3《食品添加剂纳他霉素》标准文本

GB25532—2010食品安全国家标准食品添加剂纳他霉素2010-12-21发布2011-02-21实施中华人民共和国国家标准中华人民共和国卫生部发布GB25532—2010I前言本标准的附录A为规范性附录。GB25532—20101食品安全国家标准食品添加剂纳他霉素1范围本标准适用于由纳塔尔链霉菌（Streptomycesnatalensis）受控发酵后制得的食品添加剂纳他霉素。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。3分子式、结构式和相对分子质量3.1分子式C33H47NO133.2结构式3.3相对分子质量665.73（按2007年国际相对原子质量）4技术要求4.1感官要求：应符合表1的规定。表1感官要求项目要求检验方法色泽白色至奶油黄色取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽和组织状态，并嗅其味。气味几乎无臭组织状态结晶性粉末4.2理化指标：应符合表2的规定。GB25532—20102表2理化指标项目指标检验方法纳他霉素（以干基计），w/%≥95.0附录A中A.3比旋光度αm(20℃,D)/[(º)·dm2·kg-1]+250~+295附录A中A.4干燥减量，w/%≤8.0GB5009.3减压干燥法灼烧残渣，w/%≤0.5GB/T9741apH5.0~7.5附录A中A.5铅（Pb）/（mg/kg）≤2GB5009.12a称样量约为2g。GB25532—20103附录A（规范性附录）检验方法A.1一般规定除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682—2008中规定的水。分析中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。本试验所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2鉴别试验A.2.1溶解性难溶于水，微溶于甲醇。溶于冰乙酸及二甲基甲酰胺。A.2.2颜色反应取适量样品置于滴试板上，滴加盐酸，有蓝色产生；滴加磷酸，产生绿色，几分钟后变为淡红色。滴加酸的量以能够完全润湿或溶解纳他霉素的样品为度。A.2.3紫外吸收光谱准确称取25mg样品，转移至100mL容量瓶中，加5.0mL水湿润样品。加50mL冰乙酸-甲醇溶液[冰乙酸∶甲醇＝11000(∶体积比)]，在避光条件下震摇至溶解。再用冰乙酸-甲醇溶液定容至刻度，混匀。移取2.0mL该溶液置于100mL容量瓶中，用冰乙酸-甲醇溶液定容至刻度，混匀。该溶液的紫外吸收光谱与标准样品溶液相比，具有相同的最大和最小吸收波长。A.3纳他霉素的测定A.3.1试剂和材料a)纳他霉素标准品。b)乙腈：色谱纯。c)乙酸铵。d)氯化铵。e)四氢呋喃。f)甲醇。g)盐酸溶液：0.1mol/L。A.3.2仪器和设备高效液相色谱仪：配紫外检测器（检测波长为303nm）。A.3.3参考色谱条件a)色谱柱：25cm×4.6mm（内径）色谱柱，内填充十八烷基硅胶；或其他等效色谱柱。b)流动相：称取3.0g乙酸铵和1.0g氯化铵，溶于760mL水中，混匀。加5.0mL四氢呋喃和240mL乙腈，混匀，用0.45μm的膜过滤器过滤。c)柱温：室温。d)流动相流速：3mL/min。e)进样量：20μLGB25532—20104注：系统适用性为重复注入标准溶液三次，所得响应面积的相对平均偏差小于1.0％。A.3.4分析步骤A.3.4.1标准溶液的制备称取约0.02g纳他霉素标准品，精确至0.0001g，置于100mL容量瓶中，加入5.0mL四氢呋喃，超声波震荡10min。加入60mL甲醇，旋转至溶解。加入25mL水，混匀后冷却至室温。加水定容至刻度，混匀，用0.45μm的膜过滤器过滤。A.3.4.2试样液的制备称取约0.02g试样（精确至0.0001g），转移至100mL容量瓶中，加入5.0mL四氢呋喃，超声震荡10min。加入60mL甲醇，旋转至溶解。加入25mL水，混匀后冷却至室温。加水定容至刻度，混匀，用0.45μm的膜过滤器过滤。A.3.4.3测定在A.3.3参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，记录主峰面积，根据公式计算出试样中纳他霉素的含量。A.3.5结果计算纳他霉素的含量X1按公式（A.1）计算：100X101×⎟⎟⎠⎞⎜⎜⎝⎛×⎟⎟⎠⎞⎜⎜⎝⎛−××=SUUSSAAMCMX）（%………………………（A.1）式中：X1——试样中纳他霉素的含量，%；MS——纳他霉素标准品的质量，单位为克（g）；CS——纳他霉素标准品中标示的纳他霉素的含量，%；MU——试样的质量，单位为克（g）；X0——实测试样的干燥失重，%；AU——试样液色谱分析得到的主峰面积；AS——标准溶液色谱分析得到的主峰面积。实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2%。A.4比旋光度的测定A.4.1称取适量试样，以冰乙酸为溶剂，配制成10mg/mL的试样冰乙酸溶液，用旋光仪进行测定，同时做空白对照。测定温度为20℃±0.5℃。比旋光度αm(20℃,D)数值以(°)·dm2·kg-1表示，按公式(A.2)计算：…………………………（A.2）式中：α——测得的旋光角,单位为度(°)；l——旋光管的长度,单位为分米(dm)；()αρααlDCm=°,20GB25532—20105ρα——溶液中有效组分的质量浓度,单位为克每毫升(g/mL)。A.4.2其他按GB/T613-2007的规定进行。A.5pH的测定称取适量试样，配制成10mg/mL的试样水溶液，用pH计测定pH。___________________________