TCRHA 010-2022 健康献血者的单个核细胞资源储存规范 第7部分：细胞资源储存设施设备的运

ICS11.020CCSC05团体标准T/CRHA010—2022健康献血者的单个核细胞资源储存规范第7部分：细胞资源储存设施设备的运行维护SpecificationformononuclearcellresourcestorageinhealthyblooddonorsPart7：Operationandmaintenanceofcellresourcestoragefacilities2022-06-15发布2022-07-01实施中国研究型医院学会  发布T/CRHA010-2022I目次前言............................................................................II引言...........................................................................III1范围.................................................................................12规范性引用文件.......................................................................13术语和定义...........................................................................14基本原则.............................................................................15确认.................................................................................16设施受控管理.........................................................................27环境监测.............................................................................28洁净空调系统的维护...................................................................29液氮储存系统及供应系统...............................................................310清洁................................................................................3T/CRHA010-2022II前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是《健康献血者的单个核细胞资源储存规范》的第7部分。考虑到本文件中的某些条款可能涉及专利，中国研究型医院学会不负责对任何该类专利的鉴别。本文件由中国研究型医院学会临床数据与样本资源库专业委员会提出。本文件由中国研究型医院学会归口。本文件起草单位：唐颐控股（深圳）有限公司、国家卫生健康委科学技术研究所国家人类遗传资源中心、解放军总医院临床生物样本中心、中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）、解放军总医院医学创新研究部创伤修复与组织再生研究中心、深圳华大基因细胞科技有限责任公司、天津经济技术开发区唐颐细胞智造与神经创伤修复研究院、北京唐颐惠康生物医学技术有限公司、新乡医学院干细胞与生物治疗中心、广州金域医学检验集团股份有限公司、唐颐惠康（深圳）生物医学技术有限公司。本文件主要起草人：曹毓琳、李国喜、赵秀梅、徐绍坤、田亚平、贺媛、马士卉、杨爽、程世翔、林俊堂、孙晓艳、赵鹏、周红梅、江婧婧、王健、冉伟、艾秋颖。T/CRHA010-2022III引言近年来，随着细胞学、免疫学、分子生物学等技术的快速发展，免疫细胞疗法已作为一种安全有效的治疗手段应用于临床，在肿瘤综合治疗中的作用尤为突出，成为继手术、化疗和放疗之后的第四大治疗肿瘤较为有效的方法。当前，用于治疗的免疫细胞主要来自患者自体外周血分离的单个核细胞经过体外的诱导扩增或工程化改造回输人体，这使得免疫细胞疗法在质量、数量和成本上成为制约其产业化应用的瓶颈。健康人外周血中的单个核细胞资源具有极高的再利用价值。以往的采供血处理，将其作为医疗废弃物进行处理，近些年，随着细胞生物技术发展和临床研究结果显示，人的机体免疫力随着年龄而逐步衰减，尤其是外周血中的免疫细胞的成分和功能随着年龄的增长而变化。在青年阶段的健康人员的外周血中的免疫细胞活性最强，借鉴于输血医学的理论基础，如何将该类细胞进行纯化并保存，为未来诸多免疫疗法提供丰富的细胞资源，成为国内外研究的热点。《健康献血者的单个核细胞资源储存规范》旨在规范健康献血者的单个核细胞资源储存活动，拟由八个部分构成：——第1部分：知情同意与供者筛查。——第2部分：采集与运输。——第3部分：供者血液样本检测。——第4部分：单个核细胞的分离、处理与储存。——第5部分：单个核细胞产品质量评价与放行。——第6部分：细胞资源储存设施的设计与建设。——第7部分：细胞资源储存设施设备的运行维护。——第8部分：数据电子信息化的管理。通过对健康献血者的单个核细胞资源储存过程中的知情同意与供者筛查、采集、运输、样本检测、分离、处理、储存、产品质量评价与放行、储存设施的设计与建设、储存设施设备的运行维护以及数据电子信息化管理等进行规范，为从事单个核细胞资源储存业务的单位提供完整的参考。T/CRHA010-20221健康献血者的单个核细胞资源储存规范第7部分：细胞资源储存设施设备的运行维护1范围本文件规定了基于健康献血供者提供的外周血中的单个核细胞资源储存设施设备的日常维修维护方面的规范。本文件适用于公共库健康供者单个核细胞资源储存设施设备的运行维护。本文件不适用于造血干细胞库的管理。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。T/CMBA011—2020人外周血单个核细胞的采集、分离和保存3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。单个核细胞peripheralbloodmononuclearcell,PBMC外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞、单核细胞、树突状细胞和其他少量细胞（造血干细胞等）。[来源：T/CMBA011—2020，3.1]4基本原则应建立细胞资源储存设施设备运行维修维护规程，并按照规程执行定期分级别、分区域的维护保养，并予以记录。内部维护人员应经厂家工程师培训考核后方可执行后续设施设备的维修维护工作，委外的维修维护应保留维修维护记录。严格按照设施设备的维护规程要求对设备进行清洁、消毒及维护保养并予以记录。应有明确的状态标识，包括：设施设备名称、编号、运行状态和校准状态标识等。应建立防止昆虫和其他动物进入的设施或措施。设施内部应依据工艺流程进行特定的功能分区，保持不同功能区的独立性和专属性，避免功能交叉使用和混淆使用。符合微生物安全管理级别的区域应受控管理。运行维护对象：本文件中运行维护的对象主要是影响储存环境的相关设施设备系统，主要包括洁净空调系统和液氮储存系统及供应系统的维护。5确认T/CRHA010-20222细胞资源设施设备投入使用前，应经过系统的确认（安装确认、运行确认和性能确认），明确确认的周期、方法及合格标准等。发生以下情况时（包括但不限于以下情况），应对设施设备进行再次确认：a)设施设备大修后；b)设施设备更新升级后；c)设施设备发生系统性偏差后；d)设施设备改造后。6设施受控管理实验区域仅限于该区域操作人员和经批准的人员进入。除政府主管部门检查人员外的参观人员不得进入洁净室（区），进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩戴饰物，不得裸手直接接触实验室器具和细胞制品。传染病、皮肤病患者和体表有伤口者不得进入洁净室（区）。未经批准的非实验室（区）相关人员一律不得进入实验室（区）。临时来访客人应在接待大厅等候，被访问人不应将其带入实验室（区）。7环境监测应建立细胞储存设施设备的环境监测规程和计划，并依据计划实施和记录。工作人员在每次启动净化空调系统应至少在生产制备前后确认并记录洁净区的环境参数。环境监测内容包括洁净区和非洁净区的压差、不同级别的洁净区之间的压差，不同级别的洁净区的温湿度、洁净度等，并予以记录。不同洁净区的环境控制要求见表1。表1不同洁净度环境温湿度及压差要求项目洁净A级区洁净B级区洁净C级区洁净D级区温度18℃-26℃18℃-26℃10℃-30℃10℃-30℃湿度45%-65%45%-65%20%-80%20%-80%压差洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应不低于10Pa。必要时，相同洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间也应保持适当的压差梯度。7.4.1每月根据洁净区内尘埃粒子数、压差、沉降菌等项目的检测结果判断净化空调系统运行状况，有不合格的情况应及时处理及整改。7.4.2非洁净工作区应每天巡检记录环境的温湿度情况，细胞储存设施设备应每天巡检温度、湿度、液氮体积、氧气浓度等数值。8洁净空调系统的维护工作人员应每天巡检空调系统，查看空调的运行情况。每月清洗一次初效过滤器，保持初效过滤器的洁净度。每月应检查一次风机皮带的张力，对电机、风机、皮带做维护保养；每月向排水管道倒入适量的管道疏通剂，用于清洁管道弯头处的污垢，防止排水管道堵塞。建立定期保养检查，实行三级维护，即：季维护、年维护、两年维护。T/CRHA010-20223季维护：每季度检查机柜内表面进行清洁卫生，及时处理机柜的污垢，疏通空调排水管道。年维护：每年检查机柜的电子元件，内部清洁、线路整理、紧固电子元件、更换受损的配件，更换初效过滤器、中效过滤器。两年维护：每两年检查调整设备的主要部件，检修送风管道、回风管道，将受损的管道进行密封处理，包括风柜外表面作密封、防腐、防锈处理，更换坏的保温层，并对系统进行风压、风量的检测和调整。净化空调系统外机，应请专业人员对空调外机进行清洁，清洗周期为1年1次。中效过滤器根据使用情况（压差、过滤器颜色）来判断是否需要更换，使用频繁时1年更换一次。高效过滤器更换周期根据对洁净区的尘埃粒子、压差、沉降菌等检测结果来综合判断制定更换维护计划。完成维修保养应及时填写记录，记录应详细描述维护维修内容。9液氮储存系统及供应系统应每天检查液氮塔或液氮储槽（罐），确保塔或储槽（罐）内有充足的深低温液氮，液氮增压系统运行正常。应定期检查储存区域的液氮储存罐的运行情况，包括温度、液氮液面高度、报警记录、罐口、罐体是否有结霜情况等。应依据供应商提供的维护保养规程，制定液氮储存系统及供应系统的维护计划，按计划联络供应商实施相应的维护保养。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程并穿戴好防护服才能进行相关操作。10清洁建立设施设备的清洁规程，并定期开展相应的清洁工作，以确保环境能达到制备工艺及相关法规的要求。清洁范围包括但不限于洁净区天花板、墙面、门、玻璃、地面、边台、设备、垃圾桶、传递窗、插座、开关、送风口、排风口、洗手池、烘手器、鞋柜等；非洁净区设备设施、边台、货架、门、窗、水槽、用具、地面等。每次清洁后需对洁净区空间进行消毒灭菌，紫外照射至少30min或臭氧熏蒸至少1h或其他的证明有效的消毒方法。清洁人员需经过相关清洁理论及操作的培训，并进行考核，方可进行清洁操作。进入洁净区前应通过洗手更衣操作考核并获得准入授权。洁净区使用专用净化吸尘器、洁净区专用拖把拖布、水桶、无尘布等进行清洁。非洁净区使用吸尘器、拖把、水