北京市实验动物从业人员岗位培训-第3章-2(高虹)

第一部分实验动物环境及设施管理高虹2011-12-18主要内容•动物设施的建筑要求•实验动物设施分类•动物设施的环境指标•实验动物的运输•屏障环境设施的运行及管理实验动物设施•广义上是指进行实验动物生产和从事动物实验设施的总和；•狭义上指保种、繁殖、生产、育成实验动物的场所，而将实验研究、试验检定等设施称为动物实验设施。一.设施建筑要求-选址•应避开自然疫源地。•宜选在环境空气质量及自然环境条件较好的区域。•宜远离有严重空气污染、振动或噪声干扰的铁路、码头、飞机场、交通要道、工厂、贮仓、堆场等区域。•若不能远离上述区域则应布置在当地夏季最小频率风向的下风侧。•动物生物安全实验室与生活区的距离应符合GB50346《生物安全实验室建筑技术规范》的要求。一.设施建筑要求-卫生•所有围护结构材料均应无毒、无放射性。•实验动物饲养间内墙表面应光滑平整，阴阳角均为圆弧形，易于清洗、消毒。•墙面采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料。地面应防滑、耐磨无渗漏。•天花板耐水、耐腐蚀。一.设施建筑要求-建筑•建筑物门、窗应有良好的密封性。•走廊净宽度一般不应少于1.5m，门大小应满足设备进出和日常工作的需要，一般净宽度不少于0.8m。饲养大型动物的实验动物设施，其走廊和门的宽度和高度应根据实际需要加大尺寸。•实验动物饲养间应合理组织气流和布置送、排风口的位置，避免死角，避免断流，避免短路。•各类环境控制设备应定期维修保养。•实验动物设施的电力负荷等级，应根据工艺要求确定。屏障环境和隔离环境宜采用二级电力负荷供电。•室内应选择不易积尘的配电设备，由非洁净区进入洁净区的各类管线管口，应采取可靠的密封措施。一.设施建筑要求-区域布局•前区的设置包括办公室、维修室、库房、饲料室、一般走廊。•饲育区的设置1动物生产区：包括隔离检疫室、缓冲间、风淋室、育种室、扩大群饲育室、生产群饲育室、待发室、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。2动物实验区：包括缓冲间、风淋室、检疫间、手术室、实验饲育间、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。3辅助区：包括仓库、洗刷间、废弃物品存放处理间（设备）、解剖室、密闭式实验动物尸体冷藏存放间（设备）、机械设备室、淋浴间、工作人员休息室。•动物实验设施应与动物生产设施分开设置。一.设施建筑要求-污水、废弃物及动物尸体处理•污水：应有相对独立的污水初级处理设备或化粪池；感染动物实验室所产生的废水，必须先彻底灭菌后方可排出。•废弃物：实验动物废垫料应集中焚烧处理。一次性工作服、口罩、帽子、手套及实验废弃物等应按医院污物处理规定进行统一焚烧。注射针头、刀片等锐利物品应收集到利器盒中统一处理。感染动物实验所产生的废弃物须先行高压灭菌后再作处理。放射性动物实验所产生放射性沾染废弃物应按GB18871《电离辐射防护与辐射源安全基本标准》的要求处理。•动物尸体：应装入专用尸体袋中存放于尸体冷藏柜或冰柜内，统一焚烧；感染动物实验的动物尸体及组织须经双扉高压灭菌器灭菌后传出实验室再作相应处理。二.设施分类-按使用功能分类•实验动物繁育、生产设施用于实验动物繁育、生产的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。•动物实验设施以研究、试验、教学、生物制品、药品生产等为目的进行实验动物饲育、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。•实验动物特殊实验设施包括感染动物实验设施(动物生物安全实验室)和应用放射性物质或有害化学物质等进行动物实验的设施。•实验动物繁育、生产设施和动物实验设施在环境要求及设施管理上是基本一致的。二.设施分类-按微生物控制程度分类•普通环境•屏障环境•隔离环境•屏障环境和隔离环境均应在压力变化相接处设有缓冲设置。普通环境•普通环境是饲养普通级动物的设施。•符合实验动物居住的基本要求，控制人员和物品、动物出入，不能完全控制传染因子，但能控制野生动物的进入，适用于饲育基础级实验动物。屏障环境•是标准动物饲养室或实验室用得最多的系统，符合动物居住的要求，严格控制人员、物品和空气的进出，•适用于饲育清洁实验动物及无特定病原体（SpecificPathogenFree，SPF）动物。•一切进入屏障的人、动物、饲料、水、空气、铺垫物及各种用品均须经过严格的微生物控制。•空气经低效、中效、高效过滤器进入动物饲养室或实验室，•出风口处需用滤材或经U形液体控制阀，避免室外风压大时空气倒流形成污染。•空气、人、物料、动物均为单向流通路线。屏障内设有供清洁物品和废弃物品流通的清洁走廊和污物走廊。隔离环境•采用无菌隔离器以保持无菌状态或无外来污染物。•隔离器内的空气、饲料、水、垫料和设备应无菌；•动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持内环境一致。•进入隔离器内的空气必须经过高效过滤•饲养人员与实验人员都不得与动物直接接触，工作人员只能通过附着于隔离器上的橡胶手套进行操作。•适用于饲育无特定病原体（SPF）、悉生动物（Gnotobiotic）及无菌(germfree)实验动物。二.设施分类-按设施的布局分类•无走廊设施很少使用，在运营中很难达到微生物和寄生虫控制标准。•单走廊设施压力：动物房→走廊→屏障外•双走廊设施有清洁走廊和污物走廊空气、人、物料、动物均为单向流通路线压力：清洁走廊→动物房→污物走廊→屏障外•三走廊设施共用清洁走廊，2个污物走廊空气、人、物料、动物均为单向流通路线压力：同双走廊设施布局与流程•功能区域的划分要明确•人流、物流、动物流要合理人流•第一更衣室—第二更衣室—风淋室—清洁走廊—动物饲养室（动物实验室）—污物走廊—屏障外物流•耐热类：全部鼠盒、水瓶、水、垫料、衣服等须经高压灭菌后方可进入，每次灭菌都要进行灭菌效果的检测，可将高压指示卡放在物品内一起灭菌。•不耐热类：须经传递舱进入，传递舱的使用同动物传递。•物品经污物走廊运出屏障系统。动物流•动物通过位于消毒前室和消毒后室的传递窗进入。•将运输盒放入传递窗，用喷雾器喷2%过氧乙酸或75%酒精，15min后由消毒后室打开传递窗，将动物拿到动物房内。•把动物装在运输盒内，用胶带封好后经污染走廊出屏障系统。二.设施分类-按气流分布分类•乱流式屏障设施•单向流屏障设施三.动物设施的环境要求-温度•普通环境啮齿类动物：18-29℃，非啮齿类动物：16-28℃•屏障及隔离环境：20-26℃，鸡：16-28℃•日温差：4℃三.动物设施的环境要求-相对湿度•定义：空气中实际水份含量占同等温度下饱和含水量的百分比。•最适宜相对湿度40-70%。三.动物设施的环境要求-照明•人工照明能达到与日光照明同样的效果，可操作性强，便于管理。•工作照明：＞200LX•动物照明：啮齿类动物：15-20LX非啮齿类动物：100-200LX鸡：5-10LX•昼夜明暗交替时间12h/12h或10h/14h三.动物设施的环境要求-噪声•来源：喂料、清扫、洗涤、搬运器材、谈话、犬吠、通风、空调等•≤60dB三.动物设施的环境要求-氨浓度•动物室内的有害气体主要为NH3、H2S等，其中氨的含量是衡量空气质量的最主要指标，•≤14mg/m3三.动物设施的环境要求-空气洁净度•动物体表皮毛、饲料、垫料等材料的碎屑，可被气流携带而在空气中悬浮飞扬，形成尘埃污染。尘埃往往又成为微生物的载体。•屏障环境：7级•隔离环境：5-7级洁净度•洁净度7级（1000级），屏障环境：≥0.5μm的尘粒数35200pc/m3-352000pc/m3，≥1μm的尘粒数于8320pc/m3-83200pc/m3，≥5μm的尘粒数293pc/m3-2930pc/m3。•洁净度5级（100级），隔离环境：≥0.5μm的尘粒数352pc/m3-3520pc/m3，≥1μm的尘粒数83pc/m3-832pc/m3，≥5μm的尘粒数≤29pc/m3。三.动物设施的环境要求-换气次数•主要设备是机械通气系统和空气调节系统•普通环境：≥8•屏障环境：≥15三.动物设施的环境要求-压强梯度•压强梯度（内外静压差）•屏障环境：≥10Pa•隔离环境：≥50Pa•单走廊压力：动物房→走廊→屏障外•双走廊压力：清洁走廊→动物房→污物走廊→屏障外三.动物设施的环境要求-沉降菌数对于微生物粒子常以非致病菌为指标•普通环境：-•屏障环境：3个/皿•隔离环境：无检出•在实验动物环境检测中，理化指标是重要的内容。•温度、湿度、照度、换气次数、噪声、落下菌数是所有设施环境检测中必须检测的项目。三.动物设施的环境要求-笼具•材质应符合对动物的健康和福利无害的无毒、无放射性、耐腐蚀、耐高温、耐高压、耐冲击、易清洗、易消毒灭菌的要求。•笼具的内外边角均应圆滑、无锐口，动物不易噬咬、咀嚼。笼子内部无尖锐的突起可伤害到动物。笼具的门或盖有能防止动物自己打开笼具或打开时发生意外伤害或逃逸。•笼具应限制动物将身体伸出，能避免伤害自己或人类或邻近的动物。•实验用大型动物的笼具尺寸应满足动物福利的要求和操作的需求。三.动物设施的环境要求-垫料•垫料的材质应符合对动物的健康和福利、吸湿性好、尘埃少、无异味、无毒性、无油脂、无伤害、耐高温、耐高压的要求。•常用垫料有木刨花、打碎的玉米杆、吸水纸、棉花等，容易获得，价格低廉。•垫料须经灭菌处理后方可使用。三.动物设施的环境要求-饮水•普通级实验动物的饮水应符合生活饮用水卫生标准的要求，应由新鲜、纯净的水源直接提供。•清洁级以上实验动物的饮水还须达到无菌要求。•饮水设备常用饮水瓶、饮水盒、自动饮水装置。各种动物每日的饮水需要量200～950ml红毛猴（成熟龄）100～200ml猫（2～4kg）25～35ml/kg(体重)狗（成熟龄）1～1.9l小型猪（成熟龄）8～12ml金黄地鼠（成熟龄）60～140ml/kg(体重)兔（1.4～2.3kg）85～150ml豚鼠（成熟龄）20～45ml大鼠（50g）4～7ml小鼠（成熟龄）饮水需要量动物品种实验动物环境控制的原则•充分利用和创造对实验动物有利的因素，消除有害因素，保证动物健康满足实验的需要。•定期进行实验动物设施环境监测，随时调整保持环境因子指标的稳定。•符合国家标准要求。四.动物运输-笼具•材质应符合对动物的健康和福利无害，并符合运输规范和要求。•能防止动物破坏、逃逸或接触外界，并能经受正常严格的运输。•笼具的大小和形状应适于被运输动物的生物特性，在符合运输要求的前提下要使动物感觉舒适。•笼具的外面应具有适合于搬动的把手或能够握住的把柄，搬运者与笼具内的动物不能有身体接触。•在紧急情况下，每个笼具要容易打开门，将活体动物移出。•实验动物的运输笼具要符合微生物控制的等级要求，并且在每次使用前必须进行清洗和消毒。四.动物运输-运输工具•能够保证有足够的新鲜空气和维持动物的健康、安全和舒适的需要，并应避免运输时运输工具的废气进入。•运输工具应配备空调等设备，使实验动物周围环境的温度维持在正常范围内，以保证动物的质量。•活体动物不能同有害物质或装置混装运输，以免对动物产生影响。•运输工具在每次运输实验动物前后均应进行消毒。四.动物运输-实验动物•同一运输空间内不得将不同等级的实验动物混装；•同一笼盒内不得将不同品系、不同性别的实验动物混装。•运输属于国家保护的实验用野生动物，应提供国家有关部门办理的准运证明，检疫证明。•如果运输时间超过6小时，应保证实验动物在运输途中有充足的符合要求的饲料和饮水。五.屏障环境设施的运行及管理-人员组成•设施负责人•饲养人员：饲养观察动物•实验人员：动物给药及手术•兽医：动物疾病诊断和治疗•清洁人员：笼具洗刷、消毒•机械设备管理和维修人员•动物质量监测人员五.屏障环境设施的运行及管理-饲料•按计划定期购入，不宜存放时间太久•购买正规厂家的饲料（有饲料合格证）•注意保质期：普通级3个月•饲料应在阴凉、干燥、通风房间•存放饲料房间有防野鼠设备五.屏障环境设施的运行及管理-垫料•多用小刨花、锯末•不宜过粗（吸水性不好），也不宜过细（易扬尘）•雪松类木料的刨花含有芳香烃类，有肝细胞毒性，增加癌症发生率。•高压灭菌处理。五.屏障环境