WST 224-2018 真空采血管的性能验证

ICS11.020C50WS中华人民共和国卫生行业标准WS/T224—2018代替WS/T224—2002真空采血管的性能验证Performanceverificationofvacuumtubesforvenousbloodspecimen2018-04-27发布2018-11-01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布WS/T224—2018I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准代替WS/T224-2002《真空采血管及其添加剂》。与WS/T224-2002相比，除编辑性修改外主要变化如下：——标准名称修改为《真空采血管的性能验证》；——增加了真空采血管的临床评价指标（见4.4～4.6和4.8）；——删除了原标准中部分由生产厂商测试的内容(2002年版4～7和9-13）；——修改了管体强度标准，将相对离心力提高到3000g（见4.3，2002年版8.1）。本标准起草单位：广东省人民医院、中山大学孙逸仙纪念医院、广州医科大学附属第一医院、同济大学附属同济医院。本标准主要起草人：邹伟民、李红玉、林勇平、万海英、邓冠华。WS/T224—20181真空采血管的性能验证1范围本标准规定了真空采血管性能要求及验证方法。本标准适用于临床实验室在正式使用新采血管前对其进行性能验证。对正在使用的采血管的检测结果有疑问、查找原因可能与采血管相关时，也可采用本标准对采血管进行性能验证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1添加剂additive在一个标本采集管中，添加的任何促进一个预定功能（如防止凝血或糖酵解）的试剂。注：尽管容器盖不被认为是一种添加剂，但它可能含有或涂覆添加剂，若它们进入标本中接触，应被认为是添加剂。3.2促凝剂clotactivator用于激发凝血机制的试剂。3.3抗凝剂anticoagulant用于防止血液或血液制品凝固的试剂。3.4偏倚bias检测结果的预期值与可接受值之间的差异。3.5管盖tubeclosureWS/T224—20182密闭容器的组件。注：管盖的作用使采血后容器的口部与外界形成隔离以确保安全，一般管盖内部还有一个能与容器口部形成密封的塞体以保护血样，本标准称其为管盖而不称其为塞子，目的是突出其安全作用。3.6公称液体容量nominalliquidcapacity，NLC采血管用于容纳样品及添加剂的体积。3.7重量测定分析法gravimetricanalysis通过称重和校正液体的质量密度测定液体体积的方法。注：本文件中，以1000mL水的质量为1000g。3.8抽吸量drawvolume，DV从静脉穿刺处负压吸至真空采血管中的血液的体积。注：在标准条件（温度18℃～25℃，标准大气压）下，真空采血管采水到平衡时的总重量。3.9真空采血管vacuumtube带有附加物、添加剂和管盖的用于装血液样品的真空器皿。3.10采血管附加物receptacleaccessory生产者放于采血管内部，以有助于采集、混合或分离样品的部件。示例：放入血清或血浆采血管中的小型塑料惰性球（或分离胶），用于离心后从血液中分离血清或血浆。3.11样本sample研究中实际观测或调查的一部分个体。通过检查、研究和分析样本的特征来反映总体情况。3.12验证verification通过提供客观证据对规定要求已得满足的认定。注：终端用户（临床实验室）有责任验证制造商生产的器械性能。4真空采血管的性能验证4.1外观WS/T224—20183试管应透明，无异物；试管无变形和破损；标识应清晰（真空采血管标签及管盖颜色国际通用标准参见附录A）；管盖无脱落；采血管内的分离胶的胶体应呈凝胶状。4.2抽吸量4.2.1要求抽吸量应准确，抽吸量与公称液体容量的相对偏倚应在-10%～10%之间。4.2.2验证方法4.2.2.1试剂水，符合GB/T6682的三级水的要求，温度在18℃～25℃。4.2.2.2仪器500mL烧杯；考察管；滤纸；分析天平；20G（内径38mm）标准双向软连接采血针。4.2.2.3取样采用一次抽样方案取样，随机抽取30支，按照标准操作进行采水，记录相关数据。4.2.2.4步骤（重量测定分析法）a)将500mL的烧杯装满水；b)将1～30支管进行编号且称重，这为采血管的初始重量，记为Wi1，其中i为1～30；c)将采血针的静脉穿刺针（穿透一个纯胶塞）浸入盛满水的烧杯中，另一端的管塞穿刺针刺穿真空采血管的胶塞进行采水，保持采血管的高度与水液面的高度大致一致，采水达到平衡时拔管；d)依次将编号为1～30的采血管进行采水，注意烧杯内水的液面高度与采血管的液面高度保持在同一水平线上；e)采水完毕，用滤纸吸取胶塞表面可能残留的水分；f)然后将采水后编号为1～30的采血管进行称重，这是真空采血管采水后的重量，记为Wi2，其中i为1～30；g)抽吸量的计算见式（1）：DV=(NiiW12-NiiW11)/N.................................(1)式中：Wi1----采血管的初始重量，单位为克（g）；Wi2----采血管采水后的重量,单位为克（g）；i----自然数编号，范围为1～30；DV----抽吸量，单位为克（g）；N----检测对象的总量，即N=30。注：本标准中，以1000mL水的质量为1000g。h)抽吸量与公称液体容量之间的相对偏差（relativedeviation，简写为RD），其计算见式（2）：WS/T224—20184RD=（DV-NLC）/NLC×100%.................................(2)式中：RD----相对偏差；DV----抽吸量，单位为克（g）；NLC----公称液体容量，单位为毫升（mL）。4.3管体强度4.3.1要求采血管在水平式离心机下应能承受3000g的相对离心力，即测试采血管在充装水至刻度线的条件下，用水平式离心机采用3000g的相对离心力，离心10min而不发生破裂或泄露。4.3.2验证方法4.3.2.1试剂水，符合GB/T6682的三级水的要求，温度在18℃～25℃。4.3.2.2仪器500mL烧杯；水平离心机，最大能提供5000g相对离心力。4.3.2.3步骤a)随机抽取30支采血管充装水至刻度线，并保持采血管外观干净，无液体；b)将30支采血管放入水平离心机中，注意离心机的平衡；c)设置离心参数，当转速稳定时的最大相对离心力为3000g，离心时间为10min（例：离心半径为17cm，转速为4000r/min，离心10min）；d)离心机停止后，小心取出采血管；e)观察采血管外壁是否有液体渗漏。4.4血清分离管纤维蛋白挂壁4.4.1要求按照4.4.2.2的步骤进行测试，血清分离管离心后不应出现纤维蛋白挂壁。注：若采用分离胶促凝管进行测试时，可以增加评估分离胶的性能。4.4.2验证方法4.4.2.1仪器考察管；采血针；医用消毒用具；40个静脉血标本；水平离心机；试管架。4.4.2.2步骤a)试验条件：温度为18℃～25℃，压力为当地的环境大气压；b)将采血管进行编号，考察管依次为1～40；c)按照标准的采血操作流程进行采血，每个人采1支管，采血后立刻进行摇匀（按照制造商规定的摇匀次数），然后竖直放置在试管架上静置；WS/T224—20185d)当全部40个人采完血后，开始记时；e)30min后将40支管一次全部放入离心机中进行离心操作；f)离心参数参考产品说明书中制造商的要求；g)离心完毕，取出40支管观察并记录有无纤维蛋白挂壁现象。4.5溶血情况4.5.1要求按照4.4.2.2的步骤进行测试，采血管采血后进行离心，不应出现溶血（排除临床原因）。4.5.2验证方法a)按照4.4.2.1、4.4.2.2a）～f）的内容进行操作；b)离心观察并记录40支考察管的血清或血浆质量情况。4.6抗凝管的凝血情况4.6.1要求按照4.4.2.2的步骤进行采血，抗凝管中充分混匀的血液标本在显微镜下观察应无凝块。4.6.2验证方法a)按照4.4.2.1、4.4.2.2a）～d）的内容进行操作；b)3h后用显微镜对40个标本进行观察是否有凝块。注：4.4～4.6三项指标的评价可以结合临床性能评价一起进行测试。4.7无菌4.7.1要求真空采血管内腔应无菌，即按照4.7.2.3的步骤进行测试，结果判定为合格。4.7.2验证方法4.7.2.1试剂75%酒精溶液；75%酒精棉球；硫乙醇酸盐液体培养基；改良马丁培养基；0.9%无菌氯化钠溶液。4.7.2.2仪器隔水式恒温培养箱；生化培养箱；生物显微镜；自动高压灭菌器；电热恒温干燥箱；酒精灯；火机；镊子。4.7.2.3步骤a)抽样：任意抽取需考察的采血管10支；b)供试液的制备：含液体的采血管如凝血功能检测管、血沉检测管，以其管内含有的液体为供试液；不含液体的￠16mm×100mm采血管用5mL0.9%无菌氯化钠溶液进行振荡溶解，作为供试液备用；不含液体的￠13mm×100mm的采血管用4mL0.9%无菌氯化钠溶液进行振荡溶解，作为供WS/T224—20186试液备用；不含液体的￠13mm×75mm的采血管用3mL0.9%无菌氯化钠溶液进行振荡溶解，作为供试液备用；c)供试样品的培养：将供试液置于装有硫乙醇酸盐液体培养基、改良马丁培养基的容器中进行培养；d)培养及观察：上述含培养基的容器按规定的温度（细菌30℃～35℃，真菌23℃～28℃）培养14d。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。若出现异常时则每天上、下午各观察一次。如在加入供试品后或在培养过程中,培养基出现浑浊，培养14d后，不能从外观上判断有无菌生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中或划线接种于斜面培养基上，细菌培养2d,真菌培养3d，观察接种的同种新鲜培养基是否再出现浑浊或斜面上有无菌生长；或用接种环取培养液涂片，染色，镜检，进行判断是否有菌生长。e)阴性对照：取同一批号空白硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基各一支作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。f)阳性对照：在生物安全柜操作，接种金黄色葡萄球菌至营养肉汤培养基中，30℃～35℃培养18h～24h。用0.9%无菌氯化钠溶液制成小于100CFU/mL的菌悬液。菌悬液制备后保存在2℃～8℃，24h内使用。接种1mL小于100CFU的金黄色葡萄球菌菌悬液于硫乙醇酸盐流体培养基中，应生长良好。g)结果判定：当供试品管液体均显澄清，阴性对照管液体均显澄清，阳性对照管液体显浑浊时供试品管为合格；当阴性对照管液体显澄清，阳性对照管液体显浑浊，供试品管液体显浑浊时供试品管为不合格；当阴性对照管液体显浑浊或阳性对照管液体显澄清时，实验无效。4.8结果可比性4.8.1确定需要进行结果比对的检测项目一般情况下，应对临床检测报告上的检测项目进行可比性验证，可优先对附录B中的检测项目进行验证。4.8.2确定用于检测的检测仪器实施结果比对时，应对用于检测临床样本的检测系统进行可比性验证。4.8.3比对样本4.8.3.1样本选择采用来自于不同患者的临床样本作为比对样本。4.8.3.2样本浓度水平样本浓度应在方法的线性范围内，并覆盖医学决定水平。分析样本的浓度应尽可能在线性范围内均匀分布。4.8.4要求可比性验证的可接受标准应满足临床需要，同时考虑检测系统的性能状况。不同项目分析质量要求可采用国家认可机构设置的分析质量的最低标准。采血管不同项目比对结果的相对偏倚若符合分析质量要求，表明考察管可满足临床应用要求。WS/T224—201874.8.5验证方法4.8.5.1采血管选择只需使用两种不同的采血管一个批号的产品同时采血进行实验,一种是比对管，一种是考察管。4.8.5.2样本要求至少分析20个不同的临床患者样本。只有在室内质控合格的情况下，实验室数据才有效