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鼠尾DNA提取液配方:PBND:PCRbufferwithnonionicdetergents终浓度KCL50mMTris-HCL(PH8.3)10mMMgCL22.5mMgelatin0.1mg/mlNP400.45%v/vTween200.45%v/vTailDNAforPCR:1.每份鼠尾加200ul上述PBND,另加蛋白酶K2ul(终浓度100ug/ml)。55°摇床摇过夜);2.95°加热10min;3.10000rpm离心5min;4.取上清2ul作为模板作PCR。RCPprotocol:20ul体系:Mix10ul(购买的成品,含taq酶,dNTP,溴酚蓝等)DNA2ulPrimer(10uM)上下游各1ulddH2O至20ul反应程序:94℃,5min40cyclesof94℃,30sec60℃,30sec(退火温度根据不同引物条件适当调整)72℃,30sec72℃,5min12℃,forever琼脂糖凝胶电泳
本文标题:鼠尾DNA提取方法
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