DB22T 2478-2016 人参中人参总皂苷的测定 重量法

ICS65.020B39备案号：51661-2016DB22吉林省地方标准DB22/T2478—2016人参中人参总皂苷的测定重量法Determinationofginsenosidesinginseng-gravimetricmethod2016-05-31发布2016-07-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2478—2016I前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所、北京理工大学、吉林省参茸办公室、吉林省扶余市三岔河镇农业技术推广站。本标准主要起草人：王英平、逄世峰、肖盛元、张辉、毕鸿涵、赵景辉、崔丽丽、许世泉、张瑞。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2478—20161人参中人参总皂苷的测定重量法1范围本标准规定了重量法测定人参总皂苷的方法。本标准适用于人参、人参浸膏、人参提取物粉中人参总皂苷含量测定。本标准方法定量限是0.3%。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其昀新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T2301参业名词术语3术语和定义NY/T2301界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1人参ginseng五加科人参属多年生草本植物人参（PanaxginsengC.A.Mey.）的根3.1.1鲜人参freshginseng采收期从人工栽培土壤中采挖出来未经加工的人参。3.1.2干人参dryginseng新鲜的人参根经晾晒、蒸制或利用其他公认方法制备并干燥而成。该类产品可分为生晒参、红参、大力参等类型。3.2人参浸膏ginsengconcrete人参经水、乙醇、乙醇-水或公认的方法提取、沉降、浓缩而成的膏状产品。3.3本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2478—20162人参提取物粉ginsengextractpowder人参经水、乙醇、乙醇-水或公认的方法提取、浓缩、干燥而制成的粉末状产品。4原理试样经氨水-水-甲醇溶液提取，二氯甲烷脱脂，固相萃取净化，重量法定量。5试剂与材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的二级水。5.1反相聚合物NM200或相当者。5.2二氯甲烷（CH2Cl2）。5.3甲醇（CH3OH）。5.4氨水（NH3·H2O）：浓度25%。5.580%甲醇溶液：量取80mL甲醇，加水定容至100mL。5.6氨水-水-甲醇溶液（4+21+75）：分别量取4mL氨水、21mL水和75mL甲醇，将三者充分混匀。6仪器设备6.1分析天平：感量±0.0001g。6.2铝制称量皿：150mL。6.3粉碎机：粒度可达250μm。6.4分析筛：250μm。6.5固相萃取小柱：规格25mL，直径2cm，长度11cm，配有筛板。6.6烘箱：恒温105℃。6.7离心机：10000r/min。6.8分液漏斗：250mL。6.9注射器针头：4.5～5号。7试样的制备7.1人参7.1.1鲜人参取不少于350g鲜人参，切片，60°C烘干至含水量9%以下，粉碎，过250μm筛，筛上残留物不得超过5%，将筛上物和筛下物充分混匀密封。7.1.2干人参取不少于100g人参干样，含水量低于9%，粉碎，过250μm筛，筛上残留物不得超过5%，将筛上物和筛下物充分混匀密封。7.2人参提取物粉本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2478—20163取不少于15g样品，密封。7.3人参浸膏取不少于100g样品，密封，冷藏。8分析步骤8.1固相萃取小柱装填取固相萃取小柱，在柱底加一层筛板，倒入10mL反相聚合物（干重约1.6g），在上层加一层筛板，用50mL甲醇冲洗固相萃取小柱，使用前，用200mL水将甲醇替换，控制流速每分钟3～5mL，如流速过慢，可加压。然后在固相萃取小柱安装注射器针头，控制流速每分钟0.3～0.5mL，待上样。8.2样品处理8.2.1人参8.2.1.1提取称取5g样品，精确到1mg，用滤纸包好，将滤纸筒置于索氏提取器中，加入氨水-水-甲醇溶液，95℃回流提取8h。8.2.1.2脱脂收集提取溶液至蒸发皿中，水浴蒸干，共加入50mL水分次洗涤残渣，合并洗涤液至分液漏斗中，用50mL二氯甲烷萃取1次，静置至分界面清晰，弃去下层二氯甲烷，收集水层至蒸发皿中，水浴蒸干。8.2.1.3固相萃取共加入15mL水分次洗涤残渣，合并洗涤液，10000r/min离心10min，上清液加入已处理的固相萃取小柱，重复上述操作1次，当样品全部流过固相萃取小柱，去掉注射器针头，用300mL水洗脱样品，换100mL80%甲醇洗脱样品。8.2.1.4称重用已知重量的铝制称量皿收集醇洗液，水浴蒸干，转至烘箱中105℃干燥1～2小时，至恒重。8.2.2人参浸膏8.2.2.1脱脂称取2.5g样品，精确到1mg，共加入50mL水分次溶解样品并合并于分液漏斗中，用50mL二氯甲烷萃取1次，静置至分界面清晰，弃去下层二氯甲烷，收集水层至蒸发皿中，水浴蒸干。8.2.2.2固相萃取共加入15mL水分次洗涤残渣，合并洗涤液，10000r/min离心10分钟，上清液加入已处理的固相萃取小柱，重复上述操作1次，当样品全部流过固相萃取小柱，去掉注射器针头，用300mL水洗脱样品，换100mL80%甲醇洗脱样品。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2478—201648.2.2.3称重用已知重量的铝制称量皿收集醇洗液，水浴蒸干，转至烘箱中105℃干燥1～2小时，至恒重。8.2.3人参提取物粉8.2.3.1脱脂称取1.5g样品，精确到1mg，共加入50mL水分次溶解样品并合并于分液漏斗中，用50mL二氯甲烷萃取1次，静置至分界面清晰，弃去下层二氯甲烷，收集水层至蒸发皿中，水浴蒸干。8.2.3.2固相萃取共加入15mL水分次洗涤残渣，合并洗涤液，10000r/min离心10分钟，上清液加入已处理的固相萃取小柱，重复上述操作1次，当样品全部流过固相萃取小柱，去掉注射器针头，用300mL水洗脱样品，换100mL80%甲醇洗脱样品。8.2.3.3称重用已知重量的铝制称量皿收集醇洗液，水浴蒸干，转至烘箱中105°C干燥1～2小时，至恒重。9结果计算人参总皂苷的含量以X计，数值以%表示，按式（1）计算：mmmx21−=×100...................................(1)式中：1m——铝制称量皿和残渣干燥后的质量，单位为克（g）；2m——铝制称量皿的质量，单位为克（g）；m——试样的质量，单位为克（g）。10精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的5%。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2478—20165AA附录A（资料性附录）滤纸筒包装方法图滤纸筒包装方法见图A.1。取长方形滤纸，沿虚线1、虚线2对折，将5g人参粉平铺于3所示区域，沿虚线2将人参粉盖在滤纸里，沿虚线1封口，沿虚线4、虚线5对折封口，卷成卷，线绳系紧，即为滤纸筒。图A.1滤纸筒包装方法图_________________________________本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印