LI-6400光合仪测量使用及怎么测定光合速率

LI-6400光合仪使用讲解一、原理及构造二、使用前注意事项三、仪器操作四、使用过程碰到的问题光合作用基本原理6CO２+6H２OC６H１２O６＋６O２光合仪测定原理：差分法，即测量样品室和参比室之间CO2的浓度差。一、原理及构造光合仪气体流程图匹配原理示意图一、测量参数缩写参数单位行号CO2R_µml参比室CO2浓度µmolCO2mol-1CO2S_µml样本室CO2浓度µmolCO2mol-1H2OR_mml参比室H2O浓度mmolH2Omol-1H2OS_mml样本室H2O浓度mmolH2Omol-1Aflow_µml样本室气体流量µmols-1BRH_S_%样本室相对湿度%B、fRH_R_%参比室相对湿度%Td_R_%参比室露点温度℃Td_S_%样本室露点温度℃fPrss_kPa大气压kPaParIn_µm叶室内光照强度µmolm-2s-1ParOutµm叶室外光照强度µmolm-2s-1GTblock℃冷却器温度℃Tair℃叶室空气温度℃Tleaf℃叶片温度℃HHH:MM:SS时钟Battery电池电压VI二、计算参数缩写参数单位行号△CO2_µml参比室与样本室的CO2浓度差µmolCO2mol-1△H2O_µml参比室与样本室的H2O浓度差mmolH2Omol-1BPhoto净光合速率µmolCO2m-2s-1Cond气孔导度molH2Om-2s-1Ci胞间CO2浓度µmolCO2mol-1Trmmol蒸腾速率mmolH2Om-2s-1CCi/Ca胞间CO2浓度与空气CO2浓度之比VpdL基于叶温的蒸气压亏缺kPaVpdA基于气温的蒸气压亏缺kPaDBLC_mol叶片边界层总导度molm-2s-1G二、使用LI-6400测定之前注意事项1、处理及叶片的选取：叶片生长环境一致，且能代表满足实验目的光环境。叶龄要求一致。避免使用衰老和不成熟叶片叶片之间无相互遮荫的叶片。生长状况良好叶片，包括无病虫害、无损伤测定过程中尽量保持叶片原位状态，包括位置，角度等2、测定时间：最适测量时间为上午9:00~11:00，即双峰植株第一个光合状况最佳时间，如果是单峰植株，则可以适当延长测定时间。3、取样量：每个测定需要重复，至少3个，具体重复次数应使用统计学的方法来确定三、LI-6400光合仪的使用方法硬件连接：安装演示缓冲瓶的注意事项软件及操作说明软件及操作说明1.开机仪器硬件连接后，调节CO2、H2O调节旋钮为完全BYPASS状态，在确认电池已连接好并且电量充足的情况下，打开主机右侧中部的黑色电源开关。需要选择所需要的叶室，确定后，会显示“是否连接叶室和红外气体分析器，选择“Y”。确认即可进入系统主菜单（见右图）。12操作系统主菜单，包括欢迎菜单WelcomeMenu、配置菜单ConfigMenu、校准菜单CalibMenu、测量菜单NewMsmnts和应用菜单UtilityMenu五个功能菜单。每个功能菜单下都有一个红色的功能键(F1-F5)，一般使用者请不要对仪器进行“配置“和校准。2.进入测量菜单NewMsMnts在主菜单界面下，按NewMsMnts菜单下对应的F4功能键进入测量菜单，界面显示如右图。屏幕可同时显示三行参数和一行功能菜单。但LI-6400并非只有这三行参数和一行功能菜单。参数行功能行3.存储文件的建立在第一行功能菜单下，按“OpenLogfile”下边对应的功能键F1建立新文件，并利用向前删除的箭头backspace把文件名删除，输入自己定义的文件名，然后按“Enter”键，这时LI-6400会提示“Remark”，输入用于小区的标识，之后按“Enter”键，这时机器测量主界面中原显示“OpenLogfile”的地方变为显示“Log”。如右图。4.匹配按测定菜单下，关闭叶室，按功能菜单中的“Match”下边对应的F5功能键来匹配两个分析室。使参数△CO2是否为±0.5之内，否则说明此时分析仪的参比室和样本室的测量数值不相同，若没有符合要求，按MATCHIRGAs下边对应的F5功能键，等待匹配完成后，按exit下边对应的F1功能键退出匹配程序，返回测量主界面。5.测定开机预热15分钟后开始测定，选取好叶片（若叶片面积小于6cm2，则需先转至第6步设置叶面积），夹入叶室，然后使叶室垂直向阳。等待b行的参数△CO2和C行的Photo（净光合速率）值基本稳定的情况下（△CO2的变动幅度在0.5以内），即可按测定菜单界面中的“LOG”下边对应的F1功能键来记录数据，也可以按手柄左边的黑色按钮来记录数据（需要按住两秒种）。记录数据后打开叶室，换上其它叶片继续测量即可。“LOG”下的数字为测定样品数量。6.叶片面积的确定如果叶片不规则或整体小于叶室，需要使用叶面积仪来测量叶片在叶室内的实际测量面积，并在测量菜单内第三行（按键盘键“3”)功能菜单中AREA下按F1功能键输入实际的测量面积后再进行测量。7.关机按“esc”键，退回主界面，按关机键。以上为测定环节，一下为数据传输及其它注意之处。调节CO2和H2O为BYPASS和SCRUB中间状态。将仪器装箱。8.数据的传输在LI-6400开机以前，利用随机带的数据线连接计算机与LI-6400，开机，主菜单下按UtilityMenu菜单下对应F5，进入应用菜单并选择“fileExchangeMode”后回车确认。安装后启动LI-6400fileEx程序。点击“Connect”，显示屏的左边是计算机中的文件系统，右边是LI-6400系列光合仪内的文件系统，利用鼠标左键在右边的窗口中选择需要复制的文件，拖动到左边窗口内准备放置这个文件的文件夹中。如果需要从LI-6400中删除这个文件，先选定该文件，然后按右侧下边的回收站的图标，删除这个文件。9.休眠模式LI-6400光合仪具有休眠功能。主菜单下按UtilityMenu菜单下对应F5，进入应用菜单并选择“Sleepmode”后回车确认。选择“Y”，这时机器处于休眠状态。需要唤醒时，按任意键后，再按ESC键即可进入主界面。11.叶室.维护叶室泡沫垫圈非常重要。光合仪不使用时，应松开叶室闭锁。12.电缆.a.注意不要将固定螺丝旋的太紧b.拔卸电缆时，要握住插头，不要直接拉电缆线c.在测量时显示“IRGAsNotReady”，很有可能就是在使用中拔电缆不正确所致d.存放时，要将电缆盘起来。**光-光合速率响应曲线测定开机前安装LED光源。LED光源取代上部叶室的位置，LED的光传感器接头替代原叶室的内置光量子传感器接头，注意不要忘记安放3个O型圈。开机操作如上述步骤1-2。注意在步骤2中的配置选择中应选“2×3OpaqueLED”。进入“NewMsmnts”（按F4）后，进行步骤4.1-4.3的操作。按“label”键，选择功能菜单5（显示屏最底行），按“AutoPROG”(F1)进入。选择“LightCurve”回车，按提示进行文件命名、输入备注内容等操作。在“DesiredLampsetting”中输入实验者设计的光量子通量变化值，如2000180016001400120010008005003001005020等，各值间以空格键隔开。顺序出现的提示问题及回答如下：Minimumwaittime(secs)60Maximumwaittime(secs)180Matchif|ΔCO2|lessthan(ppm)5程序启动后按“Label”进入功能菜单1，会发现在“Log”键前出现一个“*”，这表明刚刚设定的自动程序正在运行，每记录一次数据仪器会鸣叫一声，当整个程序结束后，“*”会消失。**光合日变化测定实验准备及要求：选择晴朗的天气。测定日变化时对照和处理材料必须时同一天测定，不同天测定的不能比较。实验前一天将仪器充满电，检查仪器的吸收管，调试好仪器。一般日变化测定时间为：6点8点10点12点14点16点18点。（可以根据自己的实验适当减少一个点；会产生午休的作物中午要增加一个点）四、使用过程碰到的一些问题：1.在匹配时出现泄漏（leak)提示：原因：1、CO2_R和CO2_S未稳定，匹配时会出现此假报警；2、可能缓冲瓶容量不够；3、如果连续匹配2~3次后仍不消失，则为真漏气，请检查：a.通气管道未连接好；b.叶室未夹紧；c.气路垫圈丢失或未装好；d.叶室密封圈失去弹性。2.光合值不稳定，可能原因及措施：a.稳定时间不够，可等待1~2分钟。b.参比室二氧化碳浓度变化大（超过0.2）。更换较大的缓冲瓶，保持外界输入空气稳定。c.样本室浓度不稳定，检查叶室是否漏气，需要更换密封圈。3.光合值失真光合失真指的健康的植物叶片、光照充足的条件下，出现负值、微小值或者不合理的高光合作用。可能原因叶面积是否正确、流量是否正常、气压是否正常、二氧化碳浓度是否合适。需要检查上述指标，进行调整。如：调节CO2和H2O旋钮是否到达BYPASS（不能过紧）状态。