5.00～10.00g切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入15～20mL三氯乙酸溶液（100g/L），浸泡2～3h，过滤。吸取2.0mL滤液，置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液（250g/L）使呈碱性，每次加入3mL正戊醇，振遥5min，提取三次，合并正戊醇并稀释至10.0mL。吸取2.0mL正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3mL盐酸（1+11）振摇提取三次，合并盐酸提取液并稀释至10.0mL。备用。中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施GB/T5009.45—19964．4．3．2测定吸取2.0mL盐酸提取液于10mL比色管中。另吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0mL组织胺标准使用液（相当于0、4、8、12、16、20μg组织胺），分别置于10mL比色管中，加水至1mL，再各加1mL盐酸（1+11），样品与标准管各加3mL碳酸钠溶液（50g/L），3mL偶氮试剂，加水至刻度，混刀，放置10min后用1cm比色杯以零管调节零点，于480nm波长处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准系列目测比较。4．4．4计算100100010210221211×××××=VmmX…………………………（1）式中：X1——样品中组织胺的含量，mg/100g；V1——加入三氯乙酸溶液（100g/L）的体积，mL；m1——测定时样品中组织胺的质量，μg；m2——样品质量，g。结果的表述：报告算术平均值精确至小数点后一位。4．4．5允许差相对相差≤10%。4．5无机砷4．5．1减压蒸馏法4．5．1．1原理样品中五价砷经碘化钾还原为三价砷，与盐酸作用生成三氯化砷，经减压蒸馏，三氯化砷随氯化氢蒸气逸出，冷凝并吸收于水中，用银盐法测定其砷含量。4．5．1．2试剂4．5．1．2．1盐酸及盐酸（7+5）4．5．1．2．2碘化钾溶液（500g/L）。其他试剂同GB/T5009.11中3.7～3.17。4．5．1．3仪器4．5．1．3．1减压蒸馏装置：见下图。4．5．1．3．2测砷装置：同GB/T5009.11中4.2。4．5．1．4分析步骤4．5．1．4．1样品处理鲜样取可食部分，捣成刀浆，干样则取可食部分，除去附着泥沙，粉碎，全部过20目筛。称取20.0g鲜样或4.00g干样，置于250mL短颈球形瓶中，加1mL碘化钾溶液（500g/L）。鲜样加20mL盐酸及水至25mL，干样加24mL盐酸（7+5）。轻轻摇刀浸泡，室温下放置4h（或在70℃水浴中浸泡1h）。4．5．1．4．2分离中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施GB/T5009.45—19961—通气管；2—单管蒸馏头；3—短颈球瓶；4—直形冷凝器；5—真空蒸馏接受管；6—梨形烧瓶；7—水银压力计；8—直形两路活塞；9—安全瓶；10—干燥塔；11—真空泵将盛有样品溶液的短颈球形瓶，置于70℃水浴中，连接好减压蒸馏装置，接收瓶（梨形烧瓶）中预先装有20mL水作吸收液。约10min后开动真空泵，用二路活塞调节抽气流量，由通气管向样品溶液中通入少量空气，以防暴沸，使水银压力计液面缓缓下降，直至瓶内压力恒定在133Pa，在减压蒸馏全过程中，接收瓶中应维持有连续不断的小气泡，蒸馏近干，关闭二路活塞，逐步启开通气管，防止蒸馏液倒吸，关掉真空泵，用少量水冲洗冷凝管，蒸馏液移入50mL容量瓶中，加水至刻度，混刀。同时做试剂空白试验。4．5．1．4．3测定吸取25mL蒸馏液与试剂空白液，分别置于100mL锥形瓶中，各加6.5mL水、2mL碘化钾溶液（150g/L）、2.5mL酸性氯化亚锡溶液，混刀，放置15min，以下按GB/T5009.11中5.2.1.1自“各加入3g锌粒”起依法操作。4．5．1．5计算10001000)(235432×××−=VVmmmX………………………………………………（2）式中：X2——样品中无机砷的含量，mg/kg；m3——测定用样品蒸馏液中砷的质量，μg；m4——试剂空白液中砷的质量，μg；m5——样品质量，g；V2——样品蒸馏液的体积，mL；V3——测定用样品蒸馏液的体积，mL。结果的表述：报告算术平均值小数后一位。4．5．1．6允许差同GB/T5009.11中第8章。4．5．2萃取法4．5．2．1原理样品中五价砷经碘化钾还原为三价砷，在8mol/L以上酸性介质中补乙酸丁酯、或苯等有机溶剂所萃取，将有机溶剂中三价砷反萃取于水中，用银盐法测定中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施GB/T5009.45—1996其砷含量。4．5．2．2试剂4．5．2．2．1乙酸丁酯或苯。4．5．2．2．2盐酸（7+5）。4．5．2．2．3盐酸（3+1）。其余同4.5.1.2。4．5．2．3仪器4．5．2．3．1离心机：4000r/min，使用50mL离心管。4．5．2．3．2抽滤装置：真空泵（或水泵），抽滤瓶，垂融漏斗或布氏漏斗，上加2号滤纸。4．5．2．3．3测砷装置：同GB/T5009.11中4.2条。4．5．2．4分析步骤4．5．2．4．1样品溶液处理按4.5.1.4.1制备的样品溶液经垂融漏斗或布氏漏斗抽滤，用5mL盐酸（7+5）洗涤锥形瓶和滤器（或将样品溶液离心后吸取上清液，用5mL盐酸（7+5）洗涤锥形瓶和离心管内残渣，离心，合并二次上清液），于样品溶液中加2mL硫酸，提高酸度至近9mol/L。4．5．2．4．2分离将上述样品溶液移入250mL分液漏斗中，加30mL乙酸丁酯，轻轻振摇120次，静置分层，分出盐酸于另一分液漏斗中，加30mL乙酸丁酯第二次萃取，合并乙酸丁酯萃取液，加15mL盐酸（3+1），振摇洗涤乙酸丁酯，静置分层，分出盐酸。在乙酸丁酯提取液中加10mL水，振摇120次，静置分层，分出水溶液中加到100mL锥形瓶中，再用10mL、5mL水重复萃取，合并三次水溶液。备用。同时做试剂空白试验。4．5．2．4．3测定吸取25mL提取水溶液及试剂空白水溶液中，分别加6.5mL盐酸、2mL碘化钾溶液（150g/L）、2.5mL酸性氯化亚锡溶液，混刀。放置15min，以下按GB/T5009.11中5.2.1.1自“各加入3g锌粒”起依法操作。4．5．2．5计算10001000)(7653××−=mmmX……………………………………（3）式中：X3——样品中无机砷的含量，mg/kg；m5——测定用样品溶液中砷的质量，μg；m6——试剂空白液中砷的质量，μg；m7——样品质量，g。结果的表述：同4.5.1.5。4．5．2．6允许差同GB5009.11中的5.2.1.3。4．6甲基汞4．6．1气相色谱法（酸提取巯基棉法）。4．6．1．1原理样品中的甲基汞，用氯化钠研磨后加入含有Cu2+的盐酸（1+11），（Cu2+与中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施GB/T5009.45—1996组织中结合的CH3Hg+交换）完全萃取后，经离心或过滤，将上清液调试至一定的酸度，用巯基棉吸附，再用盐酸（1+5）洗脱，最后以苯萃取甲基汞，用带电子捕获鉴定器的气相色谱仪分析。4．6．1．2试剂4．6．1．2．1氯化钠。4．6．1．2．2苯：色谱上无杂峰，否则应重蒸馏纯化。4．6．1．2．3无水硫酸钠：用苯提取，浓缩液在色谱上无杂峰。4．6．1．2．4盐酸（1+5）：取优级纯盐酸，加等体积水，恒沸蒸馏，蒸出盐酸为（1+1），稀释配制。4．6．1．2．5氯化铜溶液（42.5g/L）。4．6．1．2．6氢氧化钠溶液（40g/L）：称取40g氢氧化钠加水稀释至1000mL。4．6．1．2．7盐酸（1+11）：取83.3mL盐酸（优级纯）加水稀释至1000mL。4．6．1．2．8淋洗液（pH3～3.5）：用盐酸（1+11）调节水的pH为3～3.5。4．6．1．2．9巯基棉：在250mL具塞锥形瓶中依次加入35mL乙酸酐、16mL冰乙酸、50mL硫代乙醇酸、0.15mL硫酸、5mL水，混刀，冷却后，加入14g脱脂棉，不断翻压，使棉花完全浸透，将塞盖好，置于恒温培养箱中，在37±0.5℃保温4天（注意切勿超过40℃），取出后用水洗至近中性，除去水分后摊于瓷盘中，再在37±0.5℃恒温箱中烘干，成品放入棕色瓶中，放置冰箱保存备用（使用前，应先测定巯基棉对甲基汞的吸附效率为95%以上方可使用）。注：所有试剂用苯萃取，萃取液不应在气相色谱上出现甲基汞的峰。4．6．1．2．10甲基汞标准溶液：准确称取0.1252g氯化甲基汞，用苯溶解于100mL容量瓶中，加苯稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0mg甲基汞。放置冰箱保存。4．6．1．2．11甲基汞标准使用液：吸取1.0mL甲基汞标准溶液，置于100mL容量瓶中，用