郓城县职教中心应用技术培训教材

郓城县职教中心应用技术培训教材食用菌栽培技术郓城县职教中心生物科技组食用菌栽培教案章节、课题绪论目的要求掌握食用菌的概念；理解食用菌的营养价值和药用价值；了解我国和我省发展食用菌的有利条件；明确学习本门课的目的和意义。重点、难点食用菌的概念和营养价值和药用价值复习、提问教学内容第一节食用菌的概念1、食用菌是指可供人们食用的一类大型真菌。2、食用菌隶属于菌物界真菌门中的担子菌亚门和子囊菌亚门。第二节发展食用菌生产的意义1、食用菌的营养价值：21世纪的理想健康食品2、食用菌的药用价值：提高人体免疫机能，调节生理代谢，预防疾病，延年益寿。3、发展食用菌生产具有显著的经济、生态和社会效益第三节我国食用菌产业1、我国食用菌产业的概况已成为世界上最大的食用菌生产和出口国。栽培种类多，产品加工多样化，栽培方式向代料栽培发展。但食用菌产业发展不平衡，品种自主知识产权不完善，科研、产品质量、深加工等领域与世界先进水平有较大的差距。2、我国食用菌产业的发展趋势加强食用菌生产的产业化、标准化建设，深加工，菌种管理，科研等。章节、课题第一章食用菌的形态结构及分类目的要求本章要求学生掌握食用菌的组成成分；重点掌握菌丝体和子实体的一般结构及特殊结构；了解食用菌子实体的发育形式。掌握食用菌的形态结构；了解食用菌的分类。重点、难点食用菌的组成成分；掌握菌丝体和子实体的一般结构及特殊结构复习、提问食用菌的概念，发展食用菌的意义。教学内容第一节食用菌的形态结构1、菌丝体的形态结构：①菌丝：食用菌孢子在适宜条件下萌发形成的管状细丝。②菌丝体：由许多菌丝组成的菌丝群。③菌丝的形态：菌丝都是多细胞的，一般呈管状，无色、透明，有隔膜将菌丝隔成多个细胞。食用菌菌丝内细胞核的数目不一，有单核、双核核多核细胞。双核菌丝是大多数担子菌的基本菌丝形态。④菌丝体功能：吸收营养；运输作用；储藏代谢产物；繁殖作用。⑤菌丝的类型A、初生菌丝：由孢子萌发形成的菌丝。B、次生菌丝：由两条初生菌丝质配萌发形成的菌丝。C、三生菌丝：由次生菌丝进一步发育成菌丝束称为三生菌丝。⑥菌丝的组织体A、菌丝束：由菌丝平行排列一起形成肉眼可见的叫菌丝束。B、菌索：由菌丝形成的绳状。C、菌核：由菌丝形成核状。D、菌膜：由食用菌表面一层菌皮。E、子座：由菌丝组织和疏丝组织构成的容纳子实体的褥座状结构。2、子实体的形态结构：①子实体：是食用菌产生孢子病繁殖后代的器官，也是共人们使用的主题部分，通常人们使用的“菇、菌、蘑、耳、蕈”就是指的这一部分。②主要组成部分：有菌盖、菌褶、菌柄、菌环、菌丝等组成。第二节食用菌的分类1、生物的分类：植物、动物、菌物三界。2、食用菌的种类：种类多，分布广，全世界已发现2000余种。第三节毒菌的识别1、毒菌及中毒类型①毒菌类型：毒鹅膏菌、春生鹅膏菌、鳞柄白鹅膏菌、肉褐鳞小伞、毒丝膜菌、细鳞线膜菌、秋盔孢伞②中毒类型：胃肠中毒型、神经精神型、溶血型、肝脏损害型、呼吸与循环衰竭型、光过敏性皮炎型。2、毒菌中毒后的急救措施立即呼叫救护车赶往现场；呼救时最重要的是让中毒者大量饮用加入少量温开水或稀盐水，然后把手指伸进咽喉催吐，以减少毒素的吸收；在等待救护车期间，最好让患者饮用少量的食盐和食用糖的“糖盐水”补充体液，防止反复呕吐发生脱水和休克；对于已昏迷的患者不要强行向其口内灌水，防止窒息；为患者加盖毛毯保温。章节、课题第二章食用菌的生理生态目的要求掌握食用菌的营养；掌握食用菌的理化环境；了解食用菌的生物环境。重点、难点食用菌的理化环境复习、提问食用菌的形态结构、分类相关知识教学内容第一节食用菌的营养1、营养物质：碳源、氮源、无机盐及生长因子2、生理类型：腐生、寄生及共生第二节食用菌的理化环境1、温度食用菌的生长繁殖都在一定的温度下进行。除草菇外，菌丝生长的温度范围为5～32℃，最适宜的温度是24～26℃。2、水分和湿度水分指培养料的含水量。菌丝生长阶段棉籽壳含水量60～65%；木屑含水量30～50%。指空气相对湿度。菌丝生长阶段：60～70%；子实体生长阶段：85-95%。3、空气经常保持食用菌生长场所空气新鲜、氧气充足，是食用菌正常发育生长的重要条件。4、光照菌丝生长阶段一般不需要光照。子实体生长阶段不同的食用菌有不同的要求。5、酸碱度大多数食用菌喜酸性环境。适宜菌丝生长的PH值在3～8间，最适pH值为5.0～5.5。第三节食用菌的生物环境1、食用菌与微生物存在着复杂的关系。2、食用菌与动物存在某些微妙的关系。3、食用菌与植物关系密切而复杂。章节、课题第三章食用菌的生活史与遗传育种目的要求本章要求学生掌握食用菌的生殖方式；掌握食用菌的生活史；了解食用菌的良种选育。重点、难点食用菌的有性生殖。难点：良种选育复习、提问食用菌的营养、理化环境相关知识教学内容第一节食用菌的生殖方式第一节1、有性生殖通过两性生殖细胞的结合而产生新个体者。有性生殖方式产生的子代，兼有双亲的遗传特性，比无性生殖所产生的新个体生活力强，变异性打。2、无性生殖指不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生后代的生殖方式，其后代能很好地保持亲本原有的性状。3、准性生殖不通过减数分裂而导致基因重组的一种生殖方式，常见于丝状菌中。第二节食用菌的生活史1、担子菌中食用菌的生活史：担孢子→初生菌丝→次生菌丝→子实体2、几个有代表性的生活史：双孢蘑菇、草菇、香菇、滑菇。第二节食用菌的生活史一、生活史的概念所谓生活史，是指生物一生所经历的生长发育和繁殖阶段的生活周期(全过程)。食用菌的生活史是指从孢子到孢子的整个生长发育过程。即从孢子在适宜的条件下萌发开始，先形成单核菌丝，单核菌丝融合形成双核菌丝，当双核菌丝发育到生理成熟阶段，菌丝扭结生长成子实体，子实体产生新一代孢子，至孢子散落而告终。二、食用菌中伞菌类的典型生活史食用菌中伞菌类的典型生活史由以下六个阶段组成：1担孢子萌发，生活史开始。2单核菌丝（初生菌丝）开始发育。3两条可亲和的单核菌丝融合(质配)。4形成异核的双核菌丝(次生菌丝)5在适宜的环境条件下，双核菌丝发育成结实性菌丝(三生菌丝)并组织化，产生子实体。6子实体菌褶表面或菌管内壁的双核菌丝的顶端细胞发育成担子，进入有性生殖阶段。三、食用菌中几种有代表性的生活史类型第三节食用菌的良种选育食用菌栽培是一系列复杂操作的工作程序，包括种菇选择、母种选育与保存、菌种制备、出菇管理及市场销售等，每个程序都有至关重要的细节操作。但育种是这些工作中首要的一项工作，没有优良的菌种，不管其他工作程序准备及管理得多么好，都会造成减产或失败。一、引种与选择育种（一）引种引种应遵照以下原则和程序进行：1．了解供种单位2．了解品种3．了解拟引进品种的生物学特性和栽培要点4．先试种再扩大5．品种配套（二）选择育种选择育种是最古老、最简便、应用最广的选种方法。它是先分离和收集各地的有关菌株，然后通过生产试验比较各菌株的生产性能，选留最优者。只要我们经常注意菌种的选育，不断淘汰劣等菌株，选留优秀菌株，就能使生产丰收，质量稳定，具体步骤如下：1．资源的收集与采集2．生理性状测定（1）菌珠撷颃性试验（2）同工酶谱和酶活性测定将有撷颃性菌株做酯酶同工酶测定，以确定亲缘关系的远近，同时测定其他酶活性并比较差异。（3）菌丝生长速度测定在适宜的平板培养基上适温培养菌株，测定菌落直径，最后计算菌丝的生长速度。3．菌株出菇性能比较试验经生理生化试验选出的菌株，进一步比较它们的出菇性能。试验按生物统计原理设计，各菌株产量要单收单计，同时对每个菌株的菇形、色泽、温型、始菇期、菇潮情况和干鲜比等都要作详细观察和记录。4．扩大栽培试验每个品种一地一次的代料栽培面积不少于50m2,段木栽培不少于是100根。最好多点重复试验。5．示范推广试验选择有代表性试验点进行较大面积的栽培试验，以进一步考察和拟推广的优良菌株。二、杂交育种杂交育种是培育菌种的有效手段。杂交是通过2个或几个亲株的染色体片段的交换或重行组合而获得新性状的。进行杂交时，亲代必需有标记。凡同宗接合的食用菌，可用营养缺陷型来标记。营养缺陷型是指在营养特征上表现某种缺陷的变异菌株。它在不含氨基酸、维生素等有机物的基本培养基上不能生长。我们可以把2个不同品种的营养缺陷型混合接种在基本培养基上，如果它们能生长，即就意味着它们可能进行了杂交。对于异宗接合的食用菌，可以利用菌丝的性别来进行杂交，取来自两种不同品系的单孢子分离物混合接种在一起，经培养后，凡出现双核菌丝的组合，并能正常结实，就证明能杂交。通过杂交亲代的选择，就能得到融合亲代优点而除去亲代缺点的优良菌种；使生产水平大幅度地提高。（一）杂交育种的基本原则1．亲本的选择（1）双亲本都要有突出的优点（2）亲本之间要有较大的遗传差异（3）杂交亲本应具有较好的配合力2．杂交的方式3．杂交子的选择（二）杂交育种的方法杂交育种的一般程序为：选择亲本单孢分离杂交配对转管繁殖初筛复筛试验示范推广。1．单孢分离（1）玻片稀释分离法（2）平板稀释分离法（3）显微操作器分离法2．单×单杂交3．单×双杂交核化，即可挑取少量菌丝至斜面培养基上培养。4．优良菌株筛选和确证三、诱变育种（二）诱变剂1．碱基的类似物，如5-溴尿嘧啶（BU）2．碱基化学修饰物3．嵌合剂和移码突变常用的嵌合剂有吖啶橙、二氨基吖啶和吖啶黄素等。4．辐射诱变紫外线（UV）诱变电离辐射诱变激光诱变离子束诱变（三）诱变育种的基本方法1．制备菌悬液细胞诱变处理最好是单核的。处理时最好使细胞处于悬浮状态，悬浮浓度应控制在106个/mL，配制孢子悬浮液可用生理盐水或缓冲液。一般物理因子处理时可用生理盐水，如当诱变剂随着PH值改变会产生不同效应时，则必须用缓冲液配制。2．诱变剂的选择物理诱变剂中，紫外线具有无需特殊设备、成本低廉、对人体的损害作用易于防止等优点，诱变效果也较好，因此，尽管新的物理诱变因子不断出现，紫外线仍是最常用的物理诱变因子之一。常用化学诱变剂可归为两类：烷化剂和碱基类似物。常用的烷化剂有EMS、NTG、EES和芥子气，碱基类似物有5-BU和2-AP。一般而言，若对一个菌株进行多次诱变处理，使用多种诱变剂比每次都使用同一种诱变剂的效果好。3．诱变的处理各种诱变剂都有不同的剂量表示方式，育种工作中常用杀菌率来表示各种诱变剂的相对剂量。诱变率随剂量的增高而增高，但并不是越高越好。（1）物理诱变实验室普遍使用的是无需特殊设备的紫外线。在暗室的诱变箱中装15W的紫外灯管，诱变前先预热20min，然后将5mL孢子悬浮液移入直径6cm的培养皿或10-12mL孢子悬浮液移入直径9cm的培养皿中，打开盖放在距离紫外灯管30cm处照射0.5-5min，处理后可直接稀释涂平板，增殖培养时必须用黑纸包住三角瓶。（2）化学诱变现仅用应用较多的化学诱变剂甲基磺酸乙酯（EMS）为例，简要介绍其使用方法。处理食用菌孢子时，甲基磺酸乙酯的浓度一般为0.1-0.4mol/L，下面以0.15mol/L为例：a．将食用菌孢子悬浮在0.1mol/L，PH7.0的磷酸盐缓冲液中，孢子浓度为106个/mL。b．9cm孢子悬浮液中加入浓度为0.15mol/L甲基磺酸乙酯溶液1mL，摇匀后保温3-6小时，也可适当延长或缩短时间。c.离心、洗涤，稀释涂平皿或加入基培养过夜后再涂平板。4．挑选突变株诱变后的孢子以培养长出菌落后应及时挑选菌落。同宗结合的菌株选择发育健全的单个菌落。异宗结合的选择两个可亲和的单核菌落配对。最后进行栽培实验，比较生产性能。选出的菌株中，发生突变的仅占少数。而产生显著高产优质正向突变的菌株更是极少数。因此，诱变育种中，初筛的菌株不可过少，通常选择100-1000个菌株，并设置重复，以确保实验的可靠性。四、生物技术在食用菌良种选育中的应用（一）原生质体融合技术1．原理细胞是遗传物质贮存的仓库，每个多细胞生物的单细胞都能代表该物种的基因型，并且具有生长发育成完整个体的潜势。通过原生质体融合，可以使遗传性状不同的两个细胞融合人一个细胞，从而导致两套基因组之间的接触、交换而进行重组。然后就可以在再生细胞中，筛选出遗传性状变异的后代。2．原生质体融合